异硫氰酸荧光素(FITC)是一种有机荧光染料,目前,这种荧光染料仍用于免疫荧光和流式细胞术中。在495/517nm处,该染料会产生激发/发射峰值,并可借助异硫氰酸盐反应基团与不同抗体结合,该基团可以和蛋白质上的氨基、巯基、咪唑、酪氨酰、羰基等基团相结合。而它的基本成分——荧光素,其摩尔质量为332g/mol,常被用作荧光示踪剂。FITC(389g/mol)是用于荧光显微镜技术的首批染料,且其被当成AlexaFluor®488等后续荧光染料的发端。该染料的荧光活性取决于它的大共轭芳香电子系统,而该系统受蓝色光谱中的光所激发。经常与FITC同时使用的另一种染料是与其相似的TRITC[四甲基罗丹明-5(6)-异硫氰酸]。与FITC相反,TRITC并非荧光素,而是罗丹明家族的衍生物。罗丹明也具有一个大的共轭芳香电子系统,正是该系统引发了它们的荧光行为。还有一点与FITC相反,TRITC(479g/mol)由比较**长为550nm的绿色光谱中的光所激发,它的比较大发射波长为573nm。与蛋白质(例如,抗体)结合也基于异硫氰酸盐反应基团。Cy7 DiC18(DiR)是一个亲脂性、近红外荧光花青染料,这个染料常用于标记细胞质膜。苏州荧光染料APC
CY5荧光染料是一种被广泛应用于生物分子检测和荧光成像等领域的高效、稳定的荧光标记试剂。它具有出色的荧光性能和良好的生物相容性。Cy5属于小分子染料,其*大发射波长为670nm,其标记的抗体适用于所有配备633nm氩离子激光器的流式细胞仪,检测通道一般是FL4通道。除流式细胞术外,Cy5同样适用于传统的荧光显微镜技术。需注意的是,Cy5与单核细胞和粒细胞的非特异性结合多,实验结果容易出现假阳性。Cy5.5含有一个游离胺基,可与多种官能团共轭,包括NHS酯和环氧化合物。激发和发射的最大值分别为678nm和694nm。Cy5.5已应用于各种基于荧光的实验中。Cy5.5是一种远红色(和近红外)发射染料,是荧光测量的理想选择。Cy5.5具有成本效益,且其标记化学操作简单,适合于潜在的***药物开发Cy5.5标记因子VIIa是用来想象**的。用这些靶向蛋白标记的Cy5.5在**异种移植物上特异定位至少14天,但未结合的Cy5.5不能定位于任何异种移植或***。这种**血管内皮细胞中抗组织因子的成像方法可用于检测原发性**和转移以及监测体内***反应[1]。pH/温度敏感磁性纳米凝胶结合Cy5.5标记乳铁蛋白(Cy5.5-Lf-MPNA纳米凝胶)是一种有前途的胶质瘤术前MRI和术中荧光成像的对比剂[2]山西荧光染料DIRHoechst 33342是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。
Cy5:激发波长633/635nm,比较大发射波长670nm。1)其标记的抗体适用于所有配备633nm氟离子激光器的流式细胞仪;2)在流式细胞仪的FL4通道检测;3)适用于荧光显微镜技术;4)同样为小分子染料,非常适合需小分子染料的流式细胞术,荧光强度低于APC。5)与单核和粒细胞非特异性结合多,易出现假阳性结果。
5、PE:激发波长488nm,比较大发射波长575nm。1)其标记的抗体适用于所有配备488nm氯离子激光器的流式细胞仪:2)在流式细胞仪的FL2通道检测;3)其荧光泯灭性强,不适用于传统的荧光显微镜技术,但适用于激光共聚焦显微镜技术。
6、PE-TR:激发波长488nm,比较大发射波长615nm。1)在BeckmanCoulter流式细胞仪的FL3通道检测;2)可适用于小功率激光器的流式细胞仪,也可使用于大功率激光器的大流式细胞仪。
7、PE-AlexaFluor610:激发波长488nm,比较大发射波长628nm。1)在BeckmanCoulter流式细胞仪的FL3通道检测;2)荧光强度高;3)可适用于小功率激光器的流式细胞仪,也可使用于大功率激光器的大流式细胞仪。
Hoechst33342是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst33342常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst33342-DNA的激发和发射波长分别为350nm和460nm。可溶于水。4.染色程序:(1)用PBS或合适的缓冲液制备10~50µMHoechst33342染料。(2)将1/10细胞培养基体积的Hoechst染料溶液加入细胞培养物中(可以用1/10浓度的Hoechst染料缓冲液代替培养基)。(3)在37℃培养细胞10~20分钟。(4)用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。(5)用带有350nm激发波长,460nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。Super Flour 系列荧光探针,具有更强的荧光强度,更广的pH应用范围(pH 4~10), 更好的抗淬灭性。
琥珀酰亚胺酯(Succinimidylesters)/NHS酯活性荧光染料用于标记抗体,蛋白质,肽,胺修饰的寡核苷酸和其他生物分子上的游离氨基(-NH2)2、马来酰亚胺(Maleimides)活性荧光染料用于标记抗体,蛋白质和肽上的巯基3、叠氮化物(Azides)活性荧光染料通过点击化学法(Click)标记乙烯基4、炔烃(Alkynes)活性荧光染料通过点击化学方法标记叠氮化物5、羧酸(Carboxylicacids)活性荧光染料经碳二亚胺预活化后用于标记胺或用于醇的Steglich酯化6、氨基(Amines)活性荧光染料具有游离氨基的荧光染料,用于与各种亲电子化合物(如活化的酯和环氧化物)偶联。花青类荧光染料属于共振染料,其特征在于具有离域电荷的氮原子(两个氮原子)之间的聚甲炔染料。苏州荧光染料APC
脂溶性荧光染料cy3、cy5、cy7等。苏州荧光染料APC
与花青和罗丹明染料一样,荧光素也是一种有机染料。荧光素的比较大吸收波长为494nm,比较大发射波长为521nm(通常吸收蓝色范围内的光并发射绿色范围内的光),荧光素是一种高荧光物质。即使在非常少量的情况下也可以检测到它,并且在与抗体结合时用于显微镜检查。荧光素的衍生物包括异硫氰酸荧光素、俄勒冈绿和羧基萘并荧光素等。与许多其他荧光染料一样,荧光素价格低廉且易于使用,使其成为生物学研究中很受欢迎的染料之一。与大多数其他染料不同,荧光素在水溶液中是无毒的。因此,它是极少数用作地下水示踪剂的染料之一。苏州荧光染料APC