四硫磺酸钠亮绿培养基(TTB)基础是一种用于微生物学检验的选择性培养基,特别适用于沙门氏菌的选择性增菌培养。它遵循中国药典(ChP)标准。**成分**:该培养基的主要成分包括蛋白胨、牛胆盐、碳酸钙和硫代硫酸钠。其中,蛋白胨提供碳源、氮源和维生素以满足细菌生长的需求;碳酸钙能中和细菌产酸及吸收有毒的代谢产物;硫代硫酸钠和四硫磺酸钠结合可抑制肠道共生菌,而具有四硫磺酸钠还原酶的细菌能在此培养基中繁殖;牛胆盐和煌绿可抑制大肠群菌和其他革兰氏阳性细菌。**pH值**:培养基的pH值通常调节至8.4±0.2(25℃)。**检验原理**:蛋白胨提供细菌生长所需的营养;碳酸钙中和细菌代谢产生的酸;硫代硫酸钠在培养基中与碘和碘化钾反应形成四硫磺酸钠,抑制非目标菌;牛胆盐和煌绿抑制革兰氏阳性菌。**用法**:称取培养基46.0g,加热溶解于1000ml纯化水中,121℃高压灭菌15分钟。临用前,每1000ml培养基中加入碘试液20ml和亮绿试液10ml,混匀后分装备用。**添加剂**:每瓶培养基需配套添加碘液和0.1%煌绿水溶液。碘试液由碘6g与碘化钾5g加水20ml溶解制成。亮绿试液由亮绿0.1g加水100ml溶解制成。EMB培养基成为鉴定肠道细菌的一种常用工具,特别是在食品卫生和临床微生物学方面。6.5%氯化钠葡萄糖琼脂培养皿
木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD)是一种选择性培养基,用于沙门氏菌的选择性分离培养,以下是其特点:1.**用途**:专门用于沙门氏菌的选择性分离培养,也适用于其他肠道菌的选择性分离。2.**成分**:包含酵母浸粉、L-赖氨酸、乳糖、蔗糖、木糖、氯化钠、硫代硫酸钠、柠檬酸铁铵、去氧胆酸盐、苯酚红和琼脂,pH值控制在7.4±0.2(25℃)。3.**检验原理**:酵母浸粉提供维生素和辅助因子,木糖、乳糖和蔗糖作为可发酵碳源。赖氨酸的加入有助于鉴别沙门氏菌。沙门氏菌发酵木糖产酸,产生的脱羧酶使赖氨酸脱羧,导致pH升高。硫代硫酸钠及柠檬酸铁铵与硫化氢反应,产生黑色硫化铁,苯酚红作为pH指示剂,去氧胆酸盐抑制革兰氏阳性菌的生长。4.**用法**:称取57g培养基,溶解在1000ml蒸馏水中,不要过分加热,冷至50-55℃时倾入无菌平皿,部分开盖干燥2小时,然后盖上备用。无需高压灭菌,在24小时内使用。5.**微生物质控**:使用质控菌株进行微生物灵敏度试验,如肠炎沙门氏菌CMCC50760、大肠埃希氏菌ATCC25922、福氏志贺氏菌CMCC51572等,观察其在XLD培养基上的生长特征。R2A琼脂预装培养皿使用VRBA培养皿时,通常将待测样品涂布在培养皿表面,然后进行培养,观察并鉴定产生的菌落。
溴十六烷三甲铵琼脂基础(CetrimideAgar)是一种用于微生物学实验的培养基,具有以下特点:1.**用途**:主要用于铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)的选择性分离和培养。2.**原理**:明胶胰酶水解物提供氮源;氯化镁和硫酸钾可刺激绿色的色素的产生;溴化十六烷三甲铵作为选择性抑菌剂,对多种革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌具有抑制作用,特别是对非铜绿假单胞菌的细菌;甘油作为碳源;琼脂作为凝固剂。3.**配方**:典型的配方包括明胶胰酶水解物、氯化镁、硫酸钾、溴化十六烷三甲铵和琼脂。pH值控制在7.4±0.2(25℃)。4.**实验方法**:将培养基干粉溶解于蒸馏水中,加入甘油,煮沸使混合均匀,分装三角瓶,进行高压灭菌,冷却至45-50℃时倾入无菌平皿。5.**结果观察**:铜绿假单胞菌在该培养基上通常形成具有绿色的色素的菌落,而其他非目标细菌则受到抑制。6.**注意事项**:本培养基为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验以确保鉴定结果的准确性。7.**储存条件**:通常在干燥、避光的条件下储存,以保持其有效性。
含0.05%聚山梨酯80的pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液是一种特殊的缓冲溶液,它在普通的pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液的基础上添加了聚山梨酯80(Polysorbate80),这是一种非离子型表面活性剂。以下是这种缓冲液的一些特点:1.**表面活性剂**:添加了0.05%的聚山梨酯80,这是一种常用于医药和食品工业的乳化剂和稳定剂。2.**pH稳定性**:pH值稳定在7.0,为微生物提供适宜的酸碱环境。3.**成分**:除了普通的氯化钠、蛋白胨、磷酸盐缓冲系统外,还特别添加了聚山梨酯80。4.**用途**:这种缓冲液可能用于需要表面活性剂的特定微生物培养,例如某些需要乳化剂才能生长的微生物。5.**增加溶解性**:聚山梨酯80可以增加某些难溶物质在缓冲液中的溶解性。6.**配制方法**:配制时除了按照标准方法添加氯化钠、蛋白胨和磷酸盐外,还需精确加入0.05%的聚山梨酯80。7.**质量控制**:需要对添加聚山梨酯80后的缓冲液进行额外的质量控制,确保其稳定性和微生物培养效果。8.**储存条件**:应储存在2~25℃,避光条件下,以保持聚山梨酯80和其他成分的稳定性。假单胞菌分离琼脂培养皿被用于临床医学中的病原菌检测和分离,帮助医生诊断假单胞菌相关的疾病。
乳糖发酵培养基(LactoseFermentBroth),也称为乳糖复发酵培养基,是一种用于微生物检测的培养基,主要用于测定大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌。以下是其特点和相关信息:1.**用途**:用于大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定。2.**实验原理**:蛋白胨提供碳源和氮源以满足细菌生长的需求;乳糖作为大肠菌群可发酵的糖类;溴甲酚紫作为pH指示剂,酸性环境下呈黄色,碱性环境下呈紫色。3.**成分**:通常包含蛋白胨20.0g/L、乳糖10.0g/L、溴甲酚紫0.01g/L,pH值调节至7.4±0.1(25℃)。4.**使用方法**:称取培养基30.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装到有倒立发酵管的试管中,每管10ml,121℃高压灭菌15分钟备用。5.**质量控制**:通过接种特定的质控菌株,如大肠埃希氏菌ATCC25922、弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864、鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028和阴沟肠杆菌ATCC23355,来验证培养基的选择性和生长促进效果。6.**细菌生长特征**:不同细菌在乳糖发酵培养基上的生长特征不同,例如大肠埃希氏菌通常会产生酸性环境,使得培养基颜色变为黄色,并可能产生气体。7.**储存和运输条件**:未开盖的乳糖发酵培养基的保质期通常为6个月,需要在4-10度的条件下保存,运输时应保持常温。
接种: 使用无菌的技术在琼脂培养基表面接种待测样品,可以是从食品、水样或其他来源收集的微生物样品。6.5%氯化钠葡萄糖琼脂培养皿
大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉汤)是一种广泛应用于微生物培养的通用培养基,它具备以下特点:1.**成分**:该培养基主要由胰蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾、葡萄糖和亚硫酸铁组成,其中胰蛋白胨和大豆蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子,氯化钠维持渗透压平衡,磷酸氢二钾作为缓冲剂,葡萄糖提供碳源,亚硫酸铁则用于抑制非目标细菌的生长。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.3±0.2,以适应微生物生长的需要。3.**应用**:大豆酪蛋白肉汤培养基特别适用于沙门氏菌的前增菌培养,也适用于其他多种微生物的培养,包括需氧菌和厌氧菌。4.**使用方法**:通常按照一定的比例称取培养基粉末,溶解在蒸馏水中,经过高温灭菌后使用。例如,可以称取30.0g培养基粉末,溶解在1000mL蒸馏水中,分装后进行高压灭菌。5.**质控**:该培养基可用于微生物质控,例如接种伤寒沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌,观察其生长情况和特征性反应,如浑浊度等。6.**储存与保质期**:培养基应储存在干燥、避光的环境中,并在开封后立即封闭以保持其稳定性,通常保质期为三年。6.5%氯化钠葡萄糖琼脂培养皿