溶化:培养基放入烧杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,边加入边用玻璃棒搅拌。如果培养基中不含有琼脂,培养基不需要加热;如果含有琼脂,则需要用本生灯或电磁炉加热煮沸,完全溶解后,再补齐所需水,并搅拌均匀。如果配置的培养基量很大,可用不锈钢锅加热溶化,可先用温水加热并随时搅动,防止焦化,如有焦化现象,配制的培养基就不能使用,要重新配制。配制培养基时不可用铜或铁的容器溶化,因铜或铁制容器可能会使培养基中的铜和铁的含量超标,影响实验(培养基中铜含量大于0.3mg/L,细菌不宜生长,铁含量超过0.14mg/L,妨碍细菌产有害)。对容易发生反应,产生沉淀的药品,要分开溶解,较后加入培养基,如磷酸二氢钾和硫酸镁。培养基制备器内部的管道和容器可以更换,方便移除和清洗。河北不锈钢内桶培养基制备器
三角培养瓶是细胞培养中的常用耗材,也可用于培养基的配制、混合及储存。利用三角培养瓶制备培养基可以按照以下步骤操作:配料:配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状。加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。调PH:用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。过滤:滤纸或棉花进行过滤。分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角培养瓶:若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角培养瓶,很多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。试管分装:液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度;固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。河北不锈钢内桶培养基制备器使用商品化脱水合成培养基制备培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配置。
培养基制备的基本方法和注意事项:1.培养基成分的称取培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱.较好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方上做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后.还应进行一次检查。2.培养基各成份的混合和溶化培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。较好使用不锈钢锅加热溶化.也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动,以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备。
制作斜面培养基和平板培养基:培养基灭菌后,如制作斜面培养基和平板培养基,须趁培养基未凝固时进行。(1)制作斜面培养基。在实验台上放1支长0.5-1米左右的木条,厚度为1厘米左右,将试管头部枕在木条上,使管内培养基自然倾斜,凝固后即成斜面培养基。(2)制作平板培养基。将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上,点燃酒精灯,右手托起锥形瓶瓶底,左手拔下棉塞,将瓶口在酒精灯上稍加灼烧,左手打开培养皿盖,右手迅速将培养基倒入培养皿中,每皿约倒入10毫升,以铺满皿底为度。铺放培养基后放置15分钟左右,待培养基凝固后,再5个培养皿一叠,倒置过来,平放在恒温箱里,24小时后检查,如培养基末长杂菌,即可用来培养微生物。培养基制备器解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
培养基制备器:1.操作简单,安全可靠。温度和压力严格控制锁定装载舱口和外部盖子,不存在意外打开,保证了环境和操作者的安全。内部的管道和容器可以更换,方便移除和清洗。每一款MediaPrep高压灭菌器都是这样装配和控制的,是一种标准配置。2.高效而强大的加热和制冷系统功能强大的加热器,能够迅速加热;快速制冷是通过循环水和压力(加入内部的软化水产生的)所进行的。利用与外部水连接的盘状热交换器,能够使内部迅速冷却,整个过程包括:加热、灭菌和冷却(至50°C),依据容器的大小、培养基的数量和冷却水的温度,只需60-120分钟即可完成。负载的压力,有效地避免了培养基过温失效和培养基中气泡的产生。空气压缩机是内置的。全自动控制程序,确保内部温度均一,从而保证了配制和灭菌的培养基具有更高的质量,整个过程,在一个设定温度内,从初的加热到混合和灭菌,后到冷却,都是微处理器控制的,而且灭菌之后保持的温度是可以预设的。杀菌剂装入口宽大,并附有保险锁。杀菌剂可从此口加入,也可用注射器从硅酮膜注入。全自动培养基制备仪主要特点:具有快速升温和迅速冷却功能。培养基消毒 培养基制备器厂家
培养基制备器培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,较好一次完成,不要中断。河北不锈钢内桶培养基制备器
培养基的分装:大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认。每次使用前后,均要对分配器的管道系统进行冲洗,在分装无菌培养基前,则要采用无菌硅胶管。固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中,高压灭菌后根据需要分装平皿或试管。平皿:倾注平皿,应在无菌室中放置3—4h,如用塑料平皿须在35℃培养箱中倒置30—60min。让水蒸汽自然蒸发。斜面:制备低层斜面分装于试管,约占容积1/5,灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上,使成斜度,分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基,如沾有培养基应用布抹去,以避免污染。河北不锈钢内桶培养基制备器
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