常用培养基的制备及注意事项一、实验目的了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用较普遍和较普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的较基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。制备培养基的操作要点：半固体培养基如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中，就制成了半固体培养基。四川培养基制备器定制
培养基的验收：购买的培养基到货后，应有专人做好培养基接受和培养基验收工作，应仔细核对生产企业提供的关于培养基资料、培养基名称、规格数量、外观特征、批号、保质期是否符合要求。每批培养基到货物后都应对培养基的质量进行检测，满足检测方法规定的要求后方可投入使用。培养基是液体、半固体或固体形式的，含天然或合成成分，用于保证微生物繁殖或保持其活力的物质。保存是否得当、配制使用是否正确等都直接影响到检测结果的准确性。触摸屏培养基制备器品牌培养基制备器系统自动调整供给样品剂量保证了重现性结果。
调pH：虽然培养基中含有缓冲物质成分，能使培养基的pH尽可能的保持在要求的范围内，但是配出的培养基若不符合要求，就要进行必要的调整。如果有已校准pH计，可用pH计。如果没有，可用精密的pH试纸，再根据需要用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸（微调可用0.1mol/L氢氧化钠或0.1mol/L盐酸）调制所需的pH。培养基的pH一般为7.4~7.6，也有酸性或碱性的。用氢氧化钠调整的需要高压灭菌的培养基，在调整pH时要调至高出所需0.1个~0.2个单位，因用氢氧化钠提哦啊正时，高压灭菌后，培养基大的pH要降低0.1~0.2。如培养基中含有碳酸钙成分，可不调pH。
血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理：血清中沉淀物的出现有许多种原因，但好普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成的，而血纤维蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血渭解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物并不影响血清本身的质量。若想去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。何谓热灭活：一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清，因为此加热步骤可以使补体去活化，而补体所参与的反应有：溶细胞活性，平滑肌的收缩，肥大细胞和血小板组胺的释放，增强吞噬作用，淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和启动。培养基制备器负载的压力，有效地避免了培养基过温失效和培养基中气泡的产生。空气压缩机是内置的。
简单制作培养基，需要完成以下几个主要步骤：简单制作培养基，必须将其过滤并澄清液体介质必须完全澄清，普通液体介质可用滤纸过滤，滤纸应折成折扇状或漏斗状，以免滤纸因水力不均而破裂。当温度较高时，培养基可以用干净的白天鹅绒过滤。新制肉、肝、血、马铃薯等滤液，必须用丝绒布过滤，再用滤纸一次又一次地过滤。若过滤方法不能满足澄清的要求，则应采用蛋清过滤。需要对介质分类处理，按培养基及试管内其它烧瓶使用的容器、用途分为适当。货运量超过每2个集装箱3个容量包装的要求。封堵也是容器外包，可用防水防潮纸塞纸封堵容器内棉。电动式装配机采用定量很好的重用或半自动解。预处理和预处理对灭菌容器的清洗要干燥，灭菌时要彻底，培养基要干燥。一只小玻璃瓶批培养基被检测出，培养基被一批pH批作为该值基准时，应被分成20mL的培养基进行消毒处理。一般液体培养基可用滤纸过滤法，滤纸应拆叠成折扇成漏斗形，以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。触摸屏培养基制备器品牌
培养基的过滤澄清液体培养基必须澄清，琼脂培养基也应透明无明显沉淀。四川培养基制备器定制
配制培养基的原则：灭菌处理：为了避免杂菌污染，获得微生物纯培养物，培养基必须及时严格灭菌。通常采用高压蒸汽灭菌。一般培养基用0.IMPa(121℃)维持15~30min即可彻底灭菌。长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏，如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。因此，含糖培养基常用0.05MPa(110℃)灭菌20~30min某些对糖类要求更高的培养基，可先将糖过滤除菌或间歇灭菌，再与其他已灭菌的成分混合。长时间高温灭菌也会使磷酸盐、碳酸盐与钙、镁铁等阳离子形成难溶性化合物而产生沉淀。为了防止这类沉淀发生，可将这些物质分别灭菌，冷却后再混合；也可在培养基中加入少量整合剂(0.01%乙二胺四乙酸，即EDTA)使金属离子形成可溶性络合物，防止沉淀的产生。高压蒸汽灭菌一般使培养基pH降低，应在配制培养基时加以调节。四川培养基制备器定制
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