厦门无血清细胞冻存液产品介绍

新常态下细胞冻存指南：细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻速融，实验证明这样可以较大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提高细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化，避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。典型的细胞冻存液是在生长培养基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清，或只是在血清中加入10%的DMSO。目前在有些实验室中仍然采用这种自制自配的冻存液，优点是成本低，适合自己的细胞。同时另一些保护剂不能穿透细胞。厦门无血清细胞冻存液产品介绍

无血清细胞冻存液与传统细胞冻存液比较及优势：1.传统细胞冻存液只适用于含血清细胞的冻存，但并不适用于无血清培养的细胞，例如一些CIK细胞等，而无血清细胞冻存液即适用于含血清细胞的冻存，又适用于无血清细胞的冻存，是一种通用型细胞冻存液，通用于各种动物细胞株；2.传统细胞冻存液含10%胎牛血清，因血清是动物源性成份，因此病毒、霉菌和支原体等污染的风险很高，而无血清细胞冻存液因不含血清，只含DMSO、葡萄糖等营养成份，较大降低了动物血清来源病毒、霉菌和支原体等污染的风险，确保冻存细胞的安全；3.传统细胞冻存液含血清，但动物血清成分复杂，个体差异大，且生产来源不稳定，因此批次间质量常常不稳定，这导致培养细胞的状态也会受到影响，而无血清细胞冻存液成分和配比明确，批次间差异很小，能够保证生长细胞状态的稳定性，细胞存活率高。广州无血清细胞冻存液无血清细胞冻存液的优势：因不含血清，批次间差异小。

无血清细胞冻存液：采用patent的冻存配方，用包括重组人血白蛋白等多种蛋白组分替代了血清的用途。用包括DMSO在内的复合冻存保护剂替代了单一的DMSO的保护作用。复合保护剂的内部保护剂，易于穿透细胞膜，避免在细胞冻存过程中细胞内部的水分子形成冰晶损伤细胞；外部保护剂，可在溶液形成冰晶之前，在细胞膜外部竞争性的结合细胞膜表面的水分子，从而降低细胞外溶液的电解质浓度，减少阳离子进入细胞的数量。在细胞内部与外部的协同保护作用下，明显降低了温度迅速下降与温度上升对细胞的损害，因此大幅度提高了细胞经过冻存后的复苏存活率。

无血清细胞冻存液使用方法：选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。1）按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。2）按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×105至5×106cells/ml）。3）取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去离心管中的上清液。4）加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×105至5×106cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。5）将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。6）直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃以下冰箱，长期冷冻保存。不同的冻存方法替代了不同的冻存体系。

细胞冻存液的配制可选用10%的DMSO加上90%的小牛血清，可以现用现配。除了这个方式，还可选择20%的DMSO机上80%的小牛血清，配成两倍的储存液，在使用时细胞悬液和冻存液按照1:1的比例混匀使用，特别的方便。冻存液可直接置于-20摄氏度的环境中保存。使用细胞冻存液需要注意以下几点：1、在使用冻存液前，需要确保细胞冻存液已经完全融化，并要轻轻的混匀。对融化后的细胞冻存液要置于4℃的环境中保存。2、使用冻存液之前应该确保冻存前的细胞生长情况比较良好，比如说细胞需要处于对数生长期，并且冻存的时候存活率大于90%。3、在使用细胞冻存液期间，为了保证可以发挥较佳的效果，建议将细胞冻存在液氮之中，这样可以长时间的进行保存。如果说将细胞置于-80℃的环境下保存，那么保存的时间大约为1年。无血清细胞冻存液的优势：即用型，无需现配，直接将细胞悬浮于冻存液中即可。芜湖正规无血清细胞冻存液哪家便宜

无血清细胞冻存液可用于其他类型哺乳动物细胞的储存。厦门无血清细胞冻存液产品介绍

无血清快速细胞冻存液冻存细胞复苏方法：1、从冰箱里取出细胞冷冻保存管，立即放入37℃振动水浴槽中快速解冻。2、待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即加入1ml细胞培养基于该冷冻管中与细胞混合，再将细胞混合液从冻存管中移入含有9ml该细胞培养基的试管中，混合均匀。3、离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4、清洗细胞，充分洗净残留冻存液。5、加入适量的新鲜细胞培养基，使用移液管缓缓地均匀细胞混合液。适量地稀释后，将细胞混合液移至事先准备好的培养瓶中。6、镜检后，研究者可根据各自方法和需要来进行细胞培养。厦门无血清细胞冻存液产品介绍