育肥猪场荧光PCR检测试剂（冻干微球型）生物安全措施

当样本中的核酸在荧光PCR期间被扩增时，发生的荧光强度将在PCR热循环过程中的给定循环次数时获得特定阈值(CT)，且CT与样本中存在的核酸量成反比。目标核酸的检测可以在循环结束前的任何CT值报告。然而，大多数荧光PCR检测使用低于PCR循环数的临界值来确定何时检测被视为阳性。建立临界值有不同的原因和方法。Bustin等人建立了实时yingg定量PCR实验发表的MIQE指南，建议在95%检测率下的极限稀释度建立检测限（LOD）。建立LOD的CT也可以作为检测的临界CT值支持，并支持PCR检测的可重复性。同一个样品是不是CT值可检出的越大越灵敏呢？八方同创检测中心认为相同样品核酸浓度，CT值越小被检出越灵敏，因此不可以从单一样品CT值的大小去评估试剂的灵敏度，比对方案和比对试验应合理。在提核酸的基础下，想要提高灵敏度，优先选择冻干微球试剂。育肥猪场荧光PCR检测试剂（冻干微球型）生物安全措施

核酸扩增的基本概念始于RNA或DNA提取，然后通过在不同温度下的热循环对DNA进行指数扩增。温度变化为酶促反应提供了条件，导致RNA转化为DNA（如果是RNA，则为逆转录酶反应），随后是DNA变性、引物结合和聚合酶延伸DNA拷贝。然后温度循环重复约40次，理论上在每个温度循环期间DNA加倍，基于凝胶的常规PCR在普通兽医诊断实验室中使用较少。基于凝胶的PCR检测的主要限制是敏感性较低、解释主观以及获得结果所需的时间较长。基于凝胶方法的另一个主要限制是扩增后需要打开PCR管进行电泳，这可能是污染的来源。兽医诊断实验室主要的污染源来自于扩增产物气溶胶的污染，因此早期的凝胶的PCR检测（普通PCR）已经被扩增完成无需开盖的荧光PCR检测所替代。八方同创检测中心和实验室审计团队针对实验室污染案例有针对性的解决方案，助力实验室假阳性的识别。育肥猪场荧光PCR检测试剂（冻干微球型）生物安全措施ASFV是二十面体DNA病毒，是非洲猪瘟病毒科，非洲猪瘟病毒属的成员。八方同创荧光PCR检测试剂可检测。

质量控制是检测结果可靠的关键，八方同创冻干微球试剂盒明确规定了严格的质量控制标准。每次实验需同时设置阴性对照、阳性对照，且需满足以下条件：阴性对照FAM通道无Ct值显示，且ROX通道Ct值≤35；阳性对照FAM通道和ROX通道Ct值均≤35。只有同时满足以上两个条件，本次实验才有效，否则需重新进行检测。这种严格的质量控制机制，可有效排除实验过程中的污染、试剂失效等问题，确保每一次检测结果都真实可靠。八方同创研发团队努力的打磨产品，确保质量稳定。

在样本处理方面，八方同创冻干微球试剂盒支持免提取模式，大幅简化了操作流程，同时降低了样本处理过程中的污染风险。对于唾液、口鼻液、肛拭子或环境样品，只需用一次性棉签采集样本，直接放入样本处理液管中，旋转10次混匀，静置1分钟，即可完成核酸裂解；对于血液样品，用一次性滴管吸取1滴（15μL）全血或血清，滴入样本处理液管中混匀静置1分钟即可。需要注意的是，采集样本时应尽量避免杂质，不可用PBS、生理盐水等浸泡样品，加入样本后的处理液若浑浊，可能影响检测结果。八方同创冻干微球试剂运输中无需冷链运输，运输过程中温度在2–30℃，避免暴晒、高温、剧烈震动即可。

对非洲猪瘟病毒临床样品和标准品采用荧光 PCR 冻干微球试剂（LMA）与液体试剂分别进行检测开展比对试验。结果显示，冻干微球试剂在灵敏度、低拷贝核酸检出率、稳定性、便捷性等方面优于液体试剂，且具备操作简便、可搭配mini-PCR仪，适用于人员环境设施要求低、便携式移动式等场景，可为非洲猪瘟病毒核酸检测试剂的选择提供参考。

冻干微球在临床样本，标准品，低病毒载量样本的检测中检出率和灵敏度均具有优势，冻干微球试剂适用于各类样品类型，适用于低病毒载量样本的检测、异常样品复检分检，现场检查，可作为非洲猪瘟病毒核酸检测高效可靠的选择。且冻干微球试剂适用于免提取，与核酸提取和液体试剂的检测结果基本一致，操作更简便，时长更短。 液体试剂的配置需要专业的操作人员，需要实验室的条件。荧光PCR检测试剂（冻干微球型）病原学

八方同创公司的冻干微球试剂盒已在越南市场完成比对验证试验。育肥猪场荧光PCR检测试剂（冻干微球型）生物安全措施

荧光PCR可用于定量样本中的基因组或目标拷贝。此方法通常通过实时荧光PCR检测执行，其中具有已知量系列稀释RNA或DNA的标准曲线以每反应或每毫升为基础定量基因组拷贝。然后从该标准曲线推断临床样本中的核酸量。荧光PCR不确定样本中的活病毒浓度，可以检测PCR目标的基因组拷贝。多重PCR指在单个PCR中同时检测多个目标。使用多个引物、探针组来检测多个目标。八方同创多重荧光PCR检测试剂通过引探优化获得与单独检测每个目标相似的敏感性和特异性，从而实现可同时检测的目标数量。冻干微球型在快检场景中应用广。育肥猪场荧光PCR检测试剂（冻干微球型）生物安全措施

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