流式细胞仪的信号处理系统:荧光信号的强度表示了所测细胞核内DNA的含量及倍体,经光电倍增管接收后可转换为电信号,再通过模/数转换器,将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号。计算机把所测量到的各种信号进行处理,将分析结果显示在计算机屏幕上,也可以打印出来,或者以数据文件的形式存储在硬盘上,以备日后查询或分析。流式细胞仪还可以根据所规定的参量把指定的细胞亚群从整个群体中分选出来,以便对它们进行进一步的研究分析。细胞分析仪内设光源、光学透镜、光电转换器、放大器、计算机等重要部件,可逐个统计和分析每种细胞。南京实时无标记活细胞3D成像系统生产厂
往胞内导入抗体或核酸染料,然而不会对细胞骨架的完整性产生影响。并且需要对有关抗原与相应抗体的结合力和核酸与染料的结合不会受到固定和透膜的步骤的影响进行保证。一些对胞内染色适用的试剂可能对表面标记分析不适用。如果不使用EMA的方法,那么通常不能够同时进行细胞活性的检测与胞内染色,对于某些核酸染料(如DAPI、TO、AO等)为活细胞染料,固定或透膜都不需要。细胞表面染色为大多数免疫表型分析所采用的方法。由于在细胞里同时存在着很多抗原,所以,在检测细胞表面抗原时,必须对保持细胞膜的完整十分留意。南京实时无标记活细胞3D成像系统生产厂细胞分析仪具有相对于其他技术更为快速、准确、可靠的单细胞鉴别功能。
对于研究任务量较大的应用领域,可选板式自动进样器模块及时将双手解放出来,节省宝贵的人力资源,且无需增加仪器体积-CytoFLEX板式自动进样器选项能够在短短32分钟完成一块96孔板的分析,在5分钟内即可实现单管和采样板获取之间的切换,便捷的虚拟板布局,配备自定义清洗和混匀功能,可在单板上定义多种试验,可与平底、U型和V型底标准96孔板兼容。应用方案:淋巴亚群免疫功能检测;BrdU细胞增殖;CBA;DC细胞检测;CEN、CTN周期质控品DNA含量检测;CFSE细胞增殖检测。
流式细胞仪的高准确度:以前,在两个细胞间待测细胞成分存在5%以上的差异时,流式细胞仪才能检测出来;目前,两个待测细胞间细胞成分只相差1%左右时,流式细胞仪便可检测出来。例如,在检测男人和女人外周血淋巴细胞DNA含量时,只是X染色体和Y染色体DNA含量之间有所区别(大约相差约占整个细胞的2%左右),应用流式细胞仪便可以轻而易举地把男人和女人的淋巴细胞区分开并分选出来。流式细胞仪的高精度:分辨率是衡量流式细胞仪测量精确度的指标,通常用变异系数(CV)值来表示。用流式细胞仪检测某种细胞成分时,比用其他分析细胞学技术的CV值都要小得多,分辨率要高得多。众所周知,用某种仪器分析细胞时,其CV值越大,分析结果越不精确。细胞分析仪主要使用光学和电学等技术,实现对单个细胞进行详细的生理和形态特性分析。
直接免疫荧光染色法和间接免疫荧光染色法为两种主要的染色方法。间接标记是使用特异的无荧光标记的一抗和被检测的标本反应将没有结合的抗体除去,之后将荧光标记的二抗加入,使得含有荧光的抗原-抗体-抗体混合物生成。如此操作除了步骤复杂,还会将大量的时间耗费掉,因此如今这种方法基本上很少使用了。直接标记即是在标记的时候将连接着荧光素的特异性抗体加入,相对而言,此种方法比较简单,所以普遍地应用于各个实验室。对于白血病的免疫分型来说,如TdT,MPO,cCD3,cCD79a的一些胞内抗原的检测就显得尤为重要。使细胞膜通透为胞内染色的要点。细胞分析仪可以进行尽可能非侵入性的多重参数分析,即可同时获得多种信息。江苏实时无标记活细胞3D成像系统供货公司
细胞分析仪是一种高科技仪器,用于细胞学研究。南京实时无标记活细胞3D成像系统生产厂
流式细胞仪的维护保养:选择正确的荧光染料,一般原则是:低表达抗原标记高S/N(信噪比)荧光素,高表达抗原标记低S/N(信噪比)荧光素。当样品用2种以上荧光染料时,为消除干扰,需要做荧光补偿。在应用流式细胞仪软件作荧光补偿时,补偿只应用在同一个激光激发的不同荧光素之间,应避免补偿不足和过度补偿。溶液使用前,所用溶液都要进行过滤处理,以免出现沉淀物而堵塞喷嘴。流式细胞仪状态稳定后,要先排除进样针内的气泡以保证喷嘴畅通,之后再对样本进行检测。南京实时无标记活细胞3D成像系统生产厂