芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
动力学上,对于200,000个微球分散在100μL中,珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA(分别为17.3和30kDa)的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明,在2小时的孵育过程中,蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次,必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中,通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球(见下文),这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到,对应于泊松噪声的可接受变异系数(CV)为6-7%。第三,过高的微球浓度可能导致:a)非特异性结合增加,降低信噪比;以及b)分析物与微球的比例过低,导致活性微球的比例过低,从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时,为了获得可接受的背景信号(1%)和泊松噪声)。 新型的单分子检测方法的普及版;皮克级数字ELISA检测
芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品具有微量的优势:
微量:芯片上反应,流道区只有几十微米高度,极大降低试剂、样本用量;微量试剂检测:更少只需10ul样本、试剂只为常规的1/10;
芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品具有灵活的优势:
灵活:可手动、可只使用8孔芯片,总成本、更小实验成本均较低,搭配使用常用实验室小型设备即可使用
测试结果:宽波长扫描仪结果-明场+荧光场同时看到磁珠与荧光,可观测每个磁珠上免疫反应的程度
先进新型的单分子检测方法的普及版 芯弃疾-勃望初芯数字ELISA购买灵活自动版数字 ELISA 芯片配套全自动加样仪与扫描仪,单个芯片支持≥8 样本同时反应,总时长 30 分钟。
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品参考simoa原理;Simoa技术(Single-moleculeArray,Quanterix公司)特点是通用阵列化检测,实现超高的灵敏度,较传统ELISA方法能够高出3个数量级,达到飞克级别(fg/ml)甚至更低。已拿阿兹海默症的两个FDAbreakthroughdevice;通常用于各种科研方向:神经因子、蛋白组学、细胞因子等。
以常见的IL-6指标为例,单指标灵敏度可达2-3fg/mL;3指标联检可达6-10fg/mL;文献表明,simoa方案的灵敏度、精密度、准确性均优于其他蛋白指标检测方案;
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内,从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积(~50fL),导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位,在第二步中,将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔(图1C)。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔,孔径为μm,孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下,用橡胶密封圈密封。Rissin等人,第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物(图1D)。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像,可以区分与单一酶分子相关的微球(“开启”孔)和不与酶相关的微球(“关闭”孔);补充图1显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数(图1D)。使用SiMoA,浓度是因此,我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。 芯弃疾JX-8B简易版单分子ELISA检测产品,极速检测,检测步骤只需要3次操作,远远快于常规ELISA;
芯弃疾JX-8B单分子ELISA高敏检测产品具有开放的优势:
开放:可匹配各种免疫检测项目,兼容各种自行开发的试剂;
测试结果:国产普通荧光显微镜,科研或预研场景;
测试结果:国产低成本荧光显微镜拍摄
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数字 ELISA 芯片生物相容性优异,表面处理减少蛋白吸附,保障复杂样本检测稳定性。皮克级数字ELISA检测
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从TNF-α数字ELISA测定的检测限为~150aM(2.5fg/mL),相当于全血中的~600aM(10fg/mL);市场上可用的ELISA对TNF-α的比较高灵敏度在血清中的LOD为21fM(0.34pg/mL)(补充图3)。两种方法的目标蛋白零浓度尖峰均为为这些实验提供有用的阴性对照:25%的血清含有多种蛋白质的微摩尔浓度,在这些高蛋白质背景之上可以检测到非常低浓度的目标蛋白。我们还开发了一个证明用于显示低浓度核酸可以检测到的DNA的主要数字分析方法,而无需复制目标
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