芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列(图1C)我们称之为单分子阵列(SiMoA)——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步(图1A),在微球(直径μm)上形成一个三明治抗体复合物,结合的复合物用酶标记,如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品,蛋白质的比值分子(以及由此产生的酶标记复合物)与微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布,导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如,如果在(3000个分子)的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质,并且在200,000个微球上进行标记,则珠子,然后,。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术(例如,平板阅读器)的标签,因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积(通常为),并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,多重检测,同一样本就能测试2-6项指标;生医实验室数字ELISA检测通量
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA;使用新型 的fg级超敏免疫检测simoa单分子产品原理;
它是一种DVD大小的圆盘,由24个阵列组成,每个阵列包含240微米大小的微孔,这些微孔呈径向排列,以便使用蓝光制造工艺和仪器内的液体处理并行处理。图2B显示了集成阵列及其相关流体通道的设计。每个阵列由216,000个40飞升大小的微孔组成,以六边形紧密排列模式排列在平面表面的3×4毫米区域内。每个微孔的标称尺寸为4.25µm直径、3.25µm深度和8µ米中心间距。流体通道深0.5毫米,通道和流体入口端口的总体积为74µLto,可容纳珠子和密封油溶液。通道中包含一个收缩部分以减少液体回流。微珠的分级是西莫亚技术的关键要求,微孔的几何形状足以容纳单个微珠(2.7µmdiameter;以下简称珠子)。西莫亚圆盘由环烯烃共聚物(COP)制造,因其具有高通量注塑成型的适应性,且成本低廉。具有良好的化学、生物和光学性能 亚皮克级数字ELISA灵活超多重检测芯片节省耗材成本,21 项指标共享一套耗材,适合大规模筛查与研究。
芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品;将传统的模拟信号转化为新型的数字化信号;创新型原理,有效提高检测灵敏度,可达fg/aM级!
阵列芯片原理:从15µLof基质中的500,000个珠子开始。结果表明,阵列图像的定量分析大约一半的孔在珠子沉降几分钟后被占据。对于SimoaHD-1分析仪,沉降时间减少到90秒,分布在三个仪器处理周期之间。随着珠子重新沉降到阵列中,仪器对其他操作(密封和成像)进行索引,这些操作已经加载到阵列上。通常,会检测25,000-50,000个珠子。由于Simoa中的测量单位(AEB)是一个比率,一定珠装载量的差异不影响数据质量或在大多的范围内保持精度,前提是存在足够的珠子数量以保持在泊松噪声水平之上。22数据质量会受到影响,当泊松噪声主导测量误差时。这发生在与背景相关的正井数量降至约50个珠子以下时,此时泊松噪声明显影响测量的变异系数(CV)。
芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品,使用现有平台就能做的单分子免疫检测;
参考的其他高灵敏检测方法: POCT 芯片推动急诊检测向多指标联检升级,15 分钟内出具心肌损伤等多项结果。
两种更多测试的模拟分析信号放大技术是免疫PCR和生物条形码分析。免疫PCR通过将检测抗体标记为DNA分子,然后使用PCR进行扩增和定量,从而提高灵敏度。生物条形码分析利用了与DNA“条形码”标记的抗分析物纳米颗粒,这些纳米颗粒在与捕获在金微粒上的分析物结合后,从纳米颗粒上脱杂以进行定量。这两种方法相对于传统免疫分析法的灵敏度提高了10到100倍,但尚未整合到所需的全自动系统中,也未用于多重分析。为了比较大限度地加速药物发现、验证新型生物标志物并将分子水平诊断引入临床主流,需要一种具有高效率、高质量数据和成本效益的稳健、多重超灵敏蛋白质检测技术。芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
单分子POCT产品,帮您数字化高灵敏检测,且微量样本多重指标检测;
低成本便捷检测:数字ELISA芯片,分为手动版和自动版,其中手动版可以直接使用移液枪加液检测;更少可以使用单片4孔芯片(同时做4个test)、8孔芯片(同时做8个test)进行检测;(活动期8孔芯片只需要200元即可测试实验);芯片内只需要微量样本(10-20ul)即可完成检测,所需要的试剂量也明显降低,且每个芯片孔内可同时检测2-4个检测指标,分摊下来检测成本有效降低;其中自动版可搭配小型多通道加样仪,也可以进行高通量的ELISA芯片同时检测。1)检测快速:数字ELISA芯片高敏检测试剂盒,搭配预埋的磁珠和荧光量子点试剂,整体反应在芯片的微小流道内进行,反应速度快、清洗速度快;更短只需要15-20min,就可以进行完整的检测流程,接近POCT检测产品,可以有效节省您的实验时间。2)高灵敏检测数字ELISA高灵敏度检测芯片,使用单分子免疫检测的原理(原理同simoa等产品,使用反应微球单分散阵列排布的原理,将反应信号进行单分子单分散检测),在快速、便捷检测的同时,仍能保持高灵敏度,常规指标轻松达到0.2-1pg/ml的灵敏度 使用现有平台就能做的单分子免疫检测;单分子免疫检测数字ELISA特点
芯弃疾JX-8B数字ELISA,极速检测,检测步骤只需要3次操作,远远快于常规ELISA;生医实验室数字ELISA检测通量
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内,从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积(~50fL),导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位,在第二步中,将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔(图1C)。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔,孔径为μm,孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下,用橡胶密封圈密封。Rissin等人,第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物(图1D)。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像,可以区分与单一酶分子相关的微球(“开启”孔)和不与酶相关的微球(“关闭”孔);补充图1显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数(图1D)。使用SiMoA,浓度是因此,我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。 生医实验室数字ELISA检测通量