高效液相色谱梯度洗脱
类似于GC中的程序升温。已成为现代高效液相色谱中不可缺少的部分。梯度洗提,就是载液中含有两种(或更多)不同极性的溶剂,在分离过程中按一定的程序连续改变载液中溶剂的配比和极性,通过载液中极性的变化来改变被分离组分的分离因素,以提**离效果。梯度洗提可以分为两种:
a.低压梯度(也叫外梯度):在常压下,预先按一定程序将两种或多种不同极性的溶剂混合后,再用一台高压泵输入色谱柱。
b.高压梯度 ( 或称内梯度系统 ) :利用两台高压输液泵,将两种不同极性的溶剂按设定的比例送入梯度混合室,混合后,进入色谱柱。
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高效液相色谱分离原理
空间排阻
(Steric Exclusion Chromatography)
空间排阻色谱法以凝胶(gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及孔穴旁流过。在试样中一些太大的分子不能进入胶孔而受到排阻,因此就直接通过柱子,首先在色谱图上出现,一些很小的分子可以进入所有胶孔并渗透到颗粒中,这些组分在柱上的保留值比较大,在色谱图上***出现。
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高效液相色谱分离原理
液-液分配
(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱,溶质在两相间进行分配。达到平衡时,服从于高效液相色谱计算公式:
式中,cs—溶质在固定相中浓度;cm—溶质在流动相中的浓度; Vs—固定相的体积;Vm—流动相的体积。LLPC与GPC有相似之处,即分离的顺序取决于K,K大的组分保留值大;但也有不同之处,GPC中,流动相对K影响不大,LLPC流动相对K影响较大。
a.正相液-液分配色谱法(Normal Phase liquid Chromatography): 流动相的极性小于固定液的极性。
b.反相液-液分配色谱法(Reverse Phase liquid Chromatography): 流动相的极性大于固定液的极性。
c.液-液分配色谱法的缺点:尽管流动相与固定相的极性要求完全不同,但固定液在流动相中仍有微量溶解;流动相通过色谱柱时的机械冲击力,会造成固定液流失。上世纪70年代末发展的化学键合固定相(见后),可克服上述缺点。
赛默飞世尔Vanquish 超高效液相色谱系统产品简介
Thermo Scientific™ Vanquish™ Duo UHPLC 系统,将两套梯度流路整合在一个超高效液相系统里,并能实现三种不同工作流程(双LC,串联液相或LCMS质谱前端,以及反梯度)这些工作流程可通过节约时间、减少每份样品的成本、在不额外增加工作台面的情况下提高仪器设备容量并更加高效地利用资源,以提升生产率。Vanquish Duo UHPLC 系统可在不影响性能、稳定性或易用性的情况下扩大 Vanquish 平台的优势。 更高的流速:达 5 mL/min。
Thermo Scientific™ Vanquish™ UHPLC 系统 的创新技术和对细节设计的注重为** UHPLC 设定了新标准,即在得到更多结果和更好分离的同时实现更简易的人机交互。专为独特的高效 1.5µm 实心核颗粒 Thermo Scientific™ Accucore™ Vanquish™ C18 UHPLC 色谱柱而设计,具生物相容性且完全整合的该系统拥有一系列特性:高通量工作流程的高样品容量、业内**的泵送能力、极高的 S/N 和线性、双模式恒温、主动预加热,以及系统中由金标准 CDS 软件驱动的更多特性。创新气流冷却模式可保证样品比较大的完整性。赛默飞世尔Vanquish液相色谱系统
使用适合反向梯度的 Vanquish Duo 提高实验室定量检测能力。专业高效液相色谱系统厂家直销
液相色谱理论
发展简况
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相,称为经典液相色谱法,此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。
它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀,小颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱法(High Pressure Liquid Chromatography,HPLC)。又因分析速度快而称为高速液相色谱法(High Speed Liquid Chromatography,HSLP)。也称现代液相色谱。
专业高效液相色谱系统厂家直销上海禹重实业有限公司是一家从事仪器科技、医疗科技、检测科技领域内的技术咨询、技术服务,仪器仪表的修理,仪器仪表、实验室设备、机械设备及配件、机电设备及配件、电子产品、化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用易爆物品、易制毒化学品)、第二类医疗器械的销售,机械设备租赁,电子商务,货物进出口,技术进出口。的公司,致力于发展为创新务实、诚实可信的企业。公司自创立以来,投身于光谱仪,色谱仪,质谱仪,样品前处理,是仪器仪表的主力军。禹重科技始终以本分踏实的精神和必胜的信念,影响并带动团队取得成功。禹重科技始终关注仪器仪表行业。满足市场需求,提高产品价值,是我们前行的力量。
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