Recombinant Human FAP (His Tag)

pA-Tn5转座酶是通过将ProteinA与Tn5转座酶进行融合来构建的。ProteinA是一种来源于金黄色葡萄球菌的蛋白质，它具有高亲和力结合大多数哺乳动物IgG抗体的Fc片段的能力。Tn5转座酶是一种能够识别特定DNA序列并在基因组上进行“剪切-粘贴”或“复制-粘贴”的酶。融合ProteinA的目的是为了在实验中实现对特定蛋白质的靶向。下面是pA-Tn5转座酶融合的一般步骤：1.**基因克隆**：首先，将Tn5转座酶的基因和ProteinA的基因克隆到一个表达载体中。这通常涉及到分子克隆技术，如PCR扩增、限制性内切酶消化和连接酶连接。2.**融合蛋白设计**：设计一个融合蛋白，其中ProteinA的基因序列和Tn5转座酶的基因序列通过一个短的连接肽（LinkerPeptide）相连。这个连接肽通常包含几个氨基酸残基，以确保两个蛋白部分在融合后仍能保持各自的构象和功能。3.**表达载体构建**：将融合基因插入到适合的表达载体中，这个载体应该包含适当的启动子、标记基因（如抗性基因）和终止子，以确保融合蛋白在宿主细胞中得到高效表达。4.**宿主细胞表达**：将构建好的表达载体转化到宿主细胞（如大肠杆菌）中，通过诱导表达融合蛋白。酵母重组表达N-糖苷酶F，是一种利用酵母作为宿主细胞，通过基因工程技术表达特定酶的过程。Recombinant Human FAP (His Tag)

T4UvsX重组酶的保存和纯化是实验室工作流程中的重要环节，确保了酶的稳定性和活性。以下是根据搜索结果提供的信息：保存条件：-T4UvsX重组酶通常在-20°C的条件下保存，可以保持3年的有效期。-某些产品说明中提到，该制品不含甘油，可用于建立冻干体系，这可能对长期保存和运输有额外的好处。-建议避免反复冻融，因为这可能会影响酶的活性。纯化过程：-T4UvsX重组酶是由大肠杆菌表达和纯化的。这意味着科学家首先将T4噬菌体的uvsX基因克隆到适合在大肠杆菌中表达的质粒载体中。-然后将这个质粒转化到大肠杆菌宿主细胞中，使其表达T4UvsX蛋白。-接下来，通过一系列生化步骤从大肠杆菌细胞中提取和纯化T4UvsX蛋白，这些步骤可能包括细胞裂解、离心、层析等技术。注意事项：-T4UvsX重组酶的保存液中甘油含量为20%，建议单独分装保存，以避免反复冻融。-该酶无核酸酶活性，这表明它在催化反应时不会切割DNA链，而是促进DNA链的重组。-本产品供科研用途，不应用于临床诊断。应用：-T4UvsX重组酶主要用于等温扩增技术，如重组酶聚合酶扩增（RPA），这是一种快速、灵敏的核酸检测技术。通过遵循这些保存和纯化指南，研究人员可以确保T4UvsX重组酶在实验中的有效性和可靠性。Recombinant Human SPARC(BM-40)Cas9 NLS与CRISPR/Cas9系统中的gRNA兼容，可以进行位点特异性的DNA切割 。

dGTPSolution（脱氧鸟苷三磷酸溶液）在分子克隆中扮演着重要角色，主要应用包括但不限于以下几个方面：1.**DNA合成**：dGTP作为DNA聚合酶的底物之一，在分子克隆中用于合成新的DNA链，特别是在PCR扩增和cDNA合成中。2.**PCR扩增**：在常规PCR和高保真PCR中，dGTP提供必要的核苷酸，以确保目标DNA片段的准确复制。3.**cDNA合成**：在从mRNA模板合成cDNA的过程中，dGTP是合成互补DNA链的关键成分。4.**DNA测序**：dGTP也用于Sanger测序等DNA测序技术中，帮助合成测序反应中的DNA链。5.**质粒构建**：在质粒或其他载体的构建过程中，dGTP可能用于填补缺口或连接DNA片段。6.**引物延伸**：在引物延伸反应中，dGTP用于延伸引物，以合成完整的DNA链。7.**DNA标记**：dGTP可以用于DNA片段的标记，便于后续的克隆和检测。dGTPSolution通常以100mM的浓度提供，以便于在实验中根据需要进行稀释。在使用时，应确保产品具有高纯度、无DNase和RNase污染，以保证实验的准确性和重复性。此外，dGTPSolution应储存在-20°C的条件下，避免反复冻融，以保持其稳定性。

Blood Direct PCR Master Mix (2×)的组分通常包括以下几类：高保真DNA聚合酶：例如，NEB的Q5 Blood Direct 2X Master Mix中包含的Q5 Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase，这是一种热稳定性DNA聚合酶，具有3'→5'核酸外切酶活性，并与Sso7d结构域融合以增强过程性3940。dNTPs：提供DNA合成所需的四种脱氧核苷三磷酸。优化的缓冲体系：包含适合于血液样本PCR扩增的pH和离子强度，以及能够抵抗血液样本中抑制剂的特殊成分。稳定剂：保证预混合溶液在储存和使用过程中的稳定性。抗抑制剂成分：一些Blood Direct PCR Master Mix含有能够抵抗血液样本中可能存在的PCR抑制剂的成分。可选的染料：某些产品可能含有用于电泳的染料，允许PCR产物直接上样进行电泳分析，无需额外的上样缓冲液。其他可选组分：根据需要，可能包括MgCl2、EDTA、DMSO等，用于优化特定样本或反应条件42。由于Cas9 NLS系统不涉及DNA的整合，因此降低了外源DNA整合至细胞基因组的风险 。

pA-Tn5转座酶是一种经过改造的高活性Tn5转座酶，与ProteinA融合，形成一种新型融合酶，应用于CUT&Tag技术中，用于研究蛋白质与基因组DNA的相互作用。这种融合酶具备以下特点：1.**高活性**：pA-Tn5转座酶是超高活性的突变形式，体外转座效率比野生型高1000倍。2.**ProteinA融合**：pA-Tn5转座酶的N端结构域为ProteinA的一部分，可以与免疫球蛋白的Fc区相互作用，特别是与大多数哺乳动物的IgG结合。3.**Tn5转座酶活性**：C端结构域为Tn5转座酶，能够特异性识别转座子两端反向重复的ME序列(MosaicEnd)，并在形成转座复合体后随机插入靶DNA中。4.**应用广**：适用于CUT&Tag技术、高通量测序建库、ATAC-seq等，特别适用于早期胚胎发育、干细胞、以及表观遗传学等研究领域。5.**操作简便**：pA-Tn5转座酶的使用简化了实验步骤，可以在一步反应中实现DNA片段化和接头连接，从细胞到二代测序文库的转化过程需9小时。6.**低细胞投入量**：CUT&Tag技术允许从低至60个细胞的样本中获得结果，甚至可以应用于单细胞水平的研究。7.**高质量结果**：pA-Tn5转座酶的使用可以保证DNA片段化，同时获得的蛋白纯度高、核酸残留低。泛素-蛋白酶体途径在调控多种细胞过程中的关键作用，靶向这一途径的药物开发已成为预防某些疾病的新策略。Recombinant Human CD94 (His-Avi Tag)

将合成的gRNA与Cas9 NLS蛋白混合，形成复合物。由于Cas9 NLS蛋白两端都有NLS，有助于复合物快速进入细胞核。Recombinant Human FAP (His Tag)

1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)主要用于从RNA模板合成链cDNA，而不是直接用于线性RNA的放大。然而，合成的cDNA可以作为模板用于后续的线性RNA放大过程，这通常涉及以下几个步骤：1.**cDNA合成**：使用1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)按照试剂盒的说明进行操作，从线性RNA模板合成链cDNA。2.**第二链cDNA合成**：在某些情况下，可能需要合成双链cDNA。这可以通过使用DNA聚合酶和第二链合成试剂来完成，从而获得完整的双链cDNA。3.**线性RNA放大**：一旦获得了cDNA，可以使用体外转录(IVT,InVitroTranscription)技术来放大RNA。这通常涉及以下步骤：-使用含有RNA聚合酶启动子序列的特定引物对cDNA进行PCR扩增。-使用含有RNA聚合酶识别位点的引物进行体外转录反应，以合成大量RNA拷贝。4.**RNA纯化**：体外转录产生的RNA需要通过适当的方法（如柱层析或沉淀）进行纯化，以去除DNA模板、未反应的核苷酸和其他杂质。5.**RNA质量检测**：使用凝胶电泳或生物分析仪检测RNA的质量和大小，确保RNA的完整性和纯度。Recombinant Human FAP (His Tag)