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染色的原理和临床意义：在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。多数采用一种特异性酯酶加一种非特异性酯酶染色，常用的有α-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS－D萘酚酯酶双染色、α-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS－D萘酚酯酶双染色等。反应的原理基本上同各自的染色原理，同一张涂片上的细胞要分别在两种不同的基质液中作用一定时间，较后复染、显微镜观察。酯酶双染色可同时观察两种不同的白血病细胞，因此在鉴别白血病类型方面明显优于单项染色。急性粒－单核细胞白血病 该染色法在急性粒－单核细胞白血病的同一张涂片上可分别出现α-NBE染色和NAS-DCE染色阳性反应的细胞，甚至少数病例在单个细胞内同时出现以上两种酯酶染色的双重阳性反应，因此酯酶双染色反应在急性粒－单核细胞白血病的诊断上具有独特价值。应该尽可能割取生活着的组织块，并随即投入固定液。山东哪家提供糖原染色试剂盒厂家直销

糖原染色的原理与操作方法是什么：（1）原理：过碘酸将血细胞内的糖原氧化，生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合，形成紫色化合物，定位于细胞质中。（2）操作方法：干燥涂片，滴加甲醛固定液固定10分钟，流水冲洗，晾干。滴加过碘酸溶液作用20分钟，流水冲洗，晾干。滴加雪夫液作用60分钟，流水冲洗，晾干。滴加甲基绿溶液复染10分钟，流水冲洗，晾干镜检。细胞的组织化学方法，是研究细胞成分常用的方法之一。它是利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应，从而在细胞局部形成有色沉淀物，再通过显微镜对组织内的生物化学成分进行定性、定位、定量研究。浙江品质好的糖原染色试剂盒服务电话巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞PAS染色为阴性。

糖原D-PAS染色液：使用方法：1、两张相同切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇入水。2、一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。另一张不用淀粉酶溶液处理，入水中1h作为对照。3、流水冲洗两张切片各5～10min。4、入过碘酸溶液，室温放置5～8min，一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。6、入Schiff Reagent，置于室温阴暗处浸染10～20min。7、自来水冲洗10min。8、入Mayer苏木素染色液，染细胞核1～2min。9、(可选)酸性乙醇分化液分化2～5s。10、自来水冲洗10～15min，更换蒸馏水清洗使其返蓝。11、二甲苯透明，中性树胶封固。

糖原染色正常值:正常情况下，红细胞系统的原、幼红细胞和成熟红细胞;粒细胞系统的原粒细胞、原单核细胞和大多数淋巴细胞为阴性反应。自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。糖原染色临床意义:(1)急性淋巴细胞白血病、淋巴组织恶性增生性疾病、红白血病、戈谢病的原始细胞呈强阳性反应或阳性反应;缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍、骨髓增生异常综合征亦可呈阳性反应;急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、良性淋巴细胞增多症、尼曼-皮克细胞呈阴性反应或弱阳性反应。巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等，幼红细胞为阴性反应。偶有个别幼红细胞呈阳性反应。(2)帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞，巨核细胞呈强阳性反应;霍奇金细胞呈弱阳性或阴性反应。(3)帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞，腺细胞呈阳性反应。切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。

PAS染色试剂配制及染色方法：1.材料与方1.1 实验材料新鲜小白鼠肝脏、肾脏标本各30例，均来自我室实验材料。1.2 主要试剂1.2.1 AAF固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液，其配方：无水乙醇80mL，冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL，冰醋酸100mL，95％酒精600mL。1.2.3 过碘酸溶液 0.5g过碘酸（HIO）溶于100mL蒸馏水或者70％酒精溶液中，或者按如下配方配制：过碘酸0.8g，95％乙醇70mL，醋酸钠0.27g，水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4 无色品红液（Schiff氏液） 在三角烧内加入蒸馏水500mL，煮沸后，在保持微沸的情况下，加入碱性品红2.5g，并不断摇动约5min（勿使之沸腾），使碱性品红彻底溶解（溶解液为深红色）。冷却到50℃时，过滤，加入1N盐酸50mL，再待冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠2.5g，塞住瓶口，摇动容器以充分混合（此时颜色明显变淡），然后避光放置或冰箱内24h。故PAS染色有助于三种急性白血病类型的鉴别。江西提供糖原染色试剂盒服务电话

无水酒精渗透较慢，而且容易产生极化。山东哪家提供糖原染色试剂盒厂家直销

PAS染色的临床意义①帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞或Reed-Sternberg细胞，前者呈强阳性反应，后者呈弱阳性或阴性反应。②帮助鉴别戈谢细胞和尼曼-匹克细胞，前者呈强阳性反应，后者呈弱阳性反应，且空泡中心为阴性反应。③帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞，后者呈强阳性反应，阳性反应物质为红色细颗粒状或粗颗粒状，有时呈红色块状。白细胞系统：急性淋巴细胞白血病时白血病性原始淋巴细胞的阳性反应物质为红色粗颗粒状或红色块状，底色不红；急性粒细胞白血病时，白血病性原始粒细胞的阳性反应物质呈均匀分布的红色细颗粒状或呈均匀红色；急性单核细胞白血病时，白血病性原始单核细胞的阳性反应物质呈红色细颗粒状，弥散分布，有时在胞浆的边缘处颗粒较粗大。山东哪家提供糖原染色试剂盒厂家直销

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