培养基的实验室制备:―般要求:正确制备培养基是微生物检验的好基础步骤之一,使用脱水培养基和其他成分,尤其是含有有毒物质(如胆盐或其他选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。使用商品化脱水合成培养基制备培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配制。如重量(体积)、pH制备日期、灭菌条件和操作步骤等。实验室使用各种基础成分制备培养基时,应按照配方准确配制,并记录相关信息,如:培养基名称和类型及试剂级别、每个成分物质含量、制造商、批号、pH、培养基体积(分装体积)、无菌措施(包括实施的方式、温度及时间)、配置日期、人员等,以便溯源。全自动培养基制备仪主要特点:容器可自行拆卸更换和消毒,操作方便。山东实验室培养基制备器
培养基制备操作步骤:(一)准确称量试剂根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。(二)校正pH值将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1NNaOH和1NHCl调节pH值到适宜范围内。(三)过滤将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。(四)分装将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。(五)灭菌培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。山东触摸屏培养基制备器培养基制备器都是微处理器控制的,而且灭菌之后保持的温度是可以预设的。
培养基的分类:培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基较终pH之用。
培养基的性能测试:1.外观控制:制备好的培养基应有相应的颜色,一般的培养基应澄清、无浑浊、无沉淀。使用前应检查培养基的颜色是否发生变化,是否蒸发/脱水。2.污染控制:从每批制备好的培养基中选取部分进行污染测试(无菌试验),确定无微生物生长方可使用。3.性能测试:(1)测试菌株选择:测试菌株是具有其表示种的稳定特性并能有效证明实验室特定培养基较佳性能的一套菌株。(3)半定量测试方法(改进的划线法接种法)。(4)定性测试方法(平板接种观察法)。用接种环取测试菌培养物,在测试培养基表面划平行直线。培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,较好一次完成,不要中断。
培养基的制备:(1)称量:根据培养基的配方,称取适量药品于搪瓷杯中;(2)溶解:用量筒量取所需水量,置电炉上加热,一边搅拌,至完全溶解,加热至沸腾,拔掉电源,待冷却;(3)分装:根据不同需要,立即趁热分装入三角瓶或试管中,分装三角瓶以不超过三角瓶一半为宜,分装试管一般为管长的1/5(需根据试管的大小而定).液体培养基如乳糖胆盐发酵培养基约分装10毫升左右.(4)塞硅胶塞:装好培养基的试管应塞上硅胶塞,松紧合适,紧贴管壁,不留缝隙,约1/2塞入内,这样即可过滤空气,避免杂菌侵入,又可减缓培养基水分的蒸发.(5)包装:三角瓶棉塞头部应用锡箔纸包扎,试管集中于试管篓.2、无菌水的制备:(1)用10ml移液管量取9.2ml蒸馏水(稀释水)装入试管中.(2)用100ml量筒量取95ml蒸馏水(稀释水)装入150ml的三角瓶中.可置少许玻璃珠于三角瓶内,防止暴沸.(3)量取240ml蒸馏水(稀释水)于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮纸包扎好,高压灭菌备用。培养基制备器勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊。中国香港培养基制备器多少钱
培养基制备器完全灭菌后用于单种微生物培养和鉴定,一般都是在无菌状态下储存,定量使用的。山东实验室培养基制备器
消毒与灭菌的区别:消毒指使用较为温和的物理或化学方法单杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(对于一些不耐高温的液体)还有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。灭菌方法:①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱;③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅。④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯。山东实验室培养基制备器
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