qPCR法,即定量聚合酶链式反应(QuantitativePolymeraseChainReaction)法,在支原体检测中的应用主要体现在以下几个方面:
方法 |
灵敏度 |
优势 |
劣势 |
培养法 |
☆☆☆ |
ü 便捷 ü 便宜 ü 金标准 |
ü 费劳力 ü 耗时长 ü 需要特定的培养基 ü 特定支原体种类需要特定的培养基 |
DNA染色 (DAPI or Hoescht) |
☆ |
ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜 |
ü 可能难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 可能假阳性可能性 |
间接染色 |
☆☆☆ |
ü 迅速 ü 便宜 ü 易检测 |
ü 费时 ü 需要细胞系指示 |
ELISA |
☆☆ |
ü 迅速 ü 客观,易判读结果 ü 可以鉴别支原体种属 |
ü 受抗体限制 ü 价格高 |
免疫染色 |
☆☆ |
ü 迅速 ü 可检测支原体种属 ü 价格略高 |
ü 可检测的支原体种属有限 |
放射自显影 |
☆☆ |
ü 迅速 |
ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 费劳力 |
生物发光 |
☆☆ |
ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜 |
ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 |
PCR |
☆☆☆ |
ü 便宜 ü 迅速 ü 具有特异性 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA |
Real-Time PCR |
☆☆☆ |
ü 便捷 ü 迅速 ü 具有特异性 ü 结果可靠 ü 高通量 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA |
LAMP |
☆☆ |
ü 便捷 ü 无需DNA提取 ü *需10min左右的实验操作时间 ü 具有特异性 ü 高通量 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 |
细胞培养支原体污染怎么去除?南京细胞培养支原体污染
在微生物的奇妙世界里,支原体就像神秘的“精灵”一般,虽微小却有着独特的存在价值。支原体是一类极其微小的原核生物,小到常常让人难以想象它们的具体模样。没有细胞壁的它们,形态各异,有的如小巧的圆球,有的似细长的丝线,充满了变化性。这种独特的结构使得支原体在适应环境方面有着自己的“魔法”。它们存在于自然的各个角落。在土壤中,支原体或许与无数的微生物伙伴一起,默默参与着大地的生态循环;在水中,它们轻盈地游动,可能与水生生物有着微妙的联系;对于贴壁细胞,用胰酶消化后收集细胞及培养液混合样用于支原体检测。杭州支原体检测方法在生命科学的微观领域中,支原体如同隐匿的“小麻烦制造者”,悄然影响着生物体系的健康与...