不同于新兴的3D重组皮肤模型、皮肤类organ和器官芯片模型，离体皮肤虽然拥有较为久远的发展历史，但由于其具有伦理限制、获取困难、个体差异等特殊的局限性，在化妆品领域的应用并不宽泛。与传统的细胞模型相比，离体皮肤不仅可以在分子细胞水平实现对待测物的评估，更能在组织水平评估待测物的功效，具有良好的可视化和宣传效果。已有大量的研究表明，离体皮肤是研究经皮给药、化妆品及原材料功效、药品和化妆品安全性、刺激性和毒性的有效替代模型，也逐渐被国内外药品和化妆品的原料商、出品方、监管机构和消费者所认可。离体皮肤在化妆品领域的应用或将弥补化妆品安全性和功效评价体系的缺口。然而，目前国内外仍缺乏离体皮肤用于化妆品功效评价的行业标准和监督管理规范，未来可通过起草离体皮肤评价方法的技术指南、制定离体皮肤用于化妆品功效评价的标准规范、完善化妆品安全监管的法律法规文件，进一步提高离体皮肤模型在行业内的认可度、扩大离体皮肤模型在化妆品领域的应用范围。抗氧化能力检测：采用DPPH自由基处理法，量化产品抗自由基活性单位。化妆品美容功效评价
斑马鱼原产于亚洲南部，经常分布于印度、孟加拉国、尼泊尔等国家，是一种小型热带淡水鱼，具有易饲养、繁殖能力强、发育快、受精卵透明、易于观察等特点。斑马鱼作为模式生物的一部分，与人类基因组有高达87%的同源性4。自20世纪30年代以来，斑马鱼被确立为发育和繁殖研究的模型四。随着斑马鱼技术的发展，斑马鱼模型逐渐被应用于毒理学、药物筛选、环境污染等研究。近年来，斑马鱼作为一种新兴的模型被常常应用于化妆品及其原材料的功效评价中。欧盟委员会指57%0/63/EU允许在斑马鱼胚胎和早期幼鱼阶段(受精后5天之前)进行实验，而不受动物实验的监管[。这是因为早期发育阶段的斑马鱼胚胎几乎没有疼痛感，斑马鱼模型符合3R原则。2021年4月9日，国家药监局颁布了《化妆晶功效宣称评价规范》，此外，国内多项使用斑马鱼模型进行化妆品功效评价的团体标准也被发布，这些举措使得斑马鱼逐渐成为了化妆品领域高度认可的评价模型之一间。化妆品原料防辐射功效实验公司实验室通过CNAS认证，出具的化妆品功效报告具备全球互认法律效力。
弹性蛋白基因eln1、eln2是斑马鱼评价皮肤紧致度的关键靶点。实验将4dpf斑马鱼幼鱼暴露于受试物中24小时，通过qRT-PCR检测基因表达变化。若受试物使eln1、eln2表达量明显提升，则表明其具有促进弹性蛋白合成的作用。例如，某抗皱精华液可使eln1基因表达量增加1.8倍，且P<0.01，成功通过国家药监局备案。该技术已形成团体标准T/ZHCA015-2022，要求阳性对照组相对表达量需大于空白对照组2倍标准偏差，确保结果可靠性。斑马鱼胚胎透明特性使其成为美白功效评价的天然模型。实验利用ImageJ软件分析受精后48小时胚胎背部黑色素含量，计算抑制率。例如，某树莓苷样品在0.1mg/mL浓度下，黑色素抑制率达42%，且P<0.05，验证其美白效果。该技术依据团体标准T/SHRH036-2021，阳性对照采用0.03mg/mL苯硫脲溶液，要求各组胚胎存活率≥90%。目前，该模型已被薇诺娜等品牌用于原料初筛，明显缩短美白产品研发周期。
皮肤外用产品的制造、运输和销售需要事先进行安全性评估，并评估可能因预期用途、误用、或意外皮肤暴露而导致的皮肤反应。离体皮肤的另一重要应用是评估皮肤外用产品的安全性和功效性，这包括日用品、化妆品、药品、医疗器械等。BURGHER等人使用腹部整形手术获取的人体皮肤外植体研究了氢氟酸的腐蚀性，他们发现70%的氯氟酸在作用的5分钟内即可完全穿透皮肤，这与之前研究的意外氢氟酸暴露的临床结果是一致的均。研究人员在OECDTG439标准的基础之上，开发了使用离体皮肤模型评估化合物是否具有潜在刺激性的方法。通过对120种化妆品刺激离体皮肤的实验结果与人体斑贴实验结果进行对比，发现离体皮肤模型检测的特异性为89.9%，准确率为89.1%[46]。此外，科研人员还使用彗星实验对手术获得的离体皮肤进行了化合物遗传毒性的评估，通过将离体皮肤局部暴露于20中化学物质中，他们发现其遗传毒性检测的灵敏度、特异性和准确性分别为89%、90%和89%切。这些结果均表明离体皮肤是外用产品刺激性、腐蚀性、遗传毒性等评价的可靠模型，具有广泛的应用前景。官方认证：化妆品功效检测证书需通过国家药监局指定机构审核，确保数据真实可靠。
斑马鱼肥大细胞结构与功能与人类相似，为抗过敏功效评价提供了体内模型。实验通过N-苯甲酰-DL-精氨酸对硝基苯酰胺盐酸盐（BAPNA）底物法检测类胰蛋白酶活性，定量评估过敏反应强度。例如，某含燕麦生物碱的乳液可使斑马鱼胚胎类胰蛋白酶表达量降低58%，且过敏症状（如心率异常、运动迟缓）发生率减少72%。该方法基于肥大细胞脱颗粒释放组胺的免疫机制，通过荧光定量PCR检测过敏相关基因（如IL-4、IL-13）表达变化实现机制验证。相较于豚鼠皮肤致敏实验，斑马鱼模型可避免个体差异导致的假阴性结果，且实验周期从42天缩短至7天。目前，完美、养生堂等企业已将斑马鱼抗过敏评价纳入产品备案体系。抗皱紧致评估：通过皮肤弹性仪与图像分析，量化皱纹深度减少百分比。化妆品美容功效评价
单独感官评估室模拟真实使用场景，准确捕捉消费者对化妆品的肤感体验。化妆品美容功效评价
转基因斑马鱼技术为化妆品中雌jisu类物质检测提供了高灵敏度工具。依据GB/T 45221-2025标准，实验通过将受试物暴露于携带cyp19a1b启动子驱动GFP的转基因斑马鱼胚胎，观察肝脏区域荧光强度变化。例如，某含邻苯二甲酸酯的指甲油可使斑马鱼胚胎荧光强度增加3倍，提示其内分泌干扰风险。该方法基于雌jisu受体（ER）介导的基因表达调控机制，可检测低至0.1ng/L的雌jisu活性物质，较传统酵母双杂交法灵敏度提升100倍。目前，该技术已应用于乳制品、化妆品等多领域，并由完美、蒙牛等企业联合制定团体标准。然而，斑马鱼对雄jisu、甲状腺jisu等干扰物的检测仍需开发特异性转基因品系，未来需结合多组学技术完善评估体系。化妆品美容功效评价
