定量测定是医学发展的重要保证。WHO1980年出版了男科实验室手册***版及以后版本[1]对有关男科的实验进行了详细的阐述。对计算机辅助精子分析进行质量管理包括:计算机本身的软硬件、CASA分析结果、工作人员的具体操作几方面。CASA参数包括精子数量和各种活动力变量其质量包括所测得数据的可靠性、精确度、如何避免差错和数据的正确性及确认以及分析中的标准[2]。CASA质量管理关系到男科实验室中**分析的质量具有以下特点:⑴在实验室内部质量和医生处置质量方面优于其它测定精子运动的方法;⑵CASA结果及结果质量的评估较困难;⑶WHO标准是医生处置质量保证的基础;⑷今后应加强操作人员的培训。计算机辅助精子分析(computer- assisted sperm analysis)是2014年公布的泌尿外科学名词。美国密度精子分析频闪光源

1.基本检查:是确定精液变量稳定的常规方法,不仅是男科实验室,任何开展精液检查的实验室都能遵循。精子计数依然推荐使用改良Neubauer血细胞计数板的方法,但计数的方法有了改变。明确推荐了伊红笨胺黑染色法作为精子存活率诊断的优先方法,伊红染色和低渗肿胀实验只作为备选方法。删减了参考值下限的描述。对于精子活动率大于40%的样本没有必要做存活率评估。与第5版手册中淡粉色判读为活精子不同,明确了只有精子头为白色的精子为活精子、淡粉色为死精子。临床数据表明,鉴别快速前向运动精子非常重要。因此,关于精子活力分级,第6版手册建议恢复到快速前向运动、慢速前向运动、非前向运动和不活动4个活力级别,但精子活动率的参考值范围却依然是按前向运动(PR)、非前向运动(NP)、不活动(IM)3个活力级别计算。第6版手册强调,精子形态学评估的价值不仅在于其可用于判断自然妊娠和辅助生殖技术(ART)结局的预后,还可以为男性生殖***包括睾丸和附睾功能判断提供更多诊断信息。对于3%和5%的精子“正常”形态率的判断,则要求必须由训练有素的人员评估1500个精子来完成;对于无尾精子(只有头部的精子)超过总精子数20%的精液,应单独计算并在报告中注明;美国鱼精子分析重复性高该设备还支持多种分析模式,包括精子浓度、活力、形态和DNA损伤等参数的测量,满足用户的多样化需求。

精子计数是在显微镜下计算一次排出的精液中精子的数量将精子计数值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后将样本按一定比例稀释和固定后,滴于血细胞计数板上,在显微镜下计数红细胞计数区内的所有精子数并换算为每m1内所含精子数。此外还可用电子细胞计数仪经调整阈值设置后计数精子数量。将已经液化的精液标本均匀混合,用白细胞计数吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀释液至11刻度,振荡三分钟,然后置于血球计数板内,计数二大格(每格面积1平方毫米)之精子数,在尾数后加5个“0”即得每毫升精液内精子数。例如计数为1280个,则每毫升精子应为128,000,000。精液稀释液之配制:重碳酸钠5克、福尔马林1毫升、蒸馏水加至100毫升。稀释液内重碳酸钠有消化粘液的作用,福尔马林有使精子制动的作用。如精液之稠度过高而不易吸取时,可以精液1毫升混匀于稀释液19毫升内,稀释后进行计数。如精子的数目极少,亦可改为稀释10倍计数。每次排精75%的精子是从附睾尾部所贮存的,还有25%是由输精管道的其他部分来的,因此单凭一次排精的精子计数来衡量睾丸生精机能是不***的。只有在排精后间隔4-5天以后多次精液检查,才能比较正确地从这些精子计数来反映睾丸的生精机能。
医生处置质量是指诊断质量是以当今医学科学知识、技术为基础依据症状来完成的。CASA系统可以为医生提供优于传统精子分析的手段和快速准确的分析结果[5]。CASA在医生处置质量方面的特点在于:①当CASA系统的参数设定和样品的处理方式(温度、稀释法、缓冲液)确定时通过个体内和个体间的比较CASA的精子活力重复性明显好于直观评估[6]。②实验室数据资料是质量的一部分CASA系统所有数据都是直接在线获得的因此明显优于其他方法[6]记录传递到数据库的过程无错误发生可清楚准确地打印出结果。所有的数据可直接转换到数据库、能够对***前和***后测定的数据进行统计学比较[9]、质量控制数据的采集与保存、每天的标本测试记录以及许多其他报告等等如此大量数据的处理只有在计算机中才能完成。但是CASA系统的参数设定也许限制了其质量特别是在精子形态学检查中通过CASA系统对精子形态学特征进行分析[7]这些特征(细胞大小、形状、光学密度、尾的存在以及其它)可由操作者选择这样就会引起同一标本在不同实验室或不同分析者测得的结果一致性较差[8]。就形态学分析而言传统方法的可变性远远大于CASA分析。全自动精子分析仪严格按照世界卫生组织(WHO)和KRUGER标准,并通过ISO9001认证。

CASA精子运动速度和运动轨迹特征主要参数有:①轨迹速度(VCL):也称曲线速度,即精子头部沿其实际行走曲线的运动速度。②平均路径速度(VAP):精子头沿其空间平均轨迹的运动速度,这种平均轨迹是计算机将精子运动的实际轨迹平均后计算出来的,可因不同型号的仪器而有所改变。③直线运动速度(VSL):也称前向运动速度,即精子头部直线移动距离的速度。④直线性(LIN):也称线性度,为精子运动曲线的直线分离度,即VSL/VCL。⑤精子侧摆幅度(ALH):精子头实际运动轨迹对平均路径的侧摆幅度,可以是平均值,也可以是最大值。不同型号的CASA系统由于计算方法不一致,因此相互之间不可直接比较。⑥前向性(STR):也称直线性,计算公式为VSL/VAP,亦即精子运动平均路径的直线分离度。⑦摆动性(WOB):精子头沿其实际运动轨迹的空间平均路径摆动的尺度,计算公式为VAP/VCL。⑧鞭打频率(BCF):也称摆动频率,即精子头部跨越其平均路径的频率。⑨平均移动角度(MAD):精子头部沿其运动轨迹瞬间转折角度的时间平均值。⑩运动精子密度:每毫升精液中VAP>0μm/s的精子数。通过计算机图像处理功能对显微镜下放大的精子图像进行识别和跟踪计算,从而得出精子动静态各项参数。北京CASA精子分析高准确率
CASA系统通过计算机分析精子运动参数,能够提供精确的量化数据,优于人工检测方法。美国密度精子分析频闪光源
二、生化及免疫学检验:1、精浆果糖测定【正常参考值】9.11-17.67mmol/L。【临床意义】(1)精液果糖为0,可见于先天性两侧输精管及精囊腺缺如、两侧输精管完全阻塞或逆行**。(2)精液果糖降低,常见于精囊炎和雄***分泌不足,果糖不足可导致精子运动能量缺乏,甚至不易受孕。2、精浆酸性磷酸酶测定【正常参考值】金氏法:>255nmol·s-1/L【临床意义】(1)精浆酸性磷酸酶含量增高,常见于前列腺肥大或早期前列腺恶性**患者。(2)精浆酸性磷酸酶含量降低,常见于前列腺炎患者。(3)精浆酸性磷酸酶检测是法医鉴定有无精液**敏感的方法。3、精浆顶体酶活性测定【正常参考值】36.72±21.43U/L。【临床意义】精子顶体酶活力与精子密度及精子顶体完整率呈正相关,其活力不足,可导致男性不育。4、精浆乳酸脱氢酶-X同功酶(LDH-X)测定【正常参考值】LDH-X***活性:2620±1340U/L;LDH-X相对活性:≥0.426。【临床意义】LDH-X具有睾丸及精子的组织特异性,是精于运动获能的关键酶,该酶检测可作为诊断男性不育有价值的指标。睾丸萎缩患者LDH-X降低或消失,精子发生缺陷时无LDH-X形成,少精或无精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。美国密度精子分析频闪光源
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