为什么要使用荧光染料?虽然不同的染色技术(即考马斯染色、银染色、荧光染色)可用于可视化凝胶电泳分离的蛋白质,但使用荧光染料具有其独特的优势。他们提供:高灵敏度:对于大多数分析物,荧光测量的灵敏度比吸光度测量高1000倍,即使在使用小样本时也可以令人满意地达到ppt(万亿分之一)的检测限。宽线性动态范围。输出与样品浓度成正比。低干扰:由于吸收光的材料数量众多,分光光度测量通常会遇到干扰问题。在进行荧光测量时不会遇到这个问题,因为只有少数材料具有荧光能力。高通量:荧光测量具有简单而强大的协议,并且可以自动化用于高通量应用。Cy3染料的激发峰和发射峰分别在550 nm和570 nm左右。新疆成都荧光染料
荧光染料,由于灵敏度高,操作方便,逐渐取代了放射性同位素作为检测标记,其广泛应用于荧光免疫,荧光探针,细胞染色等。包括特异性的DNA染色,用于染色体分析、细胞周期、细胞凋亡等相关研究。另有很多核酸染料在多色染色系统中是非常有用的复染剂,可作为背景对照,标记细胞核使细胞内结构的空间关系一目了然。荧光标记的单克隆抗体技术为流式细胞仪在研究细胞膜和细胞内各种功能性抗原、**基因蛋白等领域扩展了无限的应用空间。荧光探针可以通过蛋白质交联剂共价结合在单克隆抗体上。免疫荧光标记**常用的染料有异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)、藻红蛋白(PE)以及AlexaFluor系列染料等。核酸荧光染料对细胞核染色后定量测量细胞所发出的荧光强度,就可以确定细胞核中DNA、RNA的含量,并可以对细胞周期和细胞的增殖状况进行分析。有多种荧光染料可以对细胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。新疆成都荧光染料荧光染料可以单独使用,也可以组合成复合荧光染料使用。
使用萤火虫荧光素酶(Fluc)作为报告基因和 D-荧光素作为底物的生物发光成像(BLI)是目前应用*****的技术。将总信号强度相对于 D-荧光素注射后的时间进行绘制,以生成时间-强度曲线。除了峰值信号外,还确定注射 D-荧光素后固定时间点(5、10、15 和 20 分钟)的信号作为峰值信号的替代。给定时间-强度曲线中的信号针对曲线中的峰值信号进行归一化,以表示 D-荧光素注射后时间变化的模式[3]。每克体重注射 10 μL D-荧光素(腹膜内或静脉注射)储备液:对于 20 g 小鼠,标准 150 mg/kg 注射通常约为 200 μL。在室温下解冻 D-荧光素(钾盐或钠盐)并溶解在 dPBS(不含钙或镁)中,**终浓度为 15 mg/mL。通过吸取 5-10 mL 无菌水来预湿 0.22 μm 过滤器。
SUPERGreenI(10,000×DMSO溶液,电泳级)储存条件及注意事项4℃避光可保存12个月。本品用DMSO溶解,因DMSO的熔点是18.5℃,使用前请放置到室温充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特点●无毒性:属花菁类染料,容易生物降解,无致*毒性。●灵敏度高:至少可检出20pgDNA,高于EB染色法25~100倍。●信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。●操作简单:无须脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观察。●适用范围广:可适用于多种凝胶电泳方法:琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳、脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳等。●使用方便:对分子生物学中常用的酶(如:Taq酶、反转录酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。●经济:价格比银染便宜。Super Flour 系列在生物荧光领域已逐渐替代FITC,Cy3, Cy5, Cy5.5, Cy7等荧光染料。
藻红蛋白-藻红蛋白(PE)是一种红色蛋白色素复合物,属于藻胆蛋白家族。它可以在红藻和隐植物中找到,它作为叶绿素色素的附属物。在生物科学中,荧光团可以与蛋白质结合,例如用于抗原检测的抗体等,因为它能够发出明亮的荧光。由于荧光团往往会很快发生光漂白,因此很少在荧光显微镜中使用。它经常用于流式细胞术。※别藻蓝蛋白(APC)-与藻红蛋白一样,别藻蓝蛋白也属于藻胆蛋白家族,是从红藻中分离出来的。在594和633nm的激光线激发下,荧光团的比较大吸光度在650nm处,而荧光发射峰在66nm处。与荧光素偶联物相比,荧光团的灵敏度已显示高5至10倍,并具有许多其他有益特性,包括大斯托克斯位移、高水溶性、长波长发射和耐猝灭。虽然别藻蓝蛋白通常不用于需要光稳定性的应用,但它***用于流式细胞术、ELISA、微阵列等过程以及各种依赖高灵敏度的应用。吲哚菁绿的主要作用之一是在医学影像学中作为造影剂。新疆成都荧光染料
Super Fluor 555(效果同Alexa Fluor 555)琥珀酰亚胺酯荧光染料。新疆成都荧光染料
管可用于实验室的荧光团数量众多,但这些染料通常属于以下三组之一:荧光染料:这些是用于在体外标记生物相关分子的小型有机天然或合成荧光分子。该组中的一些荧光染料包括荧光素、溴化乙锭和花青。荧光蛋白:这些是较大的、生物制造的蛋白质,由于它们的大分子结构而发出荧光。GFP、RFP和YFP是属于该组的一些染料。量子点:这些高荧光合成纳米晶体由半导体材料制成。随着荧光基本特性的广泛应用和该领域的显着进步,已经针对特定应用和仪器开发和优化了数百种活性荧光染料。同样,多年来,大量复杂的荧光技术(例如,FRET、TRF、FP、FRAP、FACS、FCS)也在不断发展。新疆成都荧光染料