密度精子分析LIN

美国Hamilton Thorne的TOX IVOS精子分析仪已经被FDA和国内外毒理学实验室所使用。本试验研究目的对精子分析仪和血细胞计数板在大鼠附睾精子计数结果的比较验证。方法选取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,对三批次雄鼠的精子计数进行比较。健康雄鼠通过戊巴比妥钠麻醉实施安乐死后,取左侧附睾尾称重,将附睾尾部放入37℃预热的含有M199培养液平皿中,剪碎附睾尾,放入培养箱中37℃孵育5 min,然后吸取1份精子悬液,用M199培养液进行一定倍数的稀释,混匀后,取1滴稀释液,滴入精子分析仪**载玻片上,将载玻片放入TOX IVOS精子分析仪载物台,进行精子计数,同时吸取稀释后的精子悬液滴入血细胞计数板内,通过光学显微镜进行计数,比较两种计数方法的差异性。结果***批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析仪和血细胞计数器的精子计数结果分别为165.9±91.7,140.0±59.6。三个批次的精子分析仪和血细胞计数板的精子计数结果无统计学差异(P>0.05)。结论精子分析仪是一种方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理学研究中具有重要的应用价值。Hamilton Thorne自动精子分析仪具有高精度、高效率和自动化的优点。密度精子分析LIN

CASA系统虽然有诸多优点，但是很多因素都会影响到CASA仪器的使用及准确性。CASA系统进行**分析应注意以下几点：3.1标本的采集与制作（1）采集前禁欲2�7天，禁欲时间过长、过短对**质量都有一定影响。（2）容器要清洁。（3）特殊情况下，*可使用专门为采集**设计的无毒性避孕套，普通的乳胶避孕套因含有损害精子活力的物质不可使用。（4）注意保温（20�37℃），并于30分钟内送检验科。（5）标本置于37℃水浴.精子运动参数具有温度敏感性，因此要求计数池应于分析仪恒温板上预温。（6）密切注意**液化的情况，确保液化时间准确，因**样本随放置时间的延长，精子活动力及活动率有减少的趋势。标本液化后取混匀样本**1滴滴在样品池中间，然后进行分析。（7）检测精子活动力，标本密度应控制在2×106/ml到50×106/ml之间。具有高密度（如高于50×106/ml）精子的标本，通常会增加碰撞的频率，并可能由此出现错误的结果。在这种情况下，建议用同源精浆稀释标本。浓度精子分析BCF‌精子分析可以分析参数有，曲线速率（VCL）‌：精子头沿其实际曲线运动的时均速率。

如何检查精子活力

精子活力是评估男性生育能力的重要指标之一。通常，精子活力可以通过**分析、精子运动分析和计算机辅助精子分析等方法来检查。这些检查可以帮助医生了解精子的活动能力、形态和数量，从而评估男性的生育状况。

1.**分析：这是评估精子活力的基本方法，通过实验室检测**样本，可以测量精子的数量、活力和形态。该方法简单、快速，是初步评估精子活力的常用手段。

2.精子运动分析：这种方法通过观察精子在显微镜下的移动情况，来评估精子的活动能力。它可以帮助医生了解精子的运动速度和方向，从而判断精子是否具有足够的活力。

3.计算机辅助精子分析：这是一种更为先进的技术，使用计算机软件来分析精子的运动参数。这种方法可以提供更详细的数据，如精子的直线速度、曲线速度和摆动频率等，有助于更精确地评估精子活力。对于想要检查精子活力的男性，建议保持良好的生活习惯，如戒烟、限制饮酒、保持适当的运动和健康的饮食。同时，如果计划进行生育，应尽早进行精子活力检查，并在发现问题时及时就医，以便采取相应的***措施。

CASA，即计算机辅助精子分析，是一种利用技术手段对精子活力、浓度和形态进行精确评估的方法。WHO第五版指南强调，相比人工检测，CASA提供更准确的数据和精子动力学参数，如前向运动和超活化运动，以及获能精子特征参数。研究显示，CASA检测的精子参数与体内外受精成功率和受孕时间有***关联。使用CASA分析仪，通常通过相差显微镜识别活动精子，适用于精子动力学分析。但要确保可靠结果，操作者需注意标本制备、帧频率、精子浓度等因素。每份样本至少需要分析200个活动精子的运动轨迹，更多精子样本有助于分类和变异性的分析。国内已有自主研发的精子分析仪，通常进行两次分析，每次至少200个精子，结果通过统计学分析得出。CASA在评估精子浓度时，需精确测量精子体积，确保**完全液化并充分混匀。计数板的精确性和计数一致性是关键，每次检测需满足5个视野和200条以上精子的比较低要求。对于高浓度**，可能需要稀释以减少误差。形态分析方面，CASA能够定量评估精子头部、中段和主段，尾部缺陷可通过活力评估。对于碎片过多或黏稠的**，可能需要洗涤以减少背景干扰。CASA中涉及一系列术语，如VCL（曲线速度）、VSL（直线速度）等，它们反映了精子运动的不同特性。HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数，摆动性（WOB）‌：实际的曲线路径关于平均路径的摆动值。

通过比较进行质量评估

1．室内比较是采用同一个标本在同一参数下‚经CASA多次测定后‚应用适当的统计学方法对测得数值进行比较。在男科实验室中对CASA系统的质量控制通常使用影像磁带或完全相同的冻存**标本进行日间比较。当室内比较作为结果质量的一种评估时‚计算机中数值的在线获得是极具优势的。

2．室间比较要求标本向其他几个实验室运送文献中的一些报道阐述了该方面的经验但是运动精子是不能在不受限制的条件下运输的将其置于液氮中运送需进一步考虑更多的因素（解冻技术、标本的处理等）这些因素会影响活动力参数；到目前为止室间比较的研究还未见满意报道；Jorgensen等进行了研究尝试克服实验室间运送解冻标本的困难其研究方式是：邀请四个实验室的实验人员携带各自的仪器到同一个地点以各自通常采用的实验方法进行精子评估但未见明确的结论。3．对于精子活力测定CASA系统的测定与直观评估的比较有文献进行了报道但结果并不相同。认为直观评估揭示标准数值且其差异是由CASA系统的错误引起的该观点是不正确的；无论从理论上还是实践中CASA数值比直观评估所获得的数值更接近于真值；对直线前进的精子比例而言这一点是非常正确的。 CASA系统用量少，检测速度快，能够显著提高实验室的工作效率。美国慢速运动精子分析精确温度控制

该设备的设计紧凑，占用空间小，适合不同规模的实验室使用。密度精子分析LIN

方法:使用两种已知浓度的质控乳胶珠溶液,1份浓度为(35±5)×106/ml,另1份浓度为(18.0±2.5)×106/ml,评价4种计数方法的准确性和精确性,并比较4种方法计数精液的结果。结果:计数乳胶珠时,CellVU计数池的结果**接近已知浓度,分别为(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,变异系数(CV)值分别为12.80%和10.58%;血细胞计数池和Makler计数池结果均高于已知浓度,前者为(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分别为10.81%和8.89%,后者为(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分别为14.86%和14.96%;CASA系统结果低于已知浓度,为(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比较低,分别为7.22%和6.50%。计数精液时,CellVU计数池与CASA系统结果差异无***性(P=0.71),分别为(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血细胞计数池和Makler计数池结果差异无***性(P=0.14),分别为(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU计数池、CASA系统与血细胞计数池、Makler计数池结果间差异***(P<0.05或P<0.01)。结论:计数精液时,CASA系统与CellVU计数结果差异无***性。各实验室可选择合适的手工或CASA计数方法。密度精子分析LIN