月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LaurylSulfateTryptoseBroth,简称LST)是一种选择性液体培养基,主要用于检测食品、水、奶制品中的大肠菌群和大肠埃希氏菌。它的原理和使用方法如下:1.**试验原理**:LST培养基中的胰蛋白胨提供碳源和氮源,满足细菌生长需求;氯化钠维持渗透压;乳糖作为可发酵的糖类;磷酸二氢钾和磷酸氢二钾作为pH缓冲剂;月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群细菌的生长。2.**培养基配方**:每升培养基包含胰蛋白胨20.0g、氯化钠5.0g、乳糖5.0g、磷酸二氢钾2.75g、磷酸氢二钾2.75g、月桂基硫酸钠0.1g,pH值调节至6.8±0.2(25℃)。3.**试验方法**:称取35.6克LST培养基,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到带有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**质量控制和典型特征**:在36±1℃培养48±2小时,大肠菌群、大肠杆菌和发酵乳糖的革兰氏阴性细菌产生气体,在小倒管内有气泡;其他细菌无气泡。5.**微生物灵敏度试验**:接种特定的质控菌株,如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、阴沟肠杆菌ATCC23355、大肠埃希氏菌ATCC8739、粪肠球菌ATCC29212和金黄色葡萄球菌ATCC25923,放置36±1℃需氧培养24-48小时,观察结果。胰蛋白胨琼脂培养皿是一种常用的培养基,TSA板的基本组成包括胰蛋白胨、大豆胨、琼脂以及其他辅助成分。曙红亚甲蓝琼脂(EMB)平板
强化梭菌培养基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一种专为梭菌属(Clostridium)细菌设计的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:RCM培养基富含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化钠、醋酸钠和L-半胱氨酸盐酸盐,这些成分提供碳源、氮源、维生素和生长因子,适合梭菌的生长需求。2.**pH值**:RCM培养基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),为梭菌提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培养和计数,特别适用于厌氧条件下梭菌的培养。4.**抑制作用**:醋酸钠成分有助于抑制革兰氏阴性菌的生长,使得RCM培养基更适合梭菌属细菌的选择性培养。5.**稳定性**:微量琼脂(0.5g/L)的添加增加了培养基还原环境的稳定性,有助于厌氧环境的形成,防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散。6.**生长表现**:无动力的细菌在RCM培养基中通常呈颗粒状或条状生长,便于计数;而有动力的细菌则可能呈现浑浊生长,一般不适合计数。7.**制备方法**:将RCM培养基粉末溶解于蒸馏水中,加热至完全溶解后分装,通过高压灭菌以备使用。8.**质控结果**:RCM培养基适用于生孢梭菌和产气荚膜梭菌等梭菌的生长,这些菌株在培养基中的生长情况良好。LPM琼脂预装培养皿TSA板常用于菌落计数,通过将待测样品在TSA板上均匀涂布,培养一定时间后,观察并计数产生的菌落数量。
MFC琼脂(也称为4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷琼脂,MUG琼脂)是一种用于微生物学检验的选择性培养基,主要用于大肠菌群的滤膜法检测,符合中国国家标准(GB)。其配方包含多价蛋白胨、胰蛋白胨、乳糖、酵母粉、三号胆盐、氯化钠、苯胺蓝、琼脂、玫红酸等成分,pH值调节至7.4±0.2。这种培养基通过胆盐的选择性作用抑制革兰氏阳性菌,同时利用乳糖作为可发酵的糖类,结合指示剂来检测细菌的代谢活动。MFC琼脂的检验原理是利用胰胨、多胨和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;乳糖为可发酵糖类;3号胆盐抑制革兰氏阳性菌;琼脂是培养基的凝固剂;玫红酸和苯胺蓝为pH指示剂。当细菌发酵乳糖时,会产生酸性物质,导致培养基颜色变化,从而可以观察到产酸现象。在实际应用中,MFC琼脂可以用于水质检测,特别是饮用水和水源中粪大肠菌群的测定。使用时,将培养基加热溶解,分装到试管或平皿中,高压灭菌后备用。接种样品后,在适宜的温度下培养,通过观察培养基上菌落的生长情况和颜色变化来判断是否存在大肠菌群。MFC琼脂的制备和使用应遵循相关的国家标准和实验室操作规程,以确保检测结果的准确性和可靠性。
Kovacs氏靛基质试剂是一种用于吲哚(靛基质)试验的试剂,其特点如下:1.**应用领域**:主要用于鉴定肠系细菌,如大肠杆菌等,通过检测细菌分解色氨酸生成的吲哚来进行鉴定。2.**反应原理**:某些细菌能够分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚与试剂中的对二甲氨基苯甲醛结合,形成玫瑰吲哚,产生红色化合物,从而进行显色反应。3.**操作步骤**:首先将纯培养物接种于适宜的培养基中,如色氨酸肉汤或胰蛋白水培养基,然后在36±1℃下培养24±2小时。之后加入2-4滴Kovacs试剂,混匀后立即观察或放置室温5-10分钟观察结果。4.**结果判断**:阳性反应表现为培养基上部有一红色环,而阴性反应则为黄色、桔黄色或棕色。5.**试剂盒组成**:Kovacs氏靛基质试剂盒包含溶液A,配制依据是将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入25mL浓盐酸。6.**产品规格与价格**:以青岛海博生物提供的产品为例,产品规格为5ml*2,价格为35元,保质期为一年。7.**应用范围**:除了用于病原细菌的鉴定,还可用于食品卫生检测、环境控制、食品毒性检测、水中大肠杆菌检测、食品过敏性检测、食品生产环境的清洁检测、菌落计数及控制系统。改良配方提高了培养基对特定微生物的选择性,有助于特定菌株的检测和鉴定。
大豆酪蛋白肉汤培养基(TrypticSoyBroth,TSB)是一种通用的微生物培养基,应用于细菌的培养,特别是在药品抑菌剂效力检测中用于细菌检测。以下是其特点介绍:1.**成分**:TSB培养基含有胰酪胨、大豆木瓜蛋白酶消化物、葡萄糖、磷酸氢二钾和氯化钠。胰酪胨和大豆木瓜蛋白酶消化物提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为碳源;磷酸氢二钾作为缓冲剂;氯化钠维持均衡的渗透压。2.**pH值**:TSB培养基的pH值通常调整至7.3±0.2(25℃),适合多种微生物的生长。3.**用途**:TSB培养基适用于的细菌培养,包括需氧菌和厌氧菌。它特别用于消毒剂消毒效果的测试、蜡样芽孢杆菌的多管发酵法测定、溶血性链球菌选择性增菌培养等。4.**制备方法**:将TSB培养基粉末称量后溶解于蒸馏水或去离子水中,加热煮沸以帮助溶解,然后进行高压灭菌。5.**质量控制**:在使用TSB培养基时,应进行微生物灵敏度试验,以确保培养基的质量符合标准。6.**储存条件**:TSB培养基应在干燥、避光的条件下储存,通常在室温下保存。7.**有效期**:在适当的储存条件下,TSB培养基的有效期通常为三年
NAC琼脂培养皿在微生物学实验室中使用,其制备简单,操作方便,能够有效地抑制细菌的生长。曙红亚甲蓝琼脂(EMB)平板
胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)是一种用于选择性分离培养肠道致病菌,特别是沙门氏菌和志贺氏菌的培养基。以下是DHL培养基的一些主要特点:1.**用途**:主要用于肠道致病菌的选择性分离培养,特别是沙门氏菌和志贺氏菌。2.**成分**:包含蛋白胨、牛肉浸粉、乳糖、蔗糖、去氧胆酸钠、硫代硫酸钠、柠檬酸钠、柠檬酸铁铵、中性红和琼脂,pH值控制在7.2±0.1(25℃)。3.**检验原理**:去氧胆酸钠和柠檬酸钠抑制革兰氏阳性菌及大多数大肠菌群和变形杆菌,但不影响沙门氏菌的生长;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢产生,使菌落中心呈黑色;中性红作为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为无色。4.**用法**:称取65.2g培养基,加热溶解在1000ml蒸馏水中,待冷至60℃时倾入无菌平皿,无需高压灭菌。5.**质量控制**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,例如鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028和福氏志贺氏菌CMCC(B)51572,观察其生长率和特异性反应。6.**储存条件**:贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖,保质期通常为三年。曙红亚甲蓝琼脂(EMB)平板