DTA培养基,也称为葡萄糖胰蛋白胨琼脂,是一种用于分离培养嗜热菌芽孢的培养基。以下是它的一些主要特点:1.**用途**:DTA培养基主要用于乳制品中嗜热需氧芽孢菌计数,以及嗜热菌芽孢(包括需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)的分离培养。2.**成分**:其配方包含胰酪蛋白胨、葡萄糖、琼脂和溴甲酚紫。具体成分为每升培养基中包含胰酪蛋白胨10.0克、葡萄糖5.0克、琼脂15.0克和溴甲酚紫0.04克。3.**pH值**:DTA培养基的pH值通常调节在6.7±0.1(25℃)。4.**检验原理**:胰酪蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂;琼脂作为凝固剂。5.**用法**:称取DTA培养基30.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。6.**生长特征**:嗜热脂肪芽孢杆菌在DTA培养基上的生长特征为黄色菌落。7.**质量控制**:进行微生物灵敏度试验时,按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置55℃需氧培养48小时。回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。8.**储存条件**:DTA培养基应贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖;贮存期三年。血琼脂基础2号可用于观察细菌生长引起的溶血现象,这有助于细菌的鉴定。活性炭酵母琼脂培养皿
葡萄糖肉汤培养基(DextroseBroth)是一种常用的微生物培养基,它主要含有蛋白胨、牛肉膏粉、氯化钠和葡萄糖等成分。这种培养基的pH值通常控制在7.3±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。**特点介绍**:1.**营养成分**:葡萄糖肉汤培养基含有的蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素和生长因子,氯化钠维持渗透压,而葡萄糖则提供碳源。2.**应用范围**:它适用于营养要求高的细菌培养,特别是用于一次性使用卫生用品中溶血性链球菌的检测和肠杆菌科细菌的葡萄糖产气试验。3.**制备方法**:一般操作是称取一定量的培养基粉末,加入到一定量的蒸馏水或去离子水中,加热搅拌煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌。4.**质量控制**:通过使用特定的质控菌株进行测试,可以确保培养基支持目标菌株的生长。例如,乙型溶血性链球菌ATCC21059在该培养基中应表现出良好的生长,而大肠埃希氏菌ATCC25922则用于测试培养基的特异性。葡萄糖肉汤培养基因其营养均衡和制备简单,被用于微生物实验室进行细菌的分离、鉴定和培养研究。改良番茄汁琼脂预装培养皿由于其营养成分的丰富性,不同类型的微生物在血琼脂基础2号上能够迅速生长,并形成明显的菌落。
锰盐营养琼脂(ManganeseNutrientAgar)是一种用于微生物培养的培养基,特别适用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验。以下是它的一些主要特点和用途:1.**成分**:通常包含硫酸锰、蛋白胨、牛肉粉、氯化钠和琼脂。其中,硫酸锰的含量为0.0308g/L,蛋白胨为10.0g/L,牛肉粉为3.0g/L,氯化钠为5.0g/L,琼脂为15.0g/L。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.3±0.1(25℃),为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验,也可用于芽孢杆菌或梭菌的培养和孢子的形成。4.**检验原理**:蛋白胨和牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂作为培养基的凝固剂;硫酸锰可促进芽孢的生成。5.**使用方法**:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。需要注意的是,由于培养基中含有少量硫酸锰,灭菌后可能出现微量沉淀。6.**质量控制**:通过接种质控菌株,如短小芽孢杆菌CMCC(B)63202、枯草芽孢杆菌黑色变种ATCC9372等,放置于55℃需氧培养48小时,以验证培养基的性能。
DTA培养基的pH值对微生物生长有影响。pH值是描述溶液酸碱性的基本指标,对微生物的生长和繁殖有深远的影响。微生物的适应pH范围各不相同,不同种类的微生物对pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范围。pH值的过高或过低都可能对微生物的生长造成不利影响。在DTA培养基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),这个pH值范围是为嗜热菌芽孢的分离培养而优化的。在这个pH值下,胰酪蛋白胨能够提供适宜的碳氮源和生长因子,而葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂,琼脂作为凝固剂,共同为嗜热菌芽孢提供适宜的生长环境。当培养基的pH值偏离这个范围时,可能会影响微生物的新陈代谢和酶活性,改变细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸收和代谢产物的排泄,进而影响微生物的生长。例如,如果pH值过低,可能会抑制菌体中某些酶的活性,阻碍新陈代谢;如果pH值过高,可能会导致细胞膜通透性改变,影响营养物质的吸收。因此,在配制和使用DTA培养基时,严格控制pH值是非常重要的,以确保微生物能够在适宜的环境中生长。通过接种质控菌株,如大肠埃希氏菌、普通变形杆菌和鼠伤寒沙门氏菌等,培养后观察菌落生长。
酵母浸粉葡萄糖琼脂(YPDA)是一种常用的微生物培养基,尤其是在酵母菌的培养中。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:YPDA的主要成分包括酵母浸粉、蛋白胨(或胰化胨)、葡萄糖和琼脂。具体配方为1%酵母浸粉、2%蛋白胨、2%葡萄糖,若制固体培养基,加入2%琼脂粉。2.**pH值**:YPDA的pH值通常调节在6.0±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。葡萄糖溶液灭菌后加入,以避免高温下可能发生的化学反应导致培养基成分变化。4.**用途**:YPDA主要用于酵母菌的培养,也用于药品和生物制品中含王浆和蜂蜜的合剂酵母菌数测定。5.**配制方法**:首先溶解10g酵母浸粉和20g蛋白胨于900ml水中,如制平板加入20g琼脂粉,然后进行高压灭菌。灭菌后加入100ml20g葡萄糖溶液。6.**储存条件**:液体YPDA培养基可常温保存;琼脂YPDA平板在4℃可保存几个月。7.**微生物生长特征**:不同细菌在酵母浸粉葡萄糖琼脂培养基上的生长特征不同,例如酵母菌形成白色凸起光滑菌落,白色念珠菌也形成白色凸起光滑菌落,而黑曲霉菌则有黑色孢子。通常将卵磷脂吐温80营养琼脂培养基的粉成分溶解于蒸馏水中,加热煮沸以完全溶解,然后高压蒸汽灭菌15分钟。改良番茄汁琼脂预装培养皿
TGC液体培养基需要进行高压灭菌,以确保无菌。常用的灭菌方法包括加热灭菌、过滤除菌、及化学试剂灭菌等。活性炭酵母琼脂培养皿
酪蛋白琼脂是一种专门用于微生物学研究的培养基,尤其适用于蜡样芽孢杆菌的酪蛋白分解试验。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:酪蛋白琼脂的基础成分包括酪蛋白、牛肉浸粉、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂和溴百里香酚兰。其中,酪蛋白作为主要的氮源和蛋白分解能力的指示剂,牛肉浸粉提供额外的氮源和维生素,氯化钠维持渗透压平衡,磷酸氢二钾作为缓冲剂,琼脂作为凝固剂,溴百里香酚兰作为pH指示剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.4±0.1(25℃),以保证细菌在比较好pH环境下生长。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟,以确保无菌。4.**使用方法**:称取一定量的培养基粉末,加入到1升蒸馏水中,加热至完全溶解,然后进行灭菌处理。冷却至适当温度后倒入培养皿中,待凝固后用于微生物的培养。5.**培养特征**:在酪蛋白琼脂上,蜡样芽孢杆菌能产生酪蛋白酶,分解酪蛋白,使菌落周围的培养基形成透明圈。这种透明圈的形成是鉴定蜡样芽孢杆菌的重要依据。同时,溴百里香酚兰的颜色变化(由绿变蓝)也有助于观察结果。6.**质量控制**:通过接种质控菌株并观察培养特征来验证培养基的质量。活性炭酵母琼脂培养皿