直接免疫荧光染色法和间接免疫荧光染色法为两种主要的染色方法。间接标记是使用特异的无荧光标记的一抗和被检测的标本反应将没有结合的抗体除去,之后将荧光标记的二抗加入,使得含有荧光的抗原-抗体-抗体混合物生成。如此操作除了步骤复杂,还会将大量的时间耗费掉,因此如今这种方法基本上很少使用了。直接标记即是在标记的时候将连接着荧光素的特异性抗体加入,相对而言,此种方法比较简单,所以普遍地应用于各个实验室。对于白血病的免疫分型来说,如TdT,MPO,cCD3,cCD79a的一些胞内抗原的检测就显得尤为重要。使细胞膜通透为胞内染色的要点。细胞分析仪可以进行尽可能非侵入性的多重参数分析,即可同时获得多种信息。上海全息无标记3D显微镜供货报价
流式细胞仪测定CD34、HLA-DR、CD33等细胞表面标志物,成为干细胞移植技术重要的监测手段。用流式细胞仪检测一系列指标观察病人的恢复状态,可以对预后做出早期的判断。阵发性睡眠性血红蛋白尿的诊断:根据CD59表达将阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)病人分为三型,研究证明不同亚型对补体的敏感程度不同。特异地分析网织红细胞的CD59的表达,对于PNH的诊断及病情评估有非常重要的意义。流式细胞仪检测并计数缺乏这类膜蛋白的异常血细胞,是目前诊断PNHZ直接、Z敏感、特异性Z强且可以定量的良好手段,比传统的溶血试验具有更高的特异性和灵敏度。Agilent流式细胞仪供货公司细胞分析仪是一种光学显微照相设备,用于对单个成活的细胞进行多参数分析。
流式细胞仪的高速度:分析速度以每秒可分析的细胞数来表示。流式细胞仪是以高速度的数据处理电子系统信号,配合GX的液流控制系统,有力地保证了流式细胞仪的检测功能。流式细胞仪对细胞的检测速度一般为1000~5000个/s;而到目前为止,对细胞的标准分析速度已达到了2×104个/s,Zda分析速度可达到6×104个/s。高灵敏度:灵敏度的高低是衡量流式细胞仪检测微弱荧光信号的重要指标,一般是以能检测到单个微球上Z少标记有异硫氢酸荧光素(FITC)或藻红蛋白(PE)荧光分子数目来表示。以前,每个细胞要带有1000~3000个FITC分子才能在流式细胞仪上测量出来;目前,一个细胞上只要带600个荧光分子,甚至带100个FITC分子,即可以被检测和分选出来。
流式细胞仪的信号处理系统:荧光信号的强度表示了所测细胞核内DNA的含量及倍体,经光电倍增管接收后可转换为电信号,再通过模/数转换器,将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号。计算机把所测量到的各种信号进行处理,将分析结果显示在计算机屏幕上,也可以打印出来,或者以数据文件的形式存储在硬盘上,以备日后查询或分析。流式细胞仪还可以根据所规定的参量把指定的细胞亚群从整个群体中分选出来,以便对它们进行进一步的研究分析。细胞分析仪可分析细胞数量、活性、增殖、凋亡等多项指标。
一般来说,在进行较大或者脆弱细胞的分选时,为了得到Z佳结果,应该使用较大的喷嘴和较低的压力;在分选较小或者非脆弱细胞时,如果要增加产量,应该使用较小的喷嘴和较高的压力。细胞分析仪的特点:细胞分析仪可以对不同的单细胞悬液进行检测,而且在确保细胞数量足够的前提下,可以在短时间内获取大量的细胞,可以同时检测数百万的细胞。细胞分析仪可以对单个细胞的多种特征进行分析,对单个细胞的不同的参数进行分析,借助荧光染色的方式对单细胞受体的表达方式和DNA的含量等进行分析,实现了定量分析和定性分析的结合。细胞分析仪逐一记录细胞的每一个荧光谱,进行单元素分析和多元素分析,具有精确性和可重复性。Agilent流式细胞仪供货公司
细胞分析仪可以分析细胞分子,如分析细胞分子的来源、种类、数量等。上海全息无标记3D显微镜供货报价
近20年来,随着流式细胞仪及其检测技术的日臻完善,人们越来越致力于样品制备、细胞标记、软件开发等方面的工作,以扩大流式细胞仪的应用领域和使用效果。流式细胞仪可以分成三个基本的结构,这三个基本的结构已经形成了完善的系统,分别是光学检测系统、液流系统和数据处理系统。流式细胞仪借助了激光的原理,通过单克隆抗体和荧光染料的结合使用,并且结合了计算机技术,从而可以对单个细胞进行数据处理,通过发送参数信号的方式,确保检测效率的提升,而且激发效率和单色性可以得到保障,在统计分析的过程中,各类数据都非常的精确,在检测的过程中灵敏度和特异性都能得到保障。上海全息无标记3D显微镜供货报价