LB琼脂(Miller)是一种用于实验室的微生物培养基,特别适合于大肠杆菌(E.coli)的培养。这种培养基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化钠,以及作为凝固剂的琼脂。Miller配方的特点是含有较高的氯化钠浓度,这有助于选择性地培养某些细菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化钠(NaCl):10.0g-琼脂(Agar):15.0g**制备方法**:1.将40克LB琼脂粉末加入到1升蒸馏水中。2.加热至沸腾,同时搅拌以确保粉末完全溶解。3.在121°C下高压灭菌15分钟。4.灭菌后,冷却至50°C,然后分装到无菌培养皿中。**应用**:-适用于非选择性培养大肠杆菌菌株,用于克隆、质粒DNA制备和重组蛋白生产。-当加入适当的抗生物质时,也适合选择性培养。**特点**:-无需复杂配置,快速溶解,方便使用。-经济实惠,适合大量培养基的制备。**储存条件**:-通常建议在常温(10-30℃)下储存。LB琼脂(Miller)因其营养丰富、制备简单的应用,成为分子生物学和微生物学实验室中的标准培养基之一。在实际使用时,应严格按照产品说明书或相关标准进行操作,以确保培养效果。通过进一步的生化测试,如氧化/发酵葡萄糖测试、花青素鉴定等,来进一步确认分离的菌株是否为目标肠道菌。亚硫酸铋琼脂培养皿
Vogel-Johnson(V-J)琼脂基础是一种用于金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)选择性分离培养的培养基。以下是其特点介绍:1.**成分**:V-J琼脂基础包含明胶蛋白胨、酵母浸粉、甘露醇、酚红、磷酸氢二钾、氯化锂、甘氨酸和琼脂等成分。这些成分为细菌提供氮源、碳源、维生素以及凝固剂。2.**选择性**:甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其他菌株具有抑制作用,而较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长。3.**鉴别特性**:金黄色葡萄球菌能够还原亚碲酸钾,使菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄。4.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),适合金黄色葡萄球菌的生长。5.**使用方法**:称取V-J琼脂基础粉末,溶解于蒸馏水中,煮沸后高压灭菌。冷却至45-50℃时加入过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,混匀后倾注平板。6.**培养条件**:接种后的培养基通常在30-35℃下需氧培养24-48小时。7.**结果观察**:金黄色葡萄球菌在V-J琼脂上通常形成黑色菌落,周围培养基变黄;而大肠埃希氏菌等非目标细菌则被抑制。8.**储存条件**:V-J琼脂基础应在避光、阴凉干燥处储存,使用后立即旋紧瓶盖,以保持其有效性。淀粉硫酸铵琼脂预装培养皿EMB培养基成为鉴定肠道细菌的一种常用工具,特别是在食品卫生和临床微生物学方面。
乳糖发酵培养基(LactoseFermentBroth),也称为乳糖复发酵培养基,是一种用于微生物检测的培养基,主要用于测定大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌。以下是其特点和相关信息:1.**用途**:用于大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定。2.**实验原理**:蛋白胨提供碳源和氮源以满足细菌生长的需求;乳糖作为大肠菌群可发酵的糖类;溴甲酚紫作为pH指示剂,酸性环境下呈黄色,碱性环境下呈紫色。3.**成分**:通常包含蛋白胨20.0g/L、乳糖10.0g/L、溴甲酚紫0.01g/L,pH值调节至7.4±0.1(25℃)。4.**使用方法**:称取培养基30.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟备用。5.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌ATCC25922、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028和阴沟肠杆菌ATCC23355,来验证培养基的选择性和生长促进效果。6.**细菌生长特征**:不同细菌在乳糖发酵培养基上的生长特征不同,例如大肠埃希氏菌通常会产生酸性环境,使得培养基颜色变为黄色,并可能产生气体。7.**储存和运输条件**:未开盖的乳糖发酵培养基的保质期通常为6个月,需要在4-10度的条件下保存,运输时应保持常温。
乳糖胆盐发酵培养基(LactoseBileFermentBroth)是一种用于微生物学检测的培养基,主要用于检测和分离大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌。以下是其主要特点和用途:1.**成分**:通常包含蛋白胨、乳糖、牛胆盐和溴甲酚紫等。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作为可发酵的糖类,牛胆盐用于抑制革兰氏阳性细菌的生长,溴甲酚紫作为pH指示剂,酸性时呈黄色,碱性时呈紫色。2.**pH值**:一般调节至7.4±0.2(25℃)。3.**用途**:用于多管发酵法测定药品、食品、饮用矿泉水、一次性使用卫生用品中大肠菌群的存在。4.**检验原理**:大肠菌群能够发酵乳糖产生酸性物质,导致培养基颜色变化,并且可能产生气体。5.**使用方法**:称取适量的培养基粉末,加入蒸馏水或去离子水,加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。然后,将样品接种到培养基中,进行培养并观察结果。6.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌,来验证培养基的选择性和生长促进效果。7.**储存条件**:通常需要在避光、干燥的环境中储存,并在用后立即旋紧瓶盖,以保持其稳定性。去氧胆酸盐琼脂培养基通常被用于分离和鉴定肠道细菌,尤其是肠杆菌科的细菌。
乳糖蛋白胨培养液(LactosePeptoneBroth)是一种用于微生物学检验的培养基,主要用于水中大肠菌群的测定,符合GB(中国国家标准)的要求。以下是其主要特点和相关信息:1.**成分**:通常包含蛋白胨、牛肉膏粉、乳糖、氯化钠和溴甲酚紫等。蛋白胨和牛肉膏粉提供碳氮源及矿物质;乳糖作为可发酵的糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;溴甲酚紫作为pH指示剂,酸性时呈黄色,碱性时呈紫色。2.**检验原理**:乳糖蛋白胨培养液中的乳糖是大肠菌群可发酵的糖类,发酵后产生酸性物质,导致溴甲酚紫颜色变化,从而可以观察到产酸现象。同时,某些菌种如大肠杆菌还能产生气体。3.**使用方法**:称取适量的培养基粉末,加入蒸馏水或去离子水,加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。然后,将处理好的水样接种到培养基中,进行培养并观察结果。4.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌ATCC25922和鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028,进行培养并观察结果。大肠埃希氏菌应表现出良好的生长,产酸产气;而鼠伤寒沙门氏菌则不产酸不产气。5.**储存条件**:应贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期通常为三年。DC培养基主要用于分离大肠杆菌等肠道革兰氏阴性细菌,因为这些细菌对去氧胆酸盐的敏感性较低。改良Thayer-Martin选择性琼脂预装培养皿
未来研究将进一步探索改良Letheen琼脂培养基在研究领域的优越性能,以及在微生物学实验设计中的灵活性。亚硫酸铋琼脂培养皿
强化梭菌培养基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一种专门用于培养梭菌属(Clostridium)细菌的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:RCM培养基包含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化钠、醋酸钠和L-半胱氨酸盐酸盐等,这些成分为梭菌提供碳源、氮源、维生素和生长因子。2.**pH值**:培养基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),为梭菌提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培养和计数,特别适用于厌氧条件下梭菌的培养。4.**抑制作用**:醋酸钠成分有助于抑制革兰氏阴性菌和一些非目标细菌的生长,使得RCM培养基更适合梭菌属细菌的选择性培养。5.**稳定性**:微量琼脂(0.5g/L)的添加增加了培养基还原环境的稳定性,有助于厌氧环境的形成,防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散。6.**生长表现**:无动力的细菌在RCM培养基中通常呈颗粒状或条状生长,便于计数;而有动力的细菌则可能呈现浑浊生长,一般不适合计数。7.**制备方法**:将RCM培养基粉末溶解于蒸馏水中,加热至完全溶解后分装,进行高压灭菌以备使用。8.**质控结果**:RCM培养基适用于生孢梭菌和产气荚膜梭菌等梭菌的生长,这些菌株在培养基中的生长情况良好。亚硫酸铋琼脂培养皿