随着技术的不断进步和创新,未来有望开发出更加便捷、高效、低成本的偏振光成像系统,进一步降低设备成本并提高操作简便性。同时,通过优化成像算法和数据处理技术,可以实现对纺锤体形态变化的更精细、更准确的评估。无需染色纺锤体卵冷冻研究涉及生殖医学、细胞生物学、材料科学等多个领域。未来通过加强不同学科之间的交叉融合和协同创新,可以推动该领域取得更多突破性进展。随着技术的不断成熟和成本的降低,无需染色纺锤体卵冷冻技术有望在更多医疗机构中得到应用和推广。这将为更多女性提供生育能力保存的机会,同时也为生殖医学领域的发展注入新的活力。纺锤体形成和功能的调控涉及多个信号通路。上海MII期纺锤体Oosight Meta
纺锤体功能分解
在细胞分裂中,其主要作用有两个部分。其一为排列与分裂染色体。纺锤体的完整性决定了染色体分裂的正确性。纺锤体的正常生成是染色体排列的必要条件。纺锤体生成完毕后一般会有5-20分钟的延迟,以供细胞调整着丝点上微管束的极性,以及决定是否所有的着丝点都附着正确。此后细胞进入分裂后期,染色体分裂为两组数目相等的姐妹染色单体。同样,纺锤体的完整性决定这个分裂过程在时间和空间上的准确性。
纺锤体另一功能为决定胞质分裂的分裂面。染色体分裂的同时,纺锤体中的一部分微管不随染色体分裂到两极,而停弛在纺锤体**, 形成纺锤**体(central spindle)。在纺锤中体的**为两组极性相反的微管交叠的区域,称为纺锤**区(spindle midzone).此**区就是接下来的胞质分裂面。胞质分裂开始于分裂后期的较晚期。胞质分裂一般结束于分裂末期后1-2小时,此期间两个子细胞由中心颗粒体(midbody)连接。 一般认为纺锤体的分解发生在细胞分裂末期。 深圳非侵入式成像纺锤体玻璃底培养皿纺锤体微管的正极朝向细胞两极,负极则靠近染色体。
为了减少冷冻过程中纺锤体的损伤,研究者们尝试在冷冻液及解冻液中添加细胞骨架保护剂,如紫杉醇(Taxol)。紫杉醇能够稳定微管结构,防止其在低温下解聚。通过偏光成像技术,研究者可以实时监测紫杉醇对纺锤体的保护效果,评估其在冷冻保存过程中的作用机制。此外,还可以进一步观察解冻后卵母细胞的发育潜能,为临床应用提供可靠依据。无需对细胞进行固定和染色,保持细胞的活性与完整性。能够实时监测纺锤体的形态变化,评估冷冻效果。能够捕捉到细微的纺锤体形态变化,提高评估的准确性。
染色体
当细胞从间期进入有丝分裂期,间期细胞微管网络解聚为游离的αβ-微管蛋白二聚体,再重组成纺锤体,介导染色体的运动;分裂末期纺锤体微管解聚,又重组形成细胞质微管网络。
可分为:动粒微管:连接染色体动粒于两极的微管。
极间微管:从两极发出,在纺锤体中部赤道区相互交错的微管。
星体微管:中心体周围呈辐射分布的微管。
染色体的运动依赖纺锤体微管的组装和去组装。在这一过程中动粒微管与动粒之间的滑动主要是依靠结合在动粒部位的驱动蛋白和动力蛋白沿微管的运动来完成。极微管在纺锤体中部交错,有些分布在极微管之间特殊的双极马达蛋白,其中2个马达蛋白沿一条微管运动,另2个马达结构域沿另一条微管运动。由于2条微管分别来自二极,故极性相反。当双极驱动蛋白四聚体沿微管向正极运动时,纺锤体二极间距离延长。反之纺锤体距离缩短。 纺锤体微管的动态不稳定性是其功能的基础。
光学相干断层成像是一种基于低相干光干涉原理的成像技术,具有高分辨率、非侵入性和实时成像等特点。在纺锤体卵冷冻研究中,OCT技术可用于观察卵母细胞内部结构的细微变化,包括纺锤体的形态和位置。虽然目前OCT技术在纺锤体成像方面的应用还较为有限,但随着技术的不断发展和完善,相信未来OCT将在纺锤体卵冷冻研究中发挥更加重要的作用。虽然MRI和超声波成像在生殖医学中主要用于软组织的成像,如子宫、卵巢等病变检测,但它们在纺锤体卵冷冻研究中的应用也值得探讨。随着技术的不断进步,高分辨率MRI和超声波成像技术可能会实现对卵母细胞内部结构的更精细观察。纺锤体微管的排列方向决定了染色体分离的方向。武汉偏光成像纺锤体揭示卵母细胞关键结构
纺锤体的形成需要多种蛋白质的精确协作与调控。上海MII期纺锤体Oosight Meta
纺锤体观测仪在补救ICSI中的应用
我们知道,成熟的卵母细胞排出***极体。IVF加入精子后,精子会穿透层层障碍**终进入卵子,随着时间的推移,卵子的纺锤体会将染色单体拉向两极,进而排出第二极体,再往后大约加精后9-16小时,雌雄原核会出现,而原核的出现才是受精的标志。但是对于那些没有受精的卵子,到了原核出现的时间窗,发现没有受精时再去补救ICSI,往往错过了卵子的比较好受精时间,因为没有受精的卵子会在体外老化,即使受精,胚胎的发育潜能也很低。所以,我们在加精后的4-6小时,通过观察第二极体的排出来初步判断是否受精,**的增加了那些受精障碍患者的受精率,也避免了卵子的老化。
当然,偶尔也会出现错误补救。文献报道对IVF受精后的未排出第二极体的卵母细胞进行ICSI补救,实验组用纺锤体观测仪观察并统计纺锤体的数目,82.7%含有一个纺锤体,17.3%含有两个纺锤体,并对含有一个纺锤体的卵母细胞进行补救ICSI;而对照组并未用纺锤体观测仪观察纺锤体,只对未排出第二极体的卵母细胞进行补救ICSI。结果发现,使用纺锤体观测仪观察纺锤体的数目能显著提高正常受精率,降低多原核受精比率。 上海MII期纺锤体Oosight Meta
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