脑卒中具有发病率高、病死率高、残疾率高及复发率高的特点。其中缺血性脑卒中的发病率高于出血性脑卒中,占脑卒中总数的 60% ~ 70%。缺血性脑卒中引起的组织损伤是主要的致死原因,但研究发现,缺血后再灌注引起的过量氧自由基是造成组织损伤的主要因素。 通过制备脑局部缺血再灌注损伤动物模型研究脑缺血再灌注损伤的作用机制已成为国内外的研究热点。线栓法是*常用的脑局部缺血再灌注损伤模型制备方法,此方法不需要开颅且不需要呼吸机等仪器辅助,缺血部位较恒定,能够准确控制缺血及再灌注时间,容易控制局部条件,全身影响小,是制作脑局部缺血再灌注损伤模型*理想的方法。通过制备脑局部缺血再灌注损伤动物模型研究脑缺血再灌注损伤的作用机制已成为国内外的研究热点。南京小鼠脑梗MCAO模型课题研究
检测方法 造模完成后等待大鼠苏醒,依据Zea longa 5分制标准筛选出2分或3分的脑缺血模型进入后续实验。0分:无神经功能缺损症状,活动正常;1分:不能伸展对侧前爪;2分:爬行时出现向左转圈;3分:行走时身体向偏瘫侧倾倒;4分:不能自发行走,意识丧失。行为学指标目前常采用跳台法、避暗法、穿梭箱法来测定动物一次性被动回避反射能力 ; Y 形水迷宫实验、Morris水迷宫实验等测定动物空间分辨学习记忆能力。研究血管性痴呆、脑卒中抑郁症等可以选择旷场试验作为行为学检测指标之一。病理检测常用HE染色观察组织水肿炎症反应等,尼氏染色可以反应神经元细胞情况。北京快速制作脑梗MCAO模型行为学检测将实验外包可以节省了大量时间,构建脑梗MCAO模型,来艾菱菲生物定制模型。
脑梗MCAO模型关于禁食:很多动物实验都是要求在开展实验的前一天对动物进行禁食,但小编查阅文献后认为可根据实验目的灵活调整。当大鼠血糖浓度高或者低时,脑损伤程度加重、梗死面积增大、脑水肿加重、梗死后出血率增大,因此需要检测大鼠的血糖状态。必要时可在实验前12-24h禁食。然而啮齿类动物代谢率较高,一旦空腹超过6小时可能会导致动物体重减轻和肝糖原耗竭,影响动物的生理状态和手术耐受性,以及候选药物的神经保护作用。
脑梗MCAO模型成功后,水迷宫在Morris水迷宫获得性训练、探查训练和对位训练中,各组间大鼠游泳潜伏期、游泳距离和游泳速度指标均无显*差异。对位探查训练中,与假手术组相比,模型组大鼠平台所在象限时间百分比、平台所在象限时间和进入平台所在象限次数均显*减小(P<0.05,P<0.01); 旷场试验旷场实验结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠穿越格子数显*增加(P<0.05);与模型组相比,阳性*组大鼠穿越格子数显*减少(P<0.01)。各组大鼠后肢站立次数和中*格停留时间均无显*差异。艾菱菲生物提供定制化的模型,根据客户的特定要求进行设计和构建。
缺血性卒中的动物实验模型具有针对性与多样性的特点,其中线栓法大脑中动脉栓塞(MCAO)为制作局灶性缺血卒中模型*常用的方法。缺血性卒中的动物实验模型需要注意:(1)手术有一定技术难度,血管结扎不紧或结扎线脱落,会出血导致病理生理状态改变或增加死亡(2)进栓长度过长,易造成蛛网膜下腔出血,死亡率较高、模型制备失败,而进栓长度不足或线栓回退,不能成功制作脑缺血模型或提前灌注(3)当阻断血管达到120 min或更长时间时,会影响下丘脑的供血,导致自发性高热,影响实验结果。实验外包团队具有丰富的实验操作经验。他们经多年的实践积累,对实验操作过程中的环节有着深入的了解掌握。北京快速制作脑梗MCAO模型行为学检测
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造模方法 颈部备皮常规消毒,取颈正中切口剪开皮肤,分离皮肤下软组织并暴露颈动脉鞘; 游离出颈总动脉1.5cm,穿线备用; 向远心端找到颈外侧动脉,游离涌现结扎,提起颈总备用线,在近心端,远心端用动脉夹夹住; 在近心端动脉夹处,用5mL注射器针头刺破血管,稍微提起动脉夹,用镊子夹住线栓,从小口插入动脉后,去掉远心端动脉夹,然后用镊子夹住线栓,线栓插入到颈内距分叉处1.8-2.0cm; 用备用线将颈总和线栓一起结扎住,*好是结扎双道,记录线栓插入时间,在将动脉夹另一边近心端颈总结扎住,去掉动脉夹; 注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。 线栓法是国内外*常用的制作脑局部缺血再灌注损伤的方法。Koizumi 于 1986 年首先报道了用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,此后 Longa等对该方法进行了改良。线栓法脑缺血模型的研究已经取得很多突破和进展,但模型制备的稳定性受很多因素的影响,如小鼠体质量、线栓的选择等。小鼠缺血再灌注损伤后脑梗死体积百分比的变化可以为研究治*脑卒中药物时间窗提供基础依据,对进一步深入研究大鼠缺血再灌注损伤模型有重要的意义。南京小鼠脑梗MCAO模型课题研究