中国台湾中小型养殖场非洲猪瘟养殖技术要点

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，非洲猪瘟病毒具有较强的酸碱耐受性。研究表明，病毒有较宽的pH值适应范围，在pH值为3.9~13.4（在含有血清的培养基中）时可稳定存活7d以上。一些强抵抗性毒株甚至在pH值为3.1时还能存活，直到pH值下降到2.7时才失去活性。pH值达到13.4时强抵抗性毒株仍可以在无血清培养基中存活20~22h，在25%血清中存活7d。研究表明，ASFV在环境中存在至少3种不同的循环模式：丛林传播循环、蜱-猪循环和家猪（猪-猪）循环。目前，我国仍主要关注家猪循环。ASFV传播途径分为直接和间接接触传播，直接接触传播主要由猪通过口、鼻接触而传播；间接接触传播是由被污染病毒的泔水、工具、设备、物资、饲料、环境等传播，还可经由软蜱、蚊、蝇等叮咬猪后携带病毒。苍蝇、蚊子、老鼠等生物虫媒介可机械携带非洲猪瘟病毒进行传播，因此在淘汰阳性猪之前需要灭蝇灭鼠。中国台湾中小型养殖场非洲猪瘟养殖技术要点

非洲猪瘟病毒的非洲野猪无明显临床症状。然而，根据病毒毒株的毒力、入侵途径和剂量以及宿主因素，欧亚野猪、家猪和野猪可能表现出类似病毒性出血热的严重临床症状。病例通常表现为急性、全身性临床征象，发病初特征为高热（因此得名“猪瘟”）。经口或口鼻暴露后，约4天后出现首批临床症状（潜伏期通常约为3-9天，少数情况下更长）。动物变得精神沉郁，采食量下降，动物可能相互堆叠躺卧。即使在饲喂时间进入猪舍或猪圈也异常安静。约1周内，动物出现恶化的呼吸系统和胃肠道体征，以及协调和平衡问题。在终末期，动物几乎无法站立（后肢轻瘫/瘫痪），身体和四肢可能出现红到蓝色斑点、皮肤出血以及从身体不同孔道急性失血。一些动物可能表现出更明显的神经体征，包括抽搐。大多数动物因肺水肿出现呼吸窘迫。重要的是，并非所有动物都达到终末期。也就是说，动物常在未出现出血或其他非洲猪瘟病毒相关体征时死亡。怀孕母猪可能因高热在妊娠任何阶段流产。上述急性型与超过90%的病死率相关（实验条件下甚至更高）。也可能见到**急性经过，直接导致死亡而无终末期（动物在发病后4-5天死亡）。 缅甸楼房养猪非洲猪瘟猪场建设实验室，对进入猪场的人员、物资、车辆、饲料检测非洲猪瘟病毒，阴性结果才能进入。

非洲猪瘟病毒的初级复制发生在离病毒进入点相近的淋巴结的单核细胞和巨噬细胞中。因此，在经口或口鼻暴露的情况下，扁桃体和下颌淋巴结的单核细胞和巨噬细胞首先受累。随后，病毒通过血液和/或淋巴系统传播到次级复制位点，如淋巴结、骨髓、脾脏、肺、肝和肾。大多数非洲猪瘟病毒分离株与红细胞膜结合，并在阳性猪中引起红细胞吸附。然而，一些分离株不诱导红细胞吸附。虽然非洲猪瘟病毒主要在髓单核细胞中复制，但它也在内皮细胞、肝细胞、肾小管上皮细胞和中性粒细胞中复制。普遍认为，髓单核细胞的损坏是非洲猪瘟发病机制的关键因素。此外，非洲猪瘟病毒通过调节宿主细胞因子引起免疫抑制，导致过度的组织炎症和细胞凋亡。此外，髓样细胞的破坏导致细胞成分（即危险信号）的释放。当单核细胞/巨噬细胞被侵害时，它们分泌多种介质，包括促炎细胞因子，如白细胞介素-1、IL-6和肿瘤坏死因子α（TNF-α）。这些细胞因子能够触发急性期反应、炎症、内皮细胞受损和细胞凋亡。TNF-α起关键作用，因为它能够诱导血管舒张和通透性增加并调节血管内皮细胞的受损状态（促凝/抗凝）。此外，TNF-α参与细胞凋亡的调节。

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。 非洲猪瘟病毒，急性型死亡快，死亡率高。弱毒株引起的慢性型，死亡慢，死亡率低。

    呼吸间的保卫战——纳米电空气过滤技术.非洲猪瘟主要是接触传播，但是该病毒可以附着在尘埃上，当冬季大风刮起时，随大风飘落至猪场、猪舍内，因此，这种有限“空气传播”是非洲猪瘟防控的难点之一。八方同创联合中科院等科研机构，创新性地研发并应用了纳米电空气过滤材料。这种材料能高效阻隔携带病毒的粉尘颗粒，更能通过独特的电效应瞬间灭活空气中的病原微生物。将其应用于猪舍通风系统，相当于为猪群打造了一个可自由呼吸的“无菌保护罩”，为防控与净化提供了的技术保障，是生物安全的前沿方向。猪舍安装空气过滤，不仅可以阻断非洲猪瘟病毒传播，对防控其他病毒也起到作用，例如猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒、口蹄疫病毒、流行性腹泻病毒等。 非洲猪瘟的重组蛋白是一种安全性好的疫苗，但是有效性需要提出疑问，尤其是交叉保护性。乌克兰大型养殖场非洲猪瘟养殖技术要点

八方同创要求非洲猪瘟阳性场，做好内防扩散措施，种猪免疫“一猪一针头”，仔猪“一窝一针头”。中国台湾中小型养殖场非洲猪瘟养殖技术要点

非洲猪瘟病毒主要靶向巨噬细胞，并引起严重的免疫病理性细胞因子风暴，这与出血相关并导致严重的免疫失败后果。诱导这种先天免疫反应的机制尚不清楚，考虑到病毒有效关闭巨噬细胞细胞因子和干扰素反应的能力，这一点令人困惑。虽然其中一些反应是致病性的，但基本知识是早期先天免疫反应对于触发适应性免疫是必需的。例如，在免疫反应的先天阶段检测到早期干扰素α（IFN-α）和白细胞介素1受体拮抗剂（IL-1RA）与改善的结局相关。

总体而言，我们对先天免疫反应的诱导以及导致致命疾病或保护性免疫反应的转换机制的理解存在差距。从非洲猪瘟康复的动物完全排清病毒，并发展出对相似毒株甚至某些情况下对异源病毒攻毒的保护(Boinas,Hutchings,etal.2004;Burmakinaetal.2016;K.Kingetal.2011）。虽然这清楚地证明了适应性免疫的发展，但关于保护相关物和保护机制的信息非常不完整(Bosch-Camós,Lopez,andRodriguez2020;Carlson,O’Donnell,etal.2016)。文献中描述了大量病毒蛋白以及许多抗体和T细胞的病毒靶标，但尚未鉴定出完全保护的B细胞抗原或表位，已测试的T细胞表位在一些研究中介导部分保护。 中国台湾中小型养殖场非洲猪瘟养殖技术要点

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