金华正规外泌体提取试剂产品介绍

外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯状形态、双层膜结构，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括一些病症细胞在内几乎所有类型的细胞（免疫细胞、神经细胞、干细胞)，都可以产生并释放exosome。Exosome内含有与细胞来源相关的蛋白质rRNA和microRNA，Exosome可通过细胞膜受体直接启动受体细胞，也可运输蛋白质、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA，甚至细胞器进入受体细胞，参与细胞间通讯。Exosome在免疫应答、炎症反应、血管生成、凋亡、凝血和废物处理等生理过程发挥关键作用，不同细胞来源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不尽相同，可作为多种疾病的早期诊断标记物，也能作为靶向药物的载体进行疾病治病。miRNA是一类22nt左右大小的非编码分子，它可以通过外泌体从一个地方转运到另外一个地方行使基因沉默功能。通过检测外泌体中miRNA表达变化，可以发现外泌体中miRNA特异性功能。逐渐取代超速离心法并推广开来。有些试剂盒操作简便，不用超速离心。金华正规外泌体提取试剂产品介绍

一类外泌体中常见的细胞质蛋白是Rabs蛋白，是鸟苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一种。它可以调节外泌体膜与受体细胞的融合，有文献报道称RAB4,RAB5和RAB11主要出现在早期以及回收的核内体中，RAB7和RAB9主要出现在晚期的核内体。现有大量的研究发现外泌体中含有40种RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌体中富含具有外泌体膜交换以及融合作用的膜联蛋白（包括膜联蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族（CD63,CD81和CD9)）、热休克蛋白家族（(HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些细胞特异性的蛋白包括A33（结肠上皮细胞来源）、MHC-Ⅱ(抗原提呈细胞来源)、CD86(抗原提呈细胞来源)以及乳凝集素（不成熟的树突状细胞）。其它一些外泌体中的蛋白包括多种的代谢类的酶（***DH,烯醇化酶1,醛缩酶1,PKM2,PGK1,PDIA3,GSTP1,DPP4,AHCY,TPL1,抗氧化蛋白,P4HB,LDH,亲环素A,FASN,MDH1和CNP）、核糖体蛋白（RPS3）、信号转导因子（黑色素瘤分化相关因子,ARF1,CDC42,人类红细胞膜整合蛋白,SLC9A3R1）、粘附因子（MFGE8、整合素）、细胞骨架蛋白以及泛素等。芜湖正规外泌体提取试剂厂家推荐根据外泌体表面的特异生物化学特性通过提取试剂的特异配方把外泌体从水相中沉降下来。

有的外泌体分离方法需要高速离心，需要使用大型机器，耗费近24小时的时间才能获得，非常不便。而高离心力也可能破坏囊泡。降低样品的质量。这项研究有望解决这一难题。在论文中，研究人员们提供了一种通过微流体和声学的独特组合从体液样品中捕获外泌体的新颖方法。他们开发的原始声学分选装置由两个倾斜的声学换能器和一个微流体通道组成，当这些传感器产生的声波相互碰撞时，形成产生一系列压力节点的驻波。每当细胞或颗粒流过通道并遇到一个节点时，压力会将细胞引导离开中心一点点。细胞移动的距离取决于大小和其他属性（如可压缩性），这样，当到达通道末尾时，不同大小和性质的细胞就能够被分离开来。这种方法分离得到的外泌体，基本上不改变其生物或物理特征，为开发评估人类健康以及疾病诊断和进展提供了有吸引力的新方法。

外泌体因诺贝尔医学奖而被众人知晓，也因其作为生命信息传递者，在体液中普遍存在及易获得性等特点被誉为液体活检"新贵"，成为疾病的精确诊断和治病研究的热点，尤其是在一些病症研究领域[。外泌体作为细胞间通信载体的作用现在已被普遍接受。外泌体包含胞质环境中富含的DNA，RNA，蛋白质和其它分析物，研究表明，外泌体中的运转RNA和蛋白质与一些病症的生长密切相关，有望作为诊断标志物。研究发现Vps4A是一个外泌体的重要调控因子，与肝病的发生有着密切的关系，Vps4A基因的表达下调肝病的发生及转移相关。通过microRNA高通量测序发现Vps4A基因能导致外泌体分泌肝病相关的重要microRNA，与肝病的发生密切相关。利用不同截留相对分子质量(MWCO)的超滤膜对样品进行选择性分离，便可获得外泌体。

miRNA因在机体内起着调节作用被认为有诊断的生物标志物的潜力，外泌体miRNA富集的变化可反映生理病理的改变。一些病症特异性循环外泌体miRNA已被开发为肺病的早期诊断生物标记。据报道，miR-23b-3p，miR-10b-5p和miR-21-5p是非小细胞肺病（NSCLC）患者有希望的预后生物标志物。外泌体与疾病治病（应用潜能）：外泌体由于其表面具有多种粘附蛋白已经成为基因治病的潜在载体，纳米尺寸和柔韧性使它们能够跨越主要的生物屏障，如血脑屏障（BBB）等。与脂质体制剂相反，外泌体是天然存在的分泌性膜囊泡，毒性较低，从它们在体内普遍存在可以推断出其在体内的耐受性很好。另外，外泌体固有的归巢能力暗示了它们在药物递送中的潜在效用。例如，源自黑色素瘤的外泌体优先进入前哨淋巴结，这种归巢能力可以用作药物的靶向递送。外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响，不利于下游实验，难以普遍普及。芜湖正规外泌体提取试剂厂家推荐

首先在无菌条件下提取人体体液，并用PBS缓冲液进行稀释。金华正规外泌体提取试剂产品介绍

外泌体的组成：外泌体主要含有融合蛋白和转运蛋白、热休克蛋白(HSP70)、CD类蛋白以及磷脂酶和其他脂质相关蛋白，但是不同来源的外泌体的组成有差异。外泌体的提取方式：1、离心法：此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足。2、过滤离心：这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性，但同样纯度不足。3、密度梯度离心法：用此种方法分离到的外泌体纯度较高，但是前期准备工作繁杂。4、免疫磁珠法：这种方法可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单，但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。5、色谱法：此种方法分离出的外泌体大小均一，但设备特殊，应用不普遍。金华正规外泌体提取试剂产品介绍

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