糖原染色――检查项目的注意细节:其判断标准随细胞不同而异,一般分为5级,即0~4级。糖原染色――检查项目的一般步骤:(1)新鲜干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸馏水冲洗数次,待干。(2)浸入10g/L过碘酸水溶液中10min,蒸馏水冲洗数次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自来水冲洗约5min,再用蒸馏水冲洗,然后用20g/L甲基绿复染20min,水洗,晾干。糖原染色――检查项目结果解读:(1)新鲜干燥血片或骨髓片于95%乙醇中固定10min,蒸馏水冲洗数次,待干。(2)浸入10g/L过碘酸水溶液中10min,蒸馏水冲洗数次,待完全干燥。(3)放入雪夫液30min,用自来水冲洗约5min,再用蒸馏水冲洗,然后用20g/L甲基绿复染20min,水洗,晾干。生物膜与细胞器的研究。江西品牌糖原染色试剂盒生产厂家
糖原染色:方法固定液Carnoy固定液:纯酒精60 ml 冰醋酸10ml氯仿 30ml,也可以选用75%酒精配制1) 过碘酸酒清夜配法: 过碘酸(HIO .2H O) 0.4g 95%酒精 35ml M/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml) 5ml蒸馏水10ml 保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周.2)Schiff氏液: 0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解.冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸.冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存.3)Schiff氏酒**配置 Schiff氏液 11.5ml1NHCI 0.5ml纯酒精 23ml4)亚硫酸水 1%偏重亚硫酸蒸馏水180ml的树胶溶解。江苏糖原染色试剂盒服务电话可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
糖原染色试剂盒。含乙二醇基的多糖经过碘酸氧化,产生醛基,与雪夫(Schiff)试剂中无色品红结合,形成紫红色沉淀物定位于含糖原的胞浆中。该反应称为碘酸-雪夫(PAS)反应。(1)雪夫液配制:碱性品红1g溶于200ml沸水中,冷却60℃时过滤,加1mmol/L盐酸20ml,再冷却至25℃左右,加偏重亚硫酸钠(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗处24h,无色即可放冰箱中保存,呈微红色,则加活性炭1~2g,吸附过滤使成无色液体,放冰箱中保存。若溶液变红,即不能再用。(2)10g/L过碘酸水溶液:过碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸馏水至10ml。溶解后盖紧放冰箱备用,一般可用3个月,变黄则失效。
糖原染色的参考值及临床意义:1.慢性淋巴细胞白血病、淋巴肉瘤等恶性淋巴细胞增生性疾病,其淋巴细胞的PSA染色积分值增高;等淋巴细胞良性增生时,淋巴细胞积分值正常。医|学教育网搜集整理故该试验可用于鉴别良性与恶性淋巴细胞增生性疾病。2.红白血病时幼红细胞的PAS染色呈强阳性反应,积分值增高;溶血性贫血及巨幼细胞性贫血时,幼红细胞的PAS染色积分值在正常范围内,故该试验也可用于红白血病的诊断及鉴别幼红细胞增多的性质。3.急性粒细胞白血病时,原始及幼稚粒细胞PAS染色常呈阴性反应;急性淋巴细胞白血病时,原始及幼稚淋巴细胞常呈阳性反应;急性单核细胞白血病时,原始及幼稚单核细胞多呈强阳性反应。 故PAS染色有助于三种急性白血病类型的鉴别。巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞PAS染色为阴性。
粘液染色法:粘液一般有以下几点特性:(1) 对盐基性染料有亲合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。(2) 对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。(3) 遇醋酸发生沉淀,胃粘蛋白则除外。(4) 溶于弱碱溶液。常用的粘液染色有以下几种:1、P.A.S染色法:操作方法同前,结果;中性粘液性物质,某些酸性粘液物质呈红色,核呈蓝色。2、AB/P.A.S染色法:该种方法的特点是能同时显示出酸性和中性粘液物质。操作方法:(1)切片常规脱蜡入水。(2)3%醋酸液洗2分钟,入1%阿利新兰醋酸液(PH2.5)10-20分钟。(3)蒸馏水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)苏木素淡染2-3分钟,水洗。(6)常规脱水、封片。切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。福建品牌糖原染色试剂盒单价
可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。江西品牌糖原染色试剂盒生产厂家
糖原染色:细胞内含1,2-乙二醇基的多糖类经过碘酸氧化后产生醛基,与特殊染液作用,使无色品红变成红色化合物,沉淀于胞质之中。红色的深浅与细胞中起反应的1,2-乙二醇基的量呈正比。用于不典型巨核细胞与李—斯细胞的鉴别,前者PAS反应为强阳性,后者为阴性或弱阳性;用于高雪细胞和尼曼一匹克细胞的鉴别,前者PAS反应为强阳性,而后者反应为阴性或弱性。正常值正常情况下,红细胞系统的原、幼红细胞和成熟红细胞;粒细胞系统的原粒细胞、原单核细胞和大多数淋巴细胞为阴性反应。自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。江西品牌糖原染色试剂盒生产厂家
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注意事项:染色前:①切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。②捞片时,较好一张玻片捞一个组织,组织较好位于玻片的中间,美观的同时也利于脱蜡(有时二甲苯的液面低于组织片的时候,达不到脱蜡的目的)。③石蜡切片脱蜡到水时,一定要注意组织切片脱蜡务必要彻底(脱蜡时间不能太少)以使脱蜡后的组织达到真正的“干净”。否则剩余的未脱干净的石蜡粘附在组织表面,在染色时染色液未能充分与组织接触,较终导致染色效果不佳,甚至染不上颜色。④在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸,以避免脱蜡时把标签纸也浸没,致使标签纸上的胶黏到玻片上,造成染色不佳。取材必须新鲜,这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要。浙江糖原...