Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一种独特的酶,可在铰链区域下方的特定位点消化IgG,产生均匀的F(ab')2和Fc/2片段。除IgG外,没有其他底物是已知的。IgG在30分钟内消化,如果孵育时间延长,则不存在过度消化的风险。由于FabRICATOR在生理反应条件下消化IgG,因此保留了免疫反应性。在37°C下获得良好的活性,但也可以在室温下使用较长的反应时间进行消解。FabRICATOR可消化人类的所有亚类以及猴子、兔子和绵羊IgG的某些亚类。它对小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-为了消化这些抗体物种,我们建议使用FabRICATORZ。FabRICATOR是从化脓性链球菌克隆而来的,并在大肠杆菌中表达。该酶含有His标签,分子量为37725Da。FabRICATOR是IdeS的重组修饰形式,由GenovisAB开发,用于需要高标准和一致性的生物技术应用。有一种检测FabRICATOR酶的方法。了解有关山羊多克隆抗体Anti-FabRICATOR的更多信息。可用于抗体高阶结构(HOS)结晶和NMR研究、双抗或多抗的表征、单价结合研究或完整Fc聚糖分析。河北FabRICATOR ZIdeS蛋白酶IgG特异性蛋白酶
抗体由于其大小和复杂性,是一种难以表征的分子。偶联药物有效载荷是对抗Ai症等疾病的一种有吸引力的方法,但进一步增加了异质性的复杂性和风险。抗体药物偶联物 (ADC) 需要像任何其他基于 IgG 的生物制药一样进行仔细和详细的表征,并且需要适当的分析工作流程。Genovis的FabRICATOR(IdeS)酶将ADC消化成其亚基,可以详细表征这类复杂的药物。Genovis的内切糖苷酶 IgGZERO和 GlycINATOR 还可以研究完整的 ADC,但降低复杂性并提高分辨率。江西GlySERIASIdeS蛋白酶IgG特异性蛋白酶Genovis的IgASAP 是 IgA 消化酶家族。IgASAP Sub1 是一种 IgA1 特异性酶。
抗体 Fc 糖基化谱是一种重要的 CQA,因为它会影响疗效、和免疫原性。因此,需要从早期开发、工艺开发到质量控制和批量放行的整个过程对Fc聚糖谱进行监测。传统的分析方法基于对游离的聚糖进行荧光标记,然后通过HILIC-HPLC或CE进行分析,这需要多步骤的样品制备方案,这需要大量的时间和资源。使用Genovis的FabRICATOR MagIC酶解mAb,然后使用LC-MS进行中级分析,为Fc聚糖分析提供了一种快速、直接的替代方法。如上所示,它很容易实现自动化,以提高通量并降低处理错误的风险。
与IdeS不同,为了获得更均匀的度拉糖肽融合蛋白的消化产物,用Genovis的GlySERIAS固定化蛋白质消化该蛋白质,该蛋白由与琼脂糖珠共价偶联的GlySERIAS酶组成。通过将酶偶联到树脂上,可以增加酶与蛋白质的比率,从而可以进一步加速反应,以获得更完整的连接子消化。此外,该酶不会存在于样品制备中,可能会干扰样品分析。为了进行比较,度拉糖肽在37°C下用GlySERIAS固定化过夜,或用GlySERIAS冻干1小时并在37°C下过夜消化。 为了降低样品复杂性,使用内切糖苷酶GlycINATOR冻干去除Fc聚糖,并减少链间二硫键。通过反相LC-MS对样品的分析表明,GlySERIAS Immobilized几乎完全消化了Fc结构域中的连接子,留下了接近均质的Fc/2产物,其中含有来自连接子的一个丝氨酸残基。用 GlySERIAS 冻干 1 小时或过夜消化,两者都会产生几种 Fc 产物,并附着不同数量的丝氨酸和甘氨酸残基。GLP-1肽在所有三个样品中以两种变体存在。使用GlySERIAS固定化消化的均质Fc/2能够详细研究特定于Fc区域的质量属性。此外,在样品中未观察到干扰分析的酶峰。作为补充,Fc/2 产物在用 GlySERIAS 冻干消化后残留部分连接子,有助于研究位于 GS 连接子的修饰。用于抗体疗法(如mAb、ADC和Fc融合蛋白)的表征、质量控制、生产监测。
其他基于 IgG 的生物制药需要仔细表征和监测关键质量属性,例如氧化、糖基化和其他翻译后修饰。与抗体的克隆选择、工艺开发和稳定性研究相关的大量样品通常通过液相色谱质谱 (LC-MS) 进行分析。然而,在LC-MS之前进行足够规模的样品制备通常具有挑战性。为了解决样品制备的挑战,Genovis将半胱氨酸蛋白酶FabRICATOR(IdeS)固定在磁性琼脂糖珠上,现在称为FabRICATOR MagIC。FabRICATOR固定在磁珠上,可同时快速自动消化多种抗体,促进中级表征工作流程。Genovis的FabRICATOR MagIC 如何以较少的用户交互减少实验和操作时间,降低样品处理错误的风险,同时提高通量。为了降低度拉糖肽复杂性,使用GlycINATOR Lyophilized去除Fc聚糖,并用DTT还原链间二硫键。北京FabRICATOR ZIdeS蛋白酶蛋白组学
例如氧化、糖基化等翻译后修饰,可以用IdeS酶。河北FabRICATOR ZIdeS蛋白酶IgG特异性蛋白酶
抗体的氧化是可能影响抗体功能的关键质量属性,需要密切定量和表征。它可能导致mAb的体内半衰期、功效和稳定性降低。Genovis的FabRICATOR(IdeS)消化产生的抗体亚基是研究抗体氧化的理想选择。酶解的稳健性允许在受监管的环境中监测抗体亚基氧化。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一种IgG特异性半胱氨酸蛋白酶,可消化铰链下方单个氨基酸位点的抗体,产生均质的F(ab')2和Fc片段。该酶用于基于抗体的疗法(如mAb、ADC、生物类似药和Fc融合蛋白)的表征、质量控制、稳定性测试、生产监测和克隆选择。高度特异性-铰链下方的一个消化位点快速–在30分钟内生成均匀的片段池实现基于抗体的生物zhiliao药物的表征和质量控制可固定在即用型离心柱中河北FabRICATOR ZIdeS蛋白酶IgG特异性蛋白酶
一些应用(如结合研究)具有高度灵敏度,因此在制备中需要不含残留酶的纯抗体片段。因此,Genovis的...
【详情】为了让所有实验室都能同时快速自动消化多种抗体,Genovis的FabRICATORMagIC的设计具...
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【详情】Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一种独特的酶,可在铰链区域下方的特定位点消化IgG...
【详情】与IdeS不同。Genovis的IgASAPSub1是一种IgA1特异性酶,可在铰链上方的一个特定位...
【详情】用于IgA1和IgA2m1以上铰链消化的冻干酶。与IdeS不同,Genovis提供的IgASAPSu...
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