HE染色常见问题：Q3：细胞核染色过浅，颜色暗淡答：切片在苏木素染液中停留过短，或苏木素过度氧化失效，或分化时间太长。对策：重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液，每个3-5min即可，接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h，自来水冲洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h，自来水冲洗10min染色。Q4：细胞核染色过深，胞浆着蓝色答：切片在苏木素染液中停留过长；或切片太厚；或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好厚度1-2层细胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。南京英瀚斯，专业的技术提供专业的HE染色服务。海南质量好的HE染色外包
HE染色细胞核灰蓝原因：（1）组织处理温度过高、过热，在石蜡停留的时间过长；（2）固定时间太短，接下来就直接在高浓度的乙醇中行脱水处理。对策：理论上来说，加热处理*在组织浸蜡步骤才使用，组织不能在热的蜡液中停留过长时间。如果由于某些原因不能进行下步包埋处理，完成浸蜡处理后的组织，可将组织连同塑料包埋盒一并放置在室温空气中，冷却凝固，以备包埋。待需要包埋时再重新加温直至石蜡融化即可。组织在处理前必须确保固定良好，脱水比较好能从低浓度的乙醇开始。陕西值得信赖的HE染色外包HE染色，即是苏木精-伊红染色法，是形态学比较常用的染色方法。
HE染色伊红溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行)，可改变组织等电点，促进伊红与胞浆蛋白质结合，其本身不参与染色的反应。当苏木素染色效能极高，很短时间就导致核浆共染时，可适当地添加冰醋酸(一般不超过2%)，抑制苏木素染色效能，方便控制染色时间，同时也能提高苏木素染色的清晰度。现在有商用的HE染色液卖，但是质量参差不齐。如果课题组较大，完全可以自己配制，效果也挺好。配制为乙酸浓度5%-7.5%和盐酸浓度为0.5%-1%的苏木素溶液放置一周，即可完全成熟，染色效果好，氧化膜和结晶都很少(一般苏木素中酸度越低越容易产生氧化膜和结晶，这也是提示更换苏木素的标志之一)。
HE染色骨组织的处理方式：组织里存有钙盐可妨碍用常规方法制作良好切片。骨组织及钙化病灶，经过固定后，需要先将钙盐除去使组织软化，才能进行常规切片。如果脱钙不全，则切片容易撕开或碎裂，损伤切片刀刀刃。脱去钙盐的过程，称为脱钙。骨组织固定24小时后，锯下不超过0.5cm厚的薄骨片，以4%甲醛溶液固定后，进行脱钙。骨组织过厚则需延长脱钙时间，但长时间浸于强酸会影响切片染色效果。取材骨组织固定于10%甲醛溶液24小时后再锯取厚度约0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脱钙将组织置于脱钙剂中，每日更换新鲜液，直至组织软化为止除酸流水冲洗24小时脱水、浸蜡、切片进行常规脱水、透明、浸蜡、切片南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。HE染色小攻略技巧分析。
HE染色主要是为通细胞及胞核形态、大小来区别各种细胞的,并不是直接通过颜色来区分的苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色.炎性细胞一类人体内的免疫细胞,包括中性粒细胞、嗜酸粒细胞、单核巨噬细胞、淋巴细胞和浆细胞.淋巴细胞是**容易和其它几种细胞区分的,细胞小而圆,核浆比很大,核浓染成深蓝紫色.浆细胞大小介于淋巴细胞和巨噬/多核/巨细胞之间,胞浆略嗜碱,核偏位,核染色深,高倍镜下可见核呈车轮状.多核细胞和巨细胞的概念是不是有点重叠,多核细胞故名思意是有多个核的大型细胞,如朗汉氏巨细胞,常在肺结核的干酪样坏死灶周围出现,多个核排成一圈,异物巨细胞也是有许多个核的体积巨大的细胞,这两种巨细胞胞质都偏酸.巨噬细胞似乎在不同的组织中有不同的名称.HE染色观察细胞形态变化。广西专业的HE染色外包
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HE染色石蜡和冰冻切片样本的处理，样品处理：a.对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡5-10分钟;换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟;无水乙醇5分钟;90%乙醇2分;70%乙醇2分钟;蒸馏水2分钟.b.对于冰冻切片：蒸馏水2分钟。c对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。苏木素伊红(HE)染色对于上述处理好的样品：苏木素染色液染色5-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。浸自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。95%乙醇5秒。伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。海南质量好的HE染色外包
