细胞分析仪性能的技术指标主要有荧光分辨率、荧光灵敏度、分析参数多少及分析、分选速度及纯度等。荧光分辨率是指分辨两个相邻峰的Z小距离,通常用变异系数(CV值)来表示。现在市场上主流型号的荧光分辨率小于2.0%,有的甚至在1%之内。荧光灵敏度反映了仪器探测Z小荧光光强的能力,一般用荧光微球上可测出的荧光(FITC)的Z小分子数来表示。目前细胞分析仪可以达到100以内。一般分析速度为500-10000个细胞/s,分选速度控制在1000个细胞/s以下,分选纯度>98%,有的细胞分析仪分析速度可达100000个细胞/s,分选速度可达70000个细胞/s,分选纯度>98%。细胞分析仪可以分析细胞物理特性,比如细胞大小、形态等。南京外泌体分离分析系统生产商
荧光信号的接受方向垂直于激光束,经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离,使多个不同波长的荧光信号形成。所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度由这些荧光信号的强度来表示。通过电倍增管接收后能够转换为电信号,被计算机识别的数字信号能够由连续的电信号通过A/D转换器转换而成。计算机处理所测量到的各种信号,在计算机屏幕上显示分析结果,也能够打印出来,还能够在硬盘上以数据文件的形式存储,从而为以后的查询或进一步分析做准备。根据不同的测量参数提供了多种检测数据的显示形式。杭州Agilent流式细胞仪设计细胞分析仪在临床领域也有普遍应用,如肿瘤细胞的检测和分析。
流式细胞仪的液流系统:将经特异性荧光染料染色的待测细胞制成单细胞悬液,加入流式细胞仪的样品管中,在气体压力推动下进入流动室,不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出。鞘液管入口方向与待测样品流呈一定角度,这样鞘液就能够包绕着样品高速流动,组成一个圆形的流束,待测细胞在鞘液的包被下单行排列,依次通过检测区域。这种同轴流动的设计,使得样品流和鞘液流形成的流束始终保持着一种分层销流的状态。利用样品流和鞘流的气压差的层流原理,使细胞依次排列成单行,每个细胞以均等的时间依次通过测量区,被荧光染料染色的细胞受到强烈的激光照射后发出荧光,同时产生散射光。细胞发出的荧光信号和散射光信号同时被光电倍增管接收。
流式细胞仪的维护保养:选择正确的荧光染料,一般原则是:低表达抗原标记高S/N(信噪比)荧光素,高表达抗原标记低S/N(信噪比)荧光素。当样品用2种以上荧光染料时,为消除干扰,需要做荧光补偿。在应用流式细胞仪软件作荧光补偿时,补偿只应用在同一个激光激发的不同荧光素之间,应避免补偿不足和过度补偿。溶液使用前,所用溶液都要进行过滤处理,以免出现沉淀物而堵塞喷嘴。流式细胞仪状态稳定后,要先排除进样针内的气泡以保证喷嘴畅通,之后再对样本进行检测。细胞分析仪可根据荧光识别细胞内不同的成分如蛋白质、核酸、细胞器等,并对这些成分进行分析。
流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。Z少三色荧光,参数越多检测越为灵敏。细胞凋亡分析,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片。疾病耐药分析,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。强直性脊柱炎诊断,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。PNH诊断,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。流式细胞仪与其他细胞分析仪器相比,具有突出的技术特征,这些技术特征的不断改进就大致地表示了流式细胞仪的技术发展过程。细胞分析仪可以通过化学反应、节段反应技术等获取细胞的生化信息。上海BioTek酶标仪批发
细胞分析仪可以进行三种细胞分析:体外细胞分析、体内细胞分析和单个细胞分析。南京外泌体分离分析系统生产商
流式细胞仪的高速度:分析速度以每秒可分析的细胞数来表示。流式细胞仪是以高速度的数据处理电子系统信号,配合GX的液流控制系统,有力地保证了流式细胞仪的检测功能。流式细胞仪对细胞的检测速度一般为1000~5000个/s;而到目前为止,对细胞的标准分析速度已达到了2×104个/s,Zda分析速度可达到6×104个/s。高灵敏度:灵敏度的高低是衡量流式细胞仪检测微弱荧光信号的重要指标,一般是以能检测到单个微球上Z少标记有异硫氢酸荧光素(FITC)或藻红蛋白(PE)荧光分子数目来表示。以前,每个细胞要带有1000~3000个FITC分子才能在流式细胞仪上测量出来;目前,一个细胞上只要带600个荧光分子,甚至带100个FITC分子,即可以被检测和分选出来。南京外泌体分离分析系统生产商