芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
动力学上，对于200,000个微球分散在100μL中，珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA（分别为17.3和30kDa）的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明，在2小时的孵育过程中，蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次，必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中，通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球（见下文），这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到，对应于泊松噪声的可接受变异系数（CV）为6-7%。第三，过高的微球浓度可能导致：a）非特异性结合增加，降低信噪比；以及b）分析物与微球的比例过低，导致活性微球的比例过低，从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿；可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时，为了获得可接受的背景信号（1%）和泊松噪声）。 芯弃疾单分子ELISA检测盒，微量极速检测，微量检测15min就完成检测！代理数字ELISA检测通量
微量样本超多重检测的科研与临床价值：超多重检测芯片通过微流控分区技术，在单通道内集成21个**检测区（直径500微米），每个区域预埋特异性抗体，支持单次检测4-21个指标。以肺*筛查为例，芯片可一次性检测29种候选标志物（如CEA、CYFRA21-1、ProGRP），通过ROC曲线分析筛选出特异性>80%的组合（CEA+SA+CA242），诊断准确性从68%提升至92%。该芯片灵敏度达亚pg级（如IL-6检测下限0.5pg/mL），线性范围跨越3个数量级（1-1000pg/mL），且耗材成本较Luminex技术降低70%（单次检测成本<$50）。在科研领域，芯片支持微量样本（如穿刺活检液）中同时分析炎症因子（IL-1β、TNF-α）、血管生成标志物（VEGF）及代谢产物（乳酸），为**微环境研究提供多维度数据。临床验证显示，在100例乳腺*患者中，芯片检测的HER2与ER表达结果与IHC一致性达98%，为靶向***提供可靠依据。数字ELISA使用灵活芯弃疾JX-8B数字ELISA，低成本单分子检测；
创新性的解决方案：芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景：适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围：各种高灵敏多重免疫检测，可替代各种ELISA试剂盒，及其他免疫检测产品。
用DNA捕获探针(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA）功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的说明制备的。这些珠子与生物素化互补DNA的1μM（5’-生物素-CTCT）孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE缓冲液中过夜(16h）孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后，用PBS洗涤珠子三次含0.1%Tween-20的缓冲液。将珠子样品分装至微孔板中100μL中每孔给予400,000个微球。从微孔板孔中吸取缓冲液，将微球重悬后与不同浓度的ofSβG孵育。
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内，从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积（~50fL），导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位，在第二步中，将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔（图1C）。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔，孔径为μm，孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下，用橡胶密封圈密封。Rissin等人，第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物（图1D）。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像，可以区分与单一酶分子相关的微球（“开启”孔）和不与酶相关的微球（“关闭”孔）；显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数。使用SiMoA，浓度是因此，我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。超多重检测芯片在普查中筛选高特异性标记物组合，提升早期诊断准确性。
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列（图1C）我们称之为单分子阵列（SiMoA）——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步（图1A)，在微球（直径μm）上形成一个三明治抗体复合物，结合的复合物用酶标记，如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品，蛋白质的比值分子（以及由此产生的酶标记复合物）与微球的比例很小（通常小于1：1)，因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布，导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如，如果在(3000个分子）的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质，并且在200，000个微球上进行标记，则珠子，然后，。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术（例如，平板阅读器）的标签，因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积（通常为)，并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。芯弃疾JX-8B数字ELISA，每个实验室都能用的单分子检测；芯弃疾产品数字ELISA检测用时
抗体筛选芯片单通道预设 18-21 个抗体检测区，288-336 测试 / 小时，5μl 吸样适配珍稀样本。代理数字ELISA检测通量
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我们继续在两个关键领域改进SiMoA技术。首先，在两个关键领域可能再增加两个灵敏度等级基于对酶标记的敏感性（图2）可以检测蛋白质，如果非特异性相互作用可以更小化背景信号。单个珠子上分离和询问单个分子的能力为区分抗体-抗原结合事件和非特异性结合复合物。其次，我们简化了检测的物流。然而，即使在目前的形式下，我们相信数字ELISA有可能促进疾病的早期诊断和治理。 代理数字ELISA检测通量
