糖原染色(过碘酸-雪夫反应)原理多糖中乙二醇基经过碘酸氧化成二醛基与无色品红结合,形成紫红色化合物。沉积于含糖原的胞浆中。结果:胞浆中出现弥散状,颗粒状,块状红色为阳性。无红色颗粒为阴性_x005f_x005f_x005f_x000c_临床意义1、正常血细胞的染色反应粒系:原粒细胞糖原含量很低,随着细胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟阶段糖原含量十分丰富。淋巴细胞:糖原常凝聚成颗粒或块状。巨核细胞-血小板系统:PAS反应呈粗大的紫色颗粒或团块。正常红系:阴性。对疾病诊断的意义白血病类型的鉴别:急性粒细胞白血病:原始粒细胞呈阴性或弱阳性反应,以弥散性为主;急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞多呈粗颗粒、块状阳性反应该依据切片厚薄、组织的类别等决定。天津哪家提供糖原染色试剂盒销售厂家
染色试剂盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),是从大肠杆菌K-12菌株分离出的一种酸性水解酶。该基因产物为β-葡萄糖苷酸酶,属水解酶类,相当稳定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物,其反应产物可用多种方法检测出来。由于绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此这个基因被普遍应用于基因调控的研究中。根据GUS基因检测所用的底物不同,可以选择三种检测方法:组织化学法、分光光度法和荧光法(灵感度为分光光度检测法较高)。其中较为常用的是组织化学法。安徽糖原染色试剂盒量大从优再糖原染色,可鉴别是糖原还是其他多糖类物质。
粘液染色法:粘液一般有以下几点特性:(1)对盐基性染料有亲合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。(2)对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。(3)遇醋酸发生沉淀,胃粘蛋白则除外。(4)溶于弱碱溶液。常用的粘液染色有以下几种:1、P.A.S染色法:操作方法同前,结果;中性粘液性物质,某些酸性粘液物质呈红色,核呈蓝色。2、AB/P.A.S染色法:该种方法的特点是能同时显示出酸性和中性粘液物质。操作方法:(1)切片常规脱蜡入水。(2)3%醋酸液洗2分钟,入1%阿利新兰醋酸液(PH2.5)10-20分钟。(3)蒸馏水洗。(4)按P.A.S染色程序。(5)苏木素淡染2-3分钟,水洗。(6)常规脱水、封片
染色流程相对简便、染液易配制的染色方法;选择染色流程简便的方法,无论对于量较多的整批次染色,还是较少量的染色均能够节省时间、更为便捷。选择染液易配制的方法,对自配染液(尤其是保存较短的染液)是较为重要的选择,不容易造成因染液配制问题而影响染色结果。如显示弹性纤维。醛品红染色法无论是从染色流程,还是染液配制都要比铁苏木精、间苯二酚碱性品红等染色方法要简单方便、省时,同时阳性着染对比度也很明显。特异性高、传统或经典的染色方法;特异、传统/经典的一些染色法在特殊染色方法的选择中往往作为选择。如显示淀粉样物质。主要用来显示糖原和其他多糖物质,因此也称作糖原染色。
PAS染色的临床意义:1.红细胞系统:①红血病或红白血病时幼红细胞可呈阳性反应,有时阳性反应幼红细胞的百分比增高,阳性反应的程度也很强。有时红细胞也呈阳性反应。②缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血(又称地中海贫血)以及骨髓增生异常综合征时幼红细胞可呈阳性反应,有时阳性反应幼红细胞的百分比也较高。有时红细胞也可呈阳性反应。③巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血和白血病等疾病时,幼红细胞为阴性反应,有时个别幼红细胞呈阳性反应在滴加染液时,务必使染液完全覆盖组织,但不能溢出圈外,避免浪费试剂。安徽糖原染色试剂盒量大从优
利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应。天津哪家提供糖原染色试剂盒销售厂家
糖原染色试剂盒。含乙二醇基的多糖经过碘酸氧化,产生醛基,与雪夫(Schiff)试剂中无色品红结合,形成紫红色沉淀物定位于含糖原的胞浆中。该反应称为碘酸-雪夫(PAS)反应。(1)雪夫液配制:碱性品红1g溶于200ml沸水中,冷却60℃时过滤,加1mmol/L盐酸20ml,再冷却至25℃左右,加偏重亚硫酸钠(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,置暗处24h,无色即可放冰箱中保存,呈微红色,则加活性炭1~2g,吸附过滤使成无色液体,放冰箱中保存。若溶液变红,即不能再用。(2)10g/L过碘酸水溶液:过碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸馏水至10ml。天津哪家提供糖原染色试剂盒销售厂家
注意事项:染色前:①切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。②捞片时,较好一张玻片捞一个组织,组织较好位于玻片的中间,美观的同时也利于脱蜡(有时二甲苯的液面低于组织片的时候,达不到脱蜡的目的)。③石蜡切片脱蜡到水时,一定要注意组织切片脱蜡务必要彻底(脱蜡时间不能太少)以使脱蜡后的组织达到真正的“干净”。否则剩余的未脱干净的石蜡粘附在组织表面,在染色时染色液未能充分与组织接触,较终导致染色效果不佳,甚至染不上颜色。④在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸,以避免脱蜡时把标签纸也浸没,致使标签纸上的胶黏到玻片上,造成染色不佳。取材必须新鲜,这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要。浙江糖原...