什么是纺锤体?它有多重要?
纺锤体主要由微管蛋白组成,微管蛋白是一种含有α和β亚单位的异二聚体。纺锤体不是一成不变的,常常处于组装和去组装的动态变化过程中,一般在细胞分裂的中、后期,纺锤体结构较为典型。纺锤体主要有两个作用:其一,排列与分配染色体;其二,决定细胞胞质分裂的分裂面。纺锤体的完整性决定了染色体分裂过程在时间和空间上的准确性。纺锤体就像一位聪明的大力士的双手,在细胞分裂过程中,能精细的将等位染色体平均拉向细胞的两极,确保分裂后的2个子细胞中的染色体数目相等。但是,如果这个大力士多了一只或几只手,染色体的分配将紊乱,导致非整倍体。纺锤体损伤的增加多见于高龄妇女,或接触某些化学物质的卵母细胞。
在细胞分裂过程中,纺锤体对卵母细胞染色体的平衡、运动、分配、和极体的排出非常关键。卵母细胞成熟过程中的两次减数分裂形成两次纺锤体,卵母细胞受精、雌雄原核融合后又会形成有丝分裂纺锤体。 纺锤体的形成与细胞骨架的重构密切相关。上海克隆纺锤体提高冷冻保存效率
Oosight影像分析系统采用液晶偏光成像技术,无需对卵母细胞进行染色,即可实时、清晰、高对比度地进行纺锤体结构和透明带成像,对ICSI、核移植操作、卵母细胞质量评价等有很好的辅助作用。
主要应用ICSI:在单精胞浆注射过程中定位初级卵母细胞,避免卵的破裂损伤,增强胚胎的发育潜能。卵评估:利用定量的分析数据对卵进行分级,改善对胚胎的选择。体外成熟评估:在未成熟卵催化(IVM)过程判断成熟期,判断依据采用的是准确的识别纺锤体,而非不准确的极体。质量控制:利用定量的分析数据对卵进行分级,改善对胚胎的选择。
核移植:显著提高核移植的成功率。由于在核摘除的过程可以清楚的看到核质,使得核移植的成功率增加了80%,并减少了线粒体DNA的摘除。卵冷冻研究:对冷冻的初级卵母细胞进行解冻前和解冻后的定量分析,从而判断卵的发育力,改善妊娠率。纺锤体研究:检测胚胎中纺锤体的发育过程,确定正常和非正常分裂率(只可用于搭配有培养箱的显微镜)。可以对染色体非正常的或非整倍体的胚胎成像,从而选择***的前体做PGD诊断。透明带研究:测量卵母细胞的透明带;准确测量纺锤体和透明带中分子排列方向的差别变化,判断纺锤体和透明带是否处于正常状态 武汉Hamilton Thorne纺锤体透明带纺锤体的主要功能是在细胞分裂时牵引染色体分离,确保遗传信息的正确传递。
构成纺锤体的是纺锤丝还是星射线
人教版《生物·必修1·分子与细胞》第6章在讲述有丝分裂时,关于动物细胞和植物细胞纺锤体形成的区别是这样描述的:植物细胞是从细胞的两极发出纺锤丝,形成一个梭形的纺锤体。而动物细胞是在两极的中心粒周围发出大量的星射线,两组中心粒之间的星射线形成了纺锤体。而在《生物·必修2·遗传与进化》第2章以哺乳动物精子形成过程为例讲述减数分裂过程时,又用了“纺锤丝”这一表述。同一套教材,前后表述不一致,让教师的教学和学生的学习都产生了困惑。“纺锤丝”一词的由来是因为纺锤体微管在电子显微镜下呈丝状,在浙科版教材中即为这样表述,且不论动物细胞还是植物细胞都用“纺锤丝”。不管是纺锤丝还是星射线,都是教材编写者为了学生更好地理解和学习“纺锤体微管”这一名词。
近年来,随着成像技术的飞速发展,特别是纺锤体成像技术的不断进步,科学家们得以在高分辨率下观测细胞分裂过程,从而揭示了纺锤体的许多未知特征和机制。纺锤体成像技术的发展可以追溯到上世纪末,当时科学家们开始利用荧光显微镜技术观测细胞分裂过程。然而,由于传统荧光显微镜的分辨率限制,纺锤体的精细结构和动态变化往往难以被清晰捕捉。为了克服这一难题,科学家们开始探索更高分辨率的成像技术,如电子显微镜、超分辨率显微镜等。然而,这些技术在实际应用中面临着诸多挑战,如样品制备复杂、成像速度慢、对细胞活性影响大等。近年来,随着成像技术的不断创新和进步,纺锤体成像技术取得了突破性进展。特别是超分辨率显微镜技术的出现,如结构光照明显微镜(SIM)、受激辐射损耗显微镜(STED)和单分子定位显微镜(SMLM)等,使得科学家们能够在纳米尺度上观测纺锤体的精细结构和动态变化。 纺锤体的异常可能导致遗传信息的丢失或重复,进而引发遗传性疾病。
微管重组技术是体外构建纺锤体模型的基础。通过在体外重组微管蛋白,可以形成类似于细胞内纺锤体的微管结构。常见的方法包括:从牛脑或其他来源中纯化微管蛋白,确保其纯度和活性。在体外条件下,通过控制温度、离子浓度等参数,诱导微管蛋白组装成微管。使用微管稳定剂(如紫杉醇)或调节蛋白(如MAPs)稳定微管结构,模拟细胞内的微管动态变化。动力蛋白和调节蛋白是纺锤体功能的重要组成部分。通过在体外模型中添加这些蛋白,可以模拟纺锤体的动力学行为。常见的方法包括:添加动力蛋白(如dynein、kinesin)以模拟微管的运动和动力学行为。添加调节蛋白(如AuroraB、Mad2)以模拟纺锤体检查点的功能。 在有丝分裂中,纺锤体形成并维持着染色体的稳定性。美国哺乳动物纺锤体加热台
纺锤体在减数分裂中也发挥重要作用,确保生殖细胞染色体正确分离。上海克隆纺锤体提高冷冻保存效率
在修复纺锤体异常方面,基因转移方法可以通过将正常纺锤体相关基因导入到患者细胞中,从而恢复纺锤体的正常结构和功能。这种方法特别适用于那些由于基因缺失或突变导致纺锤体异常的患者。基因调控是通过调节基因表达水平来诊疗疾病的方法。在修复纺锤体异常方面,基因调控策略可以通过调节纺锤体相关基因的表达水平,从而恢复纺锤体的正常功能。例如,针对某些疾病中纺锤体异常导致的染色体不稳定性,基因调控策略可以通过抑制相关基因的表达,从而降低染色体的不稳定性,进而抑制细胞的生长和侵袭。 上海克隆纺锤体提高冷冻保存效率
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