IP-WB（免疫沉淀-Western Blot）实验流程主要包括以下步骤：样品制备：收集细胞或组织样品，进行适当的裂解处理，以释放细胞内的蛋白质。免疫沉淀：将特异性抗体与目标蛋白结合，形成抗原-抗体复合物。随后，将复合物与固相载体（如磁珠）结合，通过洗涤去除非特异性结合的杂质。电泳分离：将免疫沉淀得到的蛋白质复合物进行SDS-PAGE凝胶电泳，根据分子量大小将蛋白质分离成不同的条带。转膜：将凝胶上的蛋白质转移到固相膜上，以便进行后续的Western Blot检测。Western Blot检测：利用特异性抗体检测目标蛋白或其相互作用伙伴的存在。通过显色反应可视化目标蛋白，观察并记录结果。以上步骤完成后，可以对Western Blot结果进行分析，从而验证蛋白质之间的相互作用情况。Co-IP技术利用抗原抗体特异性作用，研究蛋白质相互作用，助力生命科学研究！河北免疫共沉淀检测CoIP-Mass
免疫共沉淀又叫Co-IP，是利用抗原A与蛋白B结合，通过A的抗体沉淀A，再利用精制的prorein A/G预先结合到磁珠上，使之与含有抗原的溶液及抗体反应后，磁珠上的prorein A/G就能吸附抗原，从而获得抗原A与蛋白B的复合体，之后就可以对B进行检测，从而获得蛋白质与蛋白质相互作用的信息。
免疫共沉淀的优点
相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的，处于天然状态；（2）蛋白的相互作用是在自然状态下进行的，可以避免人为的影响；（3）可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物；（4）能够对间接相互作用的蛋白进行捕获，比如对蛋白复合物的多种成分进行鉴定；（5）可以研究具有修饰的目的蛋白；（6）操作流程较为简便，不需要事先制备大规模蛋白表达文库。 河北免疫共沉淀检测CoIP-MassIP-WB技术缺点：抗体特异性要求高，低丰度蛋白检测难，操作复杂，结果解读难，但可通过优化减少影响！
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是一种基于抗原与抗体特异性结合用于研究蛋白质与蛋白质相互作用的方法。常用于候选目标蛋白质之间是否有相互作用，也用于确定与已知蛋白质互作的其它未知蛋白质相互作用。基本原理：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。免疫共沉淀实验流程：蛋白质样本收集-A抗体沉淀目的蛋白A-SDS-PAGE分离-WB检测B蛋白或者质谱鉴定互作蛋白。Co-IP的优点主要包括高特异性、灵敏度高、与质谱技术兼容、操作相对简便。
Co-IP实验原理主要基于抗原-抗体特异性结合以及蛋白质-蛋白质相互作用。具体来说，当细胞在非变性条件下被裂解时，细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用会被保留下来。实验中，利用靶蛋白的特异性抗体与靶蛋白结合形成复合物，然后通过免疫反应将复合物与固定在固相支持物（如琼脂糖珠或磁珠）上的亲和剂（如Protein A/G）结合。经过一系列的洗涤步骤后，可以去除非特异性结合的蛋白质，将目标蛋白质及其相互作用的蛋白质富集在固相支持物上。通过电泳、质谱分析等技术对富集的蛋白质进行分析，从而鉴定和定量相互作用的蛋白质。IP-WB（免疫沉淀-Western Blot）技术应用场景。
结合了抗体的磁珠或树脂（Beads）与样本裂解液孵育，通过”抗原-抗体“之间的免疫作用，诱饵蛋白被吸附在Beads上，与此同时，诱饵蛋白的互作蛋白，也一起“共沉淀”到Beads上。洗涤去掉未结合的蛋白后，再用洗脱缓冲液将互作蛋白复合物从Beads上洗脱下来，得到免疫共沉淀（Co-IP）产物。Co-IP产物既可以用WesternBlot检测已知蛋白，也可以用质谱鉴定未知蛋白。当没有合适的诱饵蛋白抗体时，还可以通过表达融合了Flag标签的诱饵蛋白，利用Flag标签抗体做免疫沉淀。即样本过表达Flag-Bait，经裂解后与anti-Flag珠子孵育，诱饵融合蛋白与Beads结合，其互作蛋白“共沉淀”到Beads上，再经洗涤、洗脱后，用WB或质谱检测。Co-IP探究蛋白互作，ChIP研究转录调控，各擅胜场，选择需依研究目标！中国香港免疫共沉淀CoIP-Western Blot
Co-IP高特异灵敏，适用多样本，兼容质谱，操作简便，优势大！河北免疫共沉淀检测CoIP-Mass
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是一种经典的用于研究蛋白质相互作用的方法，它基于抗体和抗原之间的专一性作用。该技术主要用于确定两种蛋白质在完整细胞内的生理性相互作用。基本原理：当细胞在非变性条件下被裂解时，细胞内蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留下来。通过利用预先固化在agarose beads上的蛋白质A的抗体来免疫沉淀A蛋白，与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。随后，通过蛋白变性分离，可以对B蛋白进行检测，从而证明两者之间的相互作用。河北免疫共沉淀检测CoIP-Mass
