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方法:使用两种已知浓度的质控乳胶珠溶液,1份浓度为(35±5)×106/ml,另1份浓度为(18.0±2.5)×106/ml,评价4种计数方法的准确性和精确性,并比较4种方法计数精液的结果。结果:计数乳胶珠时,CellVU计数池的结果**接近已知浓度,分别为(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,变异系数(CV)值分别为12.80%和10.58%;血细胞计数池和Makler计数池结果均高于已知浓度,前者为(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分别为10.81%和8.89%,后者为(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分别为14.86%和14.96%;CASA系统结果低于已知浓度,为(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比较低,分别为7.22%和6.50%。计数精液时,CellVU计数池与CASA系统结果差异无***性(P=0.71),分别为(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血细胞计数池和Makler计数池结果差异无***性(P=0.14),分别为(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU计数池、CASA系统与血细胞计数池、Makler计数池结果间差异***(P<0.05或P<0.01)。结论:计数精液时,CASA系统与CellVU计数结果差异无***性。各实验室可选择合适的手工或CASA计数方法。不同品牌CASA分析的结果差异较大，因此，更高效精确的精液质量检测系统对促进男科学发展具有重要的意义。南京绵羊精子分析W.H.O 4

二、生化及免疫学检验：1、精浆果糖测定【正常参考值】9.11-17.67mmol/L。【临床意义】（1）精液果糖为0，可见于先天性两侧输精管及精囊腺缺如、两侧输精管完全阻塞或逆行**。（2）精液果糖降低，常见于精囊炎和雄***分泌不足，果糖不足可导致精子运动能量缺乏，甚至不易受孕。2、精浆酸性磷酸酶测定【正常参考值】金氏法：＞255nmol·s-1/L【临床意义】（1）精浆酸性磷酸酶含量增高，常见于前列腺肥大或早期前列腺恶性**患者。（2）精浆酸性磷酸酶含量降低，常见于前列腺炎患者。（3）精浆酸性磷酸酶检测是法医鉴定有无精液**敏感的方法。3、精浆顶体酶活性测定【正常参考值】36.72±21.43U/L。【临床意义】精子顶体酶活力与精子密度及精子顶体完整率呈正相关，其活力不足，可导致男性不育。4、精浆乳酸脱氢酶-X同功酶(LDH-X)测定【正常参考值】LDH-X***活性：2620±1340U/L；LDH-X相对活性：≥0.426。【临床意义】LDH-X具有睾丸及精子的组织特异性，是精于运动获能的关键酶，该酶检测可作为诊断男性不育有价值的指标。睾丸萎缩患者LDH-X降低或消失，精子发生缺陷时无LDH-X形成，少精或无精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。香港计算机辅助精子分析频闪光源精子分析仪节省时间，提高实验室的工作效率，让医生和科研人员更快速地获取实验分析结果。

精子分析仪使用注意事项

1.样品制备是CASA取得高质量检查结果的关键。CASA采用深度为10um样品池，能保证精子在单层界面内自由运动。取样分析前标本必须充分混匀，用微量取液器取5~7ul**加入样品池中，用0.5mm厚皿盖片盖紧。

2.不洁净的计数池可影响精子的活力，尤其影响灰度CASA精子计数的准确性。

3.精子样品密度过大时，造成图像处理上的粘连，无法分析每个精子的运动特性。**中所含精子太少时，需增加检查视野数量或者使用低倍物镜观察，以提高样品检出率。

五、精子活动力检测[正常参考值]**后30-60分钟活动力为Ⅲ级以上的精子＞0.80：**后120分钟内活动力为Ⅲ级以上的精子＞0.60；**120分钟后0.25-0.60的精子仍能活动。[临床意义]活动不良或不活动的精子增多，是导致不育的重要原因之一。常见于精索静脉曲张、泌尿生殖系的非特异性***如大肠杆菌***，某些代谢药、抗疟药、雌***、氧化氮芥等，也可使精子活动力下降。六、精子计数[正常参考值](100-150)×109/L或一次排精总数为(4-6)×108。[临床意义]1．精子计数小于20×109/L或一次排精总数少于1×108为不正常，见于精索静脉曲张、铅金属等有害工业污染、大剂量放射线及某些药物影响。2．精液多次未查到精子为无精症，主要见于睾丸生精功能低下，先天性输精管、精囊缺陷或输精管阻塞。输精管结扎术2个月后精液中应无精子，否则说明手术失败。3．老年人从50岁开始精子数减少以至逐步消失。WHO第6版明确提出：使用CASA系统须遵循适当的程序步骤，才能获得可靠和可重复的结果。

七、精子形态检查[正常参考值]畸形精子：＜10%-15%； 凝集精子：＜10%；未成熟精细胞：＜1%。[临床意义]1．精索静脉曲张病人的畸形精子增多，提示精子在不成熟时已进入精液，或静脉回流不畅造成阴囊内温度过高和睾丸组织缺氧，或血液带有毒性代谢产物从肾或肾上腺静脉逆流至睾丸，上述原因均有损于精子形态。2. 精液中凝集精子增多，提示生殖道***或免疫功能异常。3. 睾丸曲细精管生精功能受到药物或其他因素影响或伤害时，精液中可出现较多病理性未成熟精细胞。

八、精液细胞检查[正常参考值]白细胞(WBC)：＜5个/HP(高倍镜视野)；红细胞(RBC)：0-偶见/HP。[临床意义]1．精液中白细胞增多，常见于精囊炎、前列腺炎及结核等。2．精液中红细胞增多，常见于精囊结核、前列腺*等。3. 精液中若查到*细胞，对生殖系*有诊断意义。 全自动精子分析仪极大提高临床检验水平，广泛应用于泌尿科，男性科以及计划生育、优生优育研究等。南京水生动物精子分析重复性高

精子分析，直线速率（VSL）‌：精子头在开始检测时的位置与终止所处位置之间的直线运动的时均速率。南京绵羊精子分析W.H.O 4

世界卫生组织(WHO)《人类精液及精子—宫颈粘液相互作用实验室检验手册》于1980年***出版，以满足临床与科研对人类精液标准化检测程序日益增长的需求。该手册是人类精液实验室检查和处理程序及方法的标准操作指南，旨在提高精液分析的质量和提高不同实验室结果的可比性。在过去40年里，该手册进行了4次修订与补充(1987年、1992年、1999年和2010年)，内容涉及精液检查的标准化操作程序、精子功能、精浆生化、精液处理与冷冻以及质量保证等，已成为国际公认的标准，被世界各地临床和实验室***使用。中国卫生部已在2003年将其纳入人类辅助生殖技术规范。WHO《人类精液检查与处理实验室手册(第5版)》精液参考值的数据是来自全球3大洲8个国家的前瞻性、多中心临床研究的结果，通过循证医学研究获得的精液参数参考值具有里程碑式意义。自2010年出版以来成为WHO很受欢迎的出版物之一，即使在**近几年其下载量也在稳步增长。它是男科实验室及全球范围内开展精液分析操作的其他实验室、医院和研究机构使用的标准操作手册。该手册在国际大会、科学会议、以及WHO合作中心、专业学会和其他学术机构的培训项目中进行了***传播。截止到2021年，已被3000余篇同行评议论文和评论引用。南京绵羊精子分析W.H.O 4