分光光度法原理要求照射在样品池上的单色光必须对应于样品吸收光谱中的某一个吸收峰的波长。由于仪器的制造和调整误差,单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。样品中绝大部分的主要吸收峰都有一定的宽度,对波长准确度要求允许宽些。但是,当吸收峰宽度较小,而且吸收峰两侧边缘比较陡直,此时波长准确度的影响就必须引起注意。很显然,透射比或吸光度的误差越大,测试结果的可信性越差,从而影响到测试数据的准确性。上海元析的光度计怎么样?重庆光谱仪光度计教程
一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。双光束型则是通过一个斩光轮(mirroredchopperwheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以较小化光漂移(lampdrift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。黑龙江分光光度计型号上海元析的光度计是否结实耐用?
在上述6个容量瓶中对应的溶液中铁的含量不同其中铁含量为,其余溶液构成标准系列溶液。并用移液管吸取,并编号为7。将溶液放置15min左右;3、接通722N分光光度计电源,调节分光光度计的透光度T示数为(即T%=100%)发现此时吸光度A的示数位,波长调节至510nm条件下;4、拿出比色皿,一次只能测四种溶液,先用1、2、3、4号容量瓶中的溶液分别润洗(不能搞混了),并依次倒入编号溶液(不能倒太满,否则容易溢出),用面巾纸擦干比色皿表面尤其是光滑的一面。将擦干装有对应溶液的比色皿依次放入分光光度计的光路中使测定的顺序为1、2、3、4(要盖上仪器的盖子)。记录对应的吸光度;5、将4上述测完的比色皿拿出,将溶液倒入废液缸中,先用蒸馏水洗净4只比色皿。在按4步骤中的方法进行操作,此时的溶液编号为5、6、7。记录对应的吸光度;6、将记录的数据在电脑上用ORANGE软件进行处理。并绘出相应的图,并根据原理求出原始待测溶液中铁的含量;7、实验完毕断开分光光度计电源,清洗玻璃仪器和比色皿,整理实验台离开实验室。实验数据处理结果记录及讨论标准系列的实验数据及测定结果铁标准溶液/mL铁含量。
罗丹明B的标准溶液的荧光光谱如图4所示。短波长侧的荧光被再次吸收,导致标准溶液的浓度变高的同时峰顶向长波长侧变化。根据577nm的荧光强度值创建的标准曲线如图5以及图6所示。如图5所示,在ug/ml(Abs)或更高的高浓度区域,标准曲线是弯曲的,但在图6的低浓度区域,可获得线性度良好的标准曲线。3比较结果、定量下限值来比较灵敏度与应用报告,使用标准曲线和10次空白测定中计算得的标准偏差σ,计算出了定量下限值(10σ)和检测下限值(3σ)。另外,采用了线性度较高的标准曲线。UV-2600i和RF-6000的定量下限值和检测下限值如表3所示。从通过本实验算出的定量下限值的比可知,RF-6000的灵敏度较高,是UV-2600i的400倍以上。即使对图3和图6的低浓度区域的标准曲线进行比较,图6(RF-6000)的结果中得到了离散较小的标准曲线。与对未被样品吸收的照射光进行检测的吸光光度法不同,荧光光度法以零为标准检测荧光,因此噪声水平低,可得到较高的灵敏度。UV-2600i和RF-6000的标准曲线的相关系数的平方值与浓度范围的关系如表4所示。另外,使用UV-2600i时,低于空白以外的定量下限值的点除外。即使在未达到UV-2600i的定量下限值的区域(0~)。上海元析光度计安心售后。
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首先,应保证比色皿不倾斜放置。稍许倾斜,就会使参比样品与待测样品的吸收光径长度不一致,还可能使入射光不能全部通过样品池,导致测试比准确度不符合要求。其次,应保证每次测试时,比色皿架推拉到位。若不到位,将影响到测试值的重复性或准确度。还应保证比色皿的清洁度,延长其使用寿命。2、干燥剂的使用问题。干燥剂失效将导致:a.数显不稳、无法调“0”点或“100%”点(电路或光电管受潮)。b.反射镜发霉或沾污,影响光效率、杂散光增加。鉴于上述原因,分光光度计的放置地点应远离水池等湿度大的地方、干燥剂应定期更换或烘烤。3、仪器的工作环境应避免阳光直射、避免强电场、避免与较大功率的电器设备共电、避开腐蚀性气体等。文章来源网络,转载只为知识分享,如涉及版权及稿费问题,请与我联系END食品伙伴网公众号矩阵请点击小图,长按识别二维码食品伙伴网食品论坛食品质量管理食品标法圈食品伙伴网订阅号食品实验室服务国际食品食学宝。重庆光谱仪光度计教程