支原体培养基基础(含精氨酸)是一种专门用于培养支原体的培养基,它包含精氨酸作为生长因子,适用于那些需要精氨酸才能生长的支原体,如口腔支原体等。以下是该培养基的一些特点和配制方法:1.**配方组成**:通常包含猪胃消化粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、葡萄糖、L-精氨酸和酚红等成分。2.**配制方法**:-称取培养基粉末,按照说明书比例(通常是25.52g/L)溶解在蒸馏水中。-加热溶解并调节pH至7.1-0.2(25℃)。-121℃高压灭菌15分钟。-冷却至室温后,无菌操作下加入灭活小牛血清或马血清(通常为200mL)和青霉素(通常为80万单位)。-混匀后分装到无菌试管中备用。3.**用途**:主要用于药品和生物制品中支原体的检测,特别是口腔支原体的培养和检测。4.**培养条件**:通常在36℃±1℃的条件下培养7-14天。5.**观察指标**:培养基中的酚红作为pH指示剂,支原体生长时会因代谢产物改变培养基的pH值,导致颜色变化。例如,口腔支原体分解精氨酸产碱,使培养基颜色由橙色变为红色。6.**质量控制**:通过接种已知的质控菌株来验证培养基的灵敏度和有效性。尽管哥伦比亚血琼脂基础有许多优点,但也存在一定的局限性,如对嗜血杆菌生长的抑制以及受血液类型的影响。DNA酶试验琼脂平板
变异链球菌(Streptococcusmutans)是一种在口腔中发现的细菌,与龋齿的形成有关。它是一种革兰阳性球菌,常以成对或短链状排列。在胰蛋白胨培养基中和含有95%氮气及5%二氧化碳混合气体的环境下生长良好。对于变异链球菌的培养,通常使用TSA+5%脱纤维蛋白羊血(血琼脂平板)作为培养基。在这种培养基上,变异链球菌的菌落特征为较小(直径约1mm)、灰白色、凸起、边缘不齐、干燥、有α溶血环。在选择培养基时,需要考虑培养基的pH值、营养成分、氧气需求和抑制剂等因素,以确保目标细菌能够在抑制杂菌的同时良好生长。例如,改良爱德华培养基(Edwardmodifiedmedium)是一种常用的培养基,它含有血液、血清或其它营养成分,适合于培养对营养要求较高的细菌,如链球菌。在实验室中,变异链球菌的培养和鉴定是一个多步骤的过程,包括接种、培养、观察菌落特征、进行生化试验和药敏分析等。通过这些步骤,可以准确地识别和鉴定变异链球菌,从而为临床诊断提供依据。Aliz-gal Agar预装培养皿巴氏芽孢杆菌的芽孢形成需要特定的培养条件,包括营养和环境因素。例如,使用改良的Schaeffer培养基。
酚红葡萄糖肉汤(PhenolRedGlucoseBroth)是一种常用的微生物学培养基,主要用于鉴定细菌是否具有发酵葡萄糖的能力。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:酚红葡萄糖肉汤的配方包含月示胨(或称为蛋白胨)、牛肉浸粉、氯化钠、葡萄糖和酚红。其中,月示胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为可发酵的糖类;氯化钠维持渗透压;酚红作为pH指示剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.4±0.1(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌10-15分钟。4.**使用方法**:称取培养基粉末,溶解于蒸馏水中,分装试管,每管3ml。5.**质量控制**:接种蜡样芽孢杆菌后,在厌氧条件下35℃培养24小时,培养基由红色变为黄色,表明细菌发酵葡萄糖产酸。6.**用途**:酚红葡萄糖肉汤用于蜡样芽孢杆菌葡萄糖分解试验(SN标准),也用于检测大肠菌群。7.**结果观察**:如果培养基颜色由红色变为黄色,说明细菌发酵葡萄糖产酸;如果培养基颜色不变或红色加深,说明该微生物葡萄糖发酵阴性。8.**储存条件**:避光,密封,阴凉干燥处保存。
半固体储存培养基是一种在微生物学研究和细胞培养领域中扮演重要角色的培养基。它主要用于观察微生物的动力、菌种的保藏与运输、厌氧菌的培养、菌种鉴定、细胞培养、噬菌体效价测定以及微生物趋化性研究等。半固体培养基通常由液体培养基加入少量凝固剂制成,例如琼脂的用量在0.2~0.7%之间。在具体应用上,半固体培养基可以用于以下方面:1.**微生物动力观察**:通过推测细菌是否有鞭毛来进行鉴定。2.**菌种保藏与运输**:便于菌种的短时间保存和长途运输。3.**厌氧菌培养**:适用于厌氧菌的培养,对于研究厌氧微生物的生长和代谢至关重要。4.**菌种鉴定**:通过观察菌落的形态和生长特性来区分不同的微生物种类。5.**细胞培养**:在细胞生物学领域,半固体培养基广泛应用于干细胞、细胞克隆、细胞表达和细胞毒性等实验。6.**噬菌体效价测定**:用于双层平板法测定噬菌体的效价,是研究病毒与宿主相互作用的重要手段。7.**微生物趋化性研究**:帮助研究微生物的趋化性,即微生物对化学物质的定向移动反应。在冷冻保存过程中,使用保护剂如甘油、血清、糖类等,可以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害 。
肉浸液肉汤是一种基础的微生物培养基,其主要特点和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉汤主要由绞碎牛肉、氯化钠、蛋白胨和磷酸氢二钾组成,再加上一定量的蒸馏水。具体配比为:绞碎牛肉500g、氯化钠5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾2g、蒸馏水1000mL。2.**制作方法**:首先将绞碎的去筋膜无油脂牛肉与蒸馏水混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量。然后加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30分钟。3.**用途**:肉浸液肉汤通常用于培养那些营养要求不是特别高的细菌,如溶血性链球菌及其他营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了细菌生长所需的氮源、维生素和生长因子。4.**培养特征**:在肉浸液肉汤中,细菌可以很好地生长,通常表现为肉汤混浊,这是由于细菌的代谢活动导致的。5.**储存**:肉浸液肉汤的脱水培养基应避光储存于25℃下阴凉干燥处,开过封的脱水培养基应盖紧瓶盖注意密封储存。CVT琼脂含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、结晶紫、TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)和琼脂等成分。ISP Medium 5平板
蜡样芽孢杆菌在木糖明胶培养基中不发酵木糖,培养基颜色不变,液化明胶作为典型特征 。DNA酶试验琼脂平板
NGKG琼脂基础是一种用于食品中蜡样芽孢杆菌分离培养的培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:NGKG琼脂基础的配方包含蛋白胨、酵母浸粉、氯化钠、甘氨酸、苯酚红和琼脂等成分。蛋白胨和酵母浸粉提供碳源、氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持渗透压;甘氨酸提供氮源;苯酚红作为酸碱指示剂;琼脂作为凝固剂。2.**pH调节**:NGKG琼脂基础的pH值通常调节在6.8±0.1(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。4.**添加物**:在冷却至50℃左右时,需要加入20%卵黄液100mL(卵黄液制备:取无菌卵黄液20mL,生理盐水80mL,混匀)。卵黄液提供卵磷脂,产卵磷脂酶的细菌可水解卵磷脂,使其菌落周围形成一个白色的沉淀环。5.**抗生物质**:每200mL培养基中添加多粘菌素B溶液1支,以抑制革兰氏阴性细菌生长。6.**用途**:NGKG琼脂基础主要用于食品中蜡样芽孢杆菌的分离培养。7.**培养特征**:在30℃±1℃需氧培养18-24小时后,典型的蜡样芽孢杆菌在NGKG琼脂基础上表现为浅红色菌落,边缘不规则,有卵磷脂沉淀环。8.**质量控制**:通过接种质控菌株并观察培养特征来验证培养基的质量。 DNA酶试验琼脂平板