膜片钳技术(patchclamptechniques)是采用钳制电压或电流的方法对生物膜上离子通道的电活动进行记录的微电极技术。1989年,Blanton将脑片电生理记录与细胞的膜片钳记录结合起来,建立了脑片膜片钳记录技术(patchclamponinvitrobrainslices),这为在细胞水平研究反射中枢系统离子通道或受体在神经环路中的生理和药理学作用及其机制提供了可能性。离体的脑组织能够在一定的温度、酸度和渗透压、通氧状态等条件下存活并保持良好的生理状态。与急性分离的或培养的神经元相比,离体脑片中的神经元更接近生理状态:基本保持了在体情况下的细胞形态,神经细胞之间及神经细胞与非神经细胞之间的很多固有联系,以及较为正常完整的突触回路、受体分布、递质释放及其信息传递等功能。膜片钳,开启细胞电生理研究新篇章!德国单通道膜片钳

膜片钳技术是由诺贝尔奖获得者Neher和Sakmann于1976年发展起来的一种记录细胞膜离子通道电生理活动的技术。该技术的应用连接了细胞水平和分子水平的生理学研究,已成为现代细胞电生理学研究的常规方法。它广泛应用于生物学、生理学、病理学、药理学、神经科学、植物和微生物学,并取得了丰硕的研究成果。膜片钳技术点燃了细胞和分子水平生理学研究的**之火,并与基因克隆技术并驾齐驱,给生命科学研究带来了巨大的推动力。钙成像技术***用于实时监测神经元、心肌和各种细胞内钙离子的变化,从而检测神经元和心肌的活动。这些技术是人们观察神经和各种细胞活动的直接手段,现已发展成为生命科学研究的热点,也是国家自然科学基金鼓励申报的重要领域。全细胞膜片钳电生理工具膜电位Vm由高输入阻抗的电压跟随器所测量。

膜片钳的应用范围:1.单离子通道(如钠、钾)的功能研究;2.心肌细胞离子通道研究(尤其与药物作用相关的);3.常规与病理的离子通道作用机制研究;4.单细胞的形态与功能关系的研究;5.心血管药理学的研究;6.脑片膜片钳(证实了脑组织在体外也能存活并保持很好的活性状态,能使对脑细胞的研究更接近生理状态下的情况,可检验不同脑区间的神经通路与功能链接);7.神经环路的研究(光遗传或化学遗传病毒载体表达的验证);8.神经突触可塑性的研究。
ePatch的设计的一些亮点还包括:可以在软件中伴随数据进行实验记录,你不用再专门拿一个实验记录本了,也不用再担心本本上记录的内容找不到对应的数据了,系统会把他们一一对应起来。电压电流刺激模式的编辑更为傻瓜,众多的模块,直接拖拽就可以,还伴随着示例图,让你对你编辑的程序一目了然。实时的全细胞参数估算,包括封接电阻,膜电容,膜电阻等重要参数强大的在线分析功能,包括电压钳模式下的I/Vgraph,eventdetection,FFT,以及电流钳模式下的APthresholddetection,APfrequency,APslope等数据可保存成多种格式,你要是个程序达人,可以支持使用Matlab进行数据分析,如果没有这样的经验也没有问题,数据可以保存成.abf用的Clampfit直接分析。滔博生物TOP-Bright专注基于多种离子通道靶点的化合物体外筛选,服务于全球药企的膜片钳公司,快速获得实验结果,专业团队,7*60小时随时人工在线咨询.在青蛙肌细胞上用双电极钳制膜电位的同时,记录到ACh启动的单通道离子电流,从而产生了膜片钳技术。

电压钳的缺点:目前电压钳技术主要用于研究巨火细胞的全细胞电流,特别是在分子克隆卵母细胞表达电流的鉴定中,发挥着不可替代的作用。然而,它也有其致命的弱点:1。微电极需要刺穿细胞膜进入细胞,导致细胞质丢失,破坏细胞生理功能的完整性;2、不能确定单通道电流。由于电压钳位薄膜面积大,包含大量随机开关的通道,背景噪声大,往往会掩盖单通道的电流。3.在小细胞(如直径10-30μm的哺乳动物细胞)上进行电压钳实验,技术难度更大。因为电极需要插入到细胞中,所以微电极的前端必须做得非常薄。如此薄的前端导致电极阻抗较大,往往为60~-80mω或120~150MΩ(视灌注液不同而定)。如此大的电极阻抗,不利于用细胞内电流钳或电压钳记录时,短时间(0.1μs)内将电流注入细胞,从而达到钳制膜电压或膜电流的目的。此外,插在小电池上的两个电极会产生电容并降低电压测量电极的反应能力。膜片钳技术实现了小片膜的孤立和高阻封接的形成,增宽了记录频带范围,提高了分辨率。德国单通道膜片钳
膜片钳技术,助您洞悉生命科学的微观世界!德国单通道膜片钳
膜片钳是一种用于研究生物膜电生理特性的技术,它能够测量细胞膜通道和受体的电生理活动,以及药物对它们的影响。膜片钳技术的基本原理是将细胞膜的电生理活动转化为微弱电流信号,然后通过放大器和记录设备进行测量和记录。在膜片钳实验中,细胞膜被固定在钳制电极上,同时另一个电极用于刺激或记录电信号。通过这种方式,可以测量细胞膜上各种通道和受体的电生理活动,例如钠离子通道、钾离子通道、氯离子通道、钙离子通道等。膜片钳技术具有高灵敏度和高分辨率的特点,可以检测到非常微小的电流变化。此外,它还可以在单细胞水平上研究电生理活动,提供有关通道和受体功能和调节的详细信息。因此,膜片钳技术被广泛应用于神经科学、心血管药理学、药物筛选等领域。总之,膜片钳技术是一种强大的工具,用于研究生物膜电生理特性和药物对它们的影响。通过使用膜片钳技术,科学家可以更深入地了解细胞膜上通道和受体的功能和调节机制,为新药研发和疾病zhi疗提供重要的信息。德国单通道膜片钳