曙红亚甲蓝琼脂培养基(EosinMethyleneBlueAgar,简称EMB)是一种常用的微生物学培养基,主要用于分离和鉴定肠道致病菌,尤其是大肠杆菌。以下是EMB培养基的特点和相关信息:1.**成分**:EMB培养基通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、乳糖、亚甲蓝、曙红钠和琼脂。其中,蛋白胨和牛肉浸粉提供细菌生长所需的氮源和其他营养元素;乳糖作为可发酵的碳源;氯化钠维持渗透压;曙红钠和亚甲基蓝作为抑制剂和指示剂,能够在酸性条件下结合形成黑色沉淀;琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值一般调节至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:EMB培养基是一种弱选择性培养基,特别用于分离肠道致病菌,如大肠杆菌。它通过抑制非目标菌的生长,促进目标菌的生长,从而实现分离。4.**实验原理**:曙红钠为酸性染料,亚甲基蓝为碱性染料。细菌分解乳糖产酸时,细菌带正电荷,可以与带负电的酸性染料结合,即染上了曙红钠的颜色;如果细菌因产碱性物质较多,带负电荷时与带正电荷的碱性染料亚甲基蓝结合而使得菌落呈蓝色。细菌产酸量较大时,染料可析出结晶形成金属光泽。mTEC是指Modified Tryptone Bile X-glucuronide Medium(改良的酪蛋白胆汁X-葡糖苷酸盐培养基)。溴甲酚紫计数琼脂平板
肌醇测定培养基是一种专门用于测定食品中肌醇含量的微生物培养基,具有以下特点:1.**成分**:该培养基包含葡萄糖、柠檬酸钾、柠檬酸、磷酸二氢钾、氯化钾、硫酸镁、氯化钙、硫酸锰、多种氨基酸(如色氨酸、胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、天门冬氨酸、丙氨酸、谷氨酸、精氨酸)、维生素(如盐酸硫胺素、生物素、泛酸钙、盐酸吡哆醇)等,这些成分为微生物提供必需的生长因子和营养物质。2.**pH值**:培养基的pH值通常调节至5.2±0.2(25℃),以适应特定微生物的生长需求。3.**用途**:主要用于婴幼儿食品和乳品中肌醇的测定,符合GB5009.270-2023标准。4.**制备方法**:称取培养基粉末,加热溶解于蒸馏水中,煮沸1分钟,分装试管,每管5ml,加入标准样品或测试样品,用蒸馏水补体积至10ml,121℃高压灭菌5分钟后,迅速冷却备用。5.**质量控制**:在使用肌醇测定培养基时,应进行质量控制,确保培养基的制备和使用符合标准操作程序。6.**储存条件**:应在避光、干燥处储存,未开封保质期通常为三年赖氨酸铁琼脂(LIA)培养皿VRBA培养基提供了一种简便而有效的方法,用于选择性地富集和分离肠道细菌。
LB琼脂(Miller)是一种用于实验室的微生物培养基,特别适合于大肠杆菌(E.coli)的培养。这种培养基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化钠,以及作为凝固剂的琼脂。Miller配方的特点是含有较高的氯化钠浓度,这有助于选择性地培养某些细菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化钠(NaCl):10.0g-琼脂(Agar):15.0g**制备方法**:1.将40克LB琼脂粉末加入到1升蒸馏水中。2.加热至沸腾,同时搅拌以确保粉末完全溶解。3.在121°C下高压灭菌15分钟。4.灭菌后,冷却至50°C,然后分装到无菌培养皿中。**应用**:-适用于非选择性培养大肠杆菌菌株,用于克隆、质粒DNA制备和重组蛋白生产。-当加入适当的抗生物质时,也适合选择性培养。**特点**:-无需复杂配置,快速溶解,方便使用。-经济实惠,适合大量培养基的制备。**储存条件**:-通常建议在常温(10-30℃)下储存。LB琼脂(Miller)因其营养丰富、制备简单的应用,成为分子生物学和微生物学实验室中的标准培养基之一。在实际使用时,应严格按照产品说明书或相关标准进行操作,以确保培养效果。
亚硒酸盐胱氨酸(SC)培养基是一种选择性增菌培养基,主要用于沙门氏菌的选择性增菌培养。以下是其特点介绍:1.**成分**:SC培养基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、亚硒酸氢钠、磷酸氢二钠和L-胱氨酸。蛋白胨提供碳源和氮源,乳糖作为可发酵的糖类,亚硒酸氢钠用于抑制革兰氏阳性菌和非沙门氏菌的大多数革兰氏阴性肠道菌,磷酸氢二钠作为缓冲剂,L-胱氨酸作为还原剂。2.**检验原理**:SC培养基的设计原理在于其成分能够满足沙门氏菌生长的需求,同时抑制其他非目标细菌的生长。3.**配制方法**:SC培养基的配制方法是称取23g干粉,加入1升蒸馏水或去离子水,搅拌加热至完全溶解。配制过程中应避免高压灭菌,以免影响培养基的有效成分。4.**使用注意事项**:SC培养基比较好现配现用,或在4℃下短期保存。在室温下,尤其是夏季,培养基容易出现颜色变化,导致增菌效果减退。5.**颜色变化**:过分加热或反复加热会使培养基颜色变深,影响使用效果。因此,配制过程中只能轻微煮沸,并且要迅速用凉水冷却。6.**保存**:开封后的SC培养基比较好存放于2℃-8℃环境下,以延长使用时间。EMB培养基成为鉴定肠道细菌的一种常用工具,特别是在食品卫生和临床微生物学方面。
RV沙氏增菌肉汤(RappaportVassiliadisSalmonellaEnrichmentBroth,RVS肉汤)是一种用于沙门氏菌选择性增菌培养的培养基。它的主要特点如下:1.**成分**:RV沙氏增菌肉汤包含大豆蛋白胨、乳糖、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、孔雀石绿、氯化镁、煌绿等成分,这些成分有助于抑制其他非沙门氏菌的生长,同时促进沙门氏菌的生长。2.**用途**:主要用于沙门氏菌的选择性增菌培养,特别是在食品、水和牛奶等样品中检测沙门氏菌时。3.**配制方法**:通常需要称取一定量的干粉培养基,加入指定量的蒸馏水或去离子水,搅拌加热至完全溶解,然后进行高压灭菌。4.**培养条件**:RV沙氏增菌肉汤通常在35-37°C的温度下培养,培养时间根据实验需求而定。5.**效果**:在RV沙氏增菌肉汤中,沙门氏菌能够良好生长,而其他一些细菌则受到抑制。6.**质量控制**:使用时需要进行质量控制,确保培养基的制备和使用符合标准操作程序。7.**储存**:RV沙氏增菌肉汤的干粉形式应在干燥、避光的条件下储存,通常在4-10度的环境中保存,以保持其有效性。8.**有效期**:在适当的储存条件下,RV沙氏增菌肉汤的有效期通常为三年。EMB是Eosin Methylene Blue的缩写,这是一种含有两种染料的培养基。大豆酪蛋白琼脂培养皿
改良Letheen琼脂培养基作为科研工具,有望在微生物学研究中取得更为明显的成果。溴甲酚紫计数琼脂平板
Kovacs氏靛基质试剂是一种用于吲哚(靛基质)试验的试剂,其特点如下:1.**应用领域**:主要用于鉴定肠系细菌,如大肠杆菌等,通过检测细菌分解色氨酸生成的吲哚来进行鉴定。2.**反应原理**:某些细菌能够分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚与试剂中的对二甲氨基苯甲醛结合,形成玫瑰吲哚,产生红色化合物,从而进行显色反应。3.**操作步骤**:首先将纯培养物接种于适宜的培养基中,如色氨酸肉汤或胰蛋白水培养基,然后在36±1℃下培养24±2小时。之后加入2-4滴Kovacs试剂,混匀后立即观察或放置室温5-10分钟观察结果。4.**结果判断**:阳性反应表现为培养基上部有一红色环,而阴性反应则为黄色、桔黄色或棕色。5.**试剂盒组成**:Kovacs氏靛基质试剂盒包含溶液A,配制依据是将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入25mL浓盐酸。6.**产品规格与价格**:以青岛海博生物提供的产品为例,产品规格为5ml*2,价格为35元,保质期为一年。7.**应用范围**:除了用于病原细菌的鉴定,还可用于食品卫生检测、环境控制、食品毒性检测、水中大肠杆菌检测、食品过敏性检测、食品生产环境的清洁检测、菌落计数及控制系统。溴甲酚紫计数琼脂平板