液相色谱与气相色谱的比较
液相色谱所用基本概念:保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论:塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致,但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相,而液体和气体的性质不相同。此外,液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同,所以,液相色谱与气相色谱有一定的差别。
主要有以下几力‘面:
①操作条件及应用范围不同
②液相色谱能完成难度较高的分离工作
③由于液体的扩散性比气体的小105倍,因此,溶质在液相中的传质速率慢,柱外效应就显得特别重要;而在气相色谱中,由色谱柱外区域引起的扩张可以忽略不计。
④液相色谱中,制备样品简单,回收样品也比较容易,而且回收是定量的,适合于大量制备,但液相色谱尚缺乏通用的检测器,一起比较复杂,价格昂贵。在实际应用中,这两种技术是相互补充的。
综上所述,液相色谱具有柱效高,选择性高,灵敏性**析速度快,重复性好,应用范围广等优点,该法已成为现代分析技术的主要手段之一。目前在化学,化工,医药,生化,环保,农业等科学领域获得***的应用。
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什么是液相色谱?
液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中.为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。
经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱,因此固定相的粒度不可能太小(100μm~150μm左右)。分离后的样品是被分级收集后再进行分析的,使得经典液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢,而且操作也比较复杂。直到20世纪60年代.发展出粒度小于10μm的高效固定相,并使用了高压输液泵和自动记录的检测器,克服了经典液相色谱的缺点,发展成高效液相色谱,也称为高压液相色谱。
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串联 LC 或 LC-MS 的 Vanquish Duo 系统将两个泵和两个色谱柱之间的分析分开。一个泵运行分析梯度,而另一个泵运行再生平衡梯度。您可通过该项配置,使用两个相同的色谱柱更快地运行序列,而不影响数据品质。
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反梯度应用 Vanquish Duo 系统
提高定量分析水平,获取更多未知化合物信息
反梯度的 Vanquish Duo 系统可通过电雾式检测技术(CAD)为所有检测分析物提供一致的响应。等度分离可产生一致的 CAD 响应,但某些分离需要采用梯度洗脱导致相应不一致。Vanquish Duo系统通过使用第二个泵对检测器输送反向梯度,可实现:
• 采用 CAD 检测器在梯度洗脱条件下获得一致的响应
• 在无标准品的情况下,可靠地定量已知和未知化合物
• 通过自动反梯度计算功能考查所有系统体积,简化了方法设置
无论化合物何时在梯度中进行洗脱,进入检测器的洗脱液通过反梯度补偿功能,始终保持相同的溶剂组成。即使缺乏特定化合物的单个标准品,也能够可靠地为您提供一致的定量响应信息。
通过添加可选 Thermo Scientific™ Vanquish™ 加载装置,提升至 8832 样品容量(23 孔板)。
双LC应用 Vanquish Duo 系统:
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高效液相色谱相关术语
色谱图(chromatogram)——样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elution profile)。
基线(base line)——经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。
噪音(noise)——基线信号的波动。通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。
漂移(drift)——基线随时间的缓缓变化。主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起,柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。
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