糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蜡切片脱蜡至水。(2) 0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液(过碘酸再结晶应重新配制使用)。(3)蒸馏水洗,70%酒精洗。(4)Schiff氏液15-30分钟。(Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用)(5)流水冲洗10分钟。(6)苏木素浸染细胞核2-3分钟。(7)脱水、透明、封盖。结果:糖原呈红色,细胞核呈蓝色。试剂 配制:(1)0. 5%过碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液。(2)Schiff氏 试剂 。碱性品红 1g蒸馏 水 200ml1N盐酸(98.3ml比重1.16盐酸,加入 蒸馏 水成1000ml) 20ml偏重亚硫酸钠或钾 1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水,搅拌加热沸腾,待冷却至50℃过滤,加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处,两天后溶液变桔黄色或草黄色,然后加入少量活性碳并震荡、过滤,此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色,染色效果较差。糖类从组织化学技术角度来分,可分为多糖、中性粘液物质。山东口碑好的糖原染色试剂盒报价
糖原染色(过碘酸-雪夫反应) 原理 多糖中乙二醇基 经过碘酸氧化成二醛基与无色品红结合, 形成紫红色化合物。沉积于含糖原的胞浆中。结果:胞浆中出现弥散状,颗粒状,块状红色为阳性。 无红色颗粒为阴性 _x000c_临床意义 1、正常血细胞的染色反应 粒系:原粒细胞糖原含量很低,随着细胞的分化成熟,糖原含 量逐增加,至成熟阶段糖原含量十分丰富。 淋巴细胞:糖原常凝聚成颗粒或块状。巨核细胞-血小板系统:PAS反应呈粗大的紫色颗粒或团块。 正常红系:阴性。对疾病诊断的意义白血病类型的鉴别: 急性粒细胞白血病:原始粒细胞呈阴性或弱阳性反应,以弥 散性为主; 急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞多呈粗颗粒、块状阳性反应。山东糖原染色试剂盒厂家供应亚硫酸钠须有浓厚气味,器皿必须洁净而干燥。
染色的原理和临床意义:原理:粒细胞和单核细胞胞浆中含有的过氧化物酶(peroxidase,POX)能将底物过氧化氢分解,产生新生态氧,它将四甲基联苯胺氧化为联苯胺蓝。联苯胺蓝自我脱氢氧化,显棕色四甲基苯醌二胺,再加入亚硝基铁**与联苯胺蓝结合,可形成稳定的蓝色颗粒,定位于细胞浆内酶所在的部位。临床意义: 临床上主要用于急性白血病类型的鉴别:急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞POX染色均呈阴性反应;急性粒细胞白血病 原粒细胞POX染色呈局灶分布的阳性反应;急性早幼粒细胞白血病 颗粒增多的早幼粒细胞POX染色呈强阳性反应;急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。
糖原染色 用于鉴别淋巴系统细胞增生的性质鉴别红细胞系统增生的性质[英文缩写]PAS[参考值]正常人淋巴细胞PAS反应积分正常人幼红细胞PAS反应积分[临床意义]恶性淋巴瘤、急慢性淋巴细胞白血病时PAS积分升高巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再障贫血时幼红细胞PAS反应多为阴性红血病、红白血病、骨髓增生异常综合征时幼红细胞PAS反应积分可40甚至高达100--200以上用于不典型巨核细胞与李-斯细胞的鉴别前者PAS反应为强阳性后者为阴性或弱阳性;用于高雪细胞和尼曼一匹克细胞的鉴别前者PAS反应为强阳性而后者反应为阴性或弱性。对盐基性染料有亲合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。
糖原染色(PAS):(1)原理:过碘酸将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合,形成紫色化合物,定位于细胞质中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分钟,流水冲洗,晾干。滴加过碘酸溶液作用20分钟,流水冲洗,晾干。滴加雪夫液作用60分钟,流水冲洗,晾干。滴加甲基绿溶液复染10分钟,流水冲洗,晾干镜检。(4)临床意义:根据染色阳性程度和阳性物形态鉴别主要用于急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病鉴别,还有助于红白血病与巨幼细胞贫血和溶血性贫血的鉴别诊断。在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸。浙江口碑好的糖原染色试剂盒推荐厂家
自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。山东口碑好的糖原染色试剂盒报价
特殊染色方法选择应遵循:1、特异性高、传统或经典的染色方法;特异、传统/经典的一些染色法在特殊染色方法的选择中往往作为选择。如显示淀粉样物质。刚果红染色作为经典的方法,比天狼星红、甲基紫等其他方法都要实用。淀粉样物质(刚果红及天狼星红染色)。2、染色流程相对简便、染液易配制的染色方法;选择染色流程简便的方法,无论对于量较多的整批次染色,还是较少量的染色均能够节省时间、更为便捷。选择染液易配制的方法,对自配染液(尤其是保存较短的染液)是较为重要的选择,不容易造成因染液配制问题而影响染色结果。如显示弹性纤维。醛品红染色法无论是从染色流程,还是染液配制都要比铁苏木精、间苯二酚碱性品红等染色方法要简单方便、省时,同时阳性着染对比度也很明显。山东口碑好的糖原染色试剂盒报价
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注意事项:染色前:①切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。②捞片时,较好一张玻片捞一个组织,组织较好位于玻片的中间,美观的同时也利于脱蜡(有时二甲苯的液面低于组织片的时候,达不到脱蜡的目的)。③石蜡切片脱蜡到水时,一定要注意组织切片脱蜡务必要彻底(脱蜡时间不能太少)以使脱蜡后的组织达到真正的“干净”。否则剩余的未脱干净的石蜡粘附在组织表面,在染色时染色液未能充分与组织接触,较终导致染色效果不佳,甚至染不上颜色。④在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸,以避免脱蜡时把标签纸也浸没,致使标签纸上的胶黏到玻片上,造成染色不佳。取材必须新鲜,这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要。浙江糖原...