细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史,细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份,参与细胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液,前者缓冲能力较弱,适合于密闭培养;后者缓冲能力较强,适合于5%CO2的培养条件。表1-1几种常用的BSS配方。M199全称Medium 199,广泛应用于各种动物细胞的培养,包括一些非哺乳类动物细胞。贵州医疗细胞培养基批发厂
Dulbecco’s改良培养基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培养基的基础上研制的,与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素的含量增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及**酸钠。DMEM培养基初设计葡萄糖含量为1000mg/L(低糖型),后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L(高糖型),现已广泛应用于各种细胞的培养。HEPES是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围,可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类***(特别是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的细胞时(如乳腺组织),较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。 云南RPMI-1640细胞培养基厂家直销MEM培养基含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素,主用于贴壁细胞培养,修改后也可用于其他细胞培养。
Ham’sF-12K培养基是Ham’sF-12营养混合物的Kaighn’s改进型,在Ham’sF-12的基础上提高了氨基酸和**酸的浓度,降低了葡萄糖的用量,并修改了盐的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培养基**初设计用于培养原代人肝细胞以及分化的大鼠和鸡的细胞。针对***的细胞培养应用,我们提供多种组分的Ham’sF-12K改良培养基。葡萄糖可以根据研究需要,随意调节葡萄糖的浓度,方便快捷。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产,例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。HEPES是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围,可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。
RPMI-1640细胞培养基是改进型的McCoy‘s5A培养基,使用碳酸氢盐缓冲系统,与大多数哺乳动物细胞培养基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培养基常初是为淋巴细胞培养专门设计的,现在已广泛应用于各种正常细胞和ai细胞的培养,包括HeLa细胞、Jurkat细胞、MCF-7细胞、PC12细胞、PBMC细胞、星形胶质细胞和ai细胞,是使用常为广的培养基之一。
RPMI-1640细胞培养基L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养元素,但其在溶液中不稳定,会自发降解,不含L-谷氨酰胺的培养基,可以根据研究需要任意调整L-谷氨酰胺的用量,在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一种高级细胞培养添加剂,可直接替代细胞培养基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必需的一种营养素,但其在溶液中不稳定,会自发降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨对细胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的稳定,不会自发的降解。 RPMI RPMI 1640 培养基相比其他培养基之所以具有独特的效果,是因为其中含有还原剂谷胱甘肽和高浓度的维生素。
随意调节葡萄糖的浓度,方便快捷。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产,例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。HEPES是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围,可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。青霉素-链霉素混合液通常也被称为“双抗”,青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成,对革兰阳性菌特别有效;而链霉素能够与细菌核糖体30S亚单位结合,抑制细菌蛋白质的合成,对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有效,但对革兰氏阴性菌特别有效。青霉素和链霉素联合使用可以预防绝大部分的细菌污染。M199全称Medium 199,即培养基199,是Morgan等在1950年设计的,初用于鸡胚成纤维细胞的营养研究。云南RPMI-1640细胞培养基厂家直销
MEM α 培养基不含核苷和脱氧核苷的MEM α培养基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型细胞的筛选培养基。贵州医疗细胞培养基批发厂
培养液的渗透压是一个非常重要的因素,细胞通常可耐受260mOsm/kg~320mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意:向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压,特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。缓冲系统大多数细胞所需pH在-。但是,细胞培养适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH(-),而传代转化细胞系则需要偏酸pH(-)。由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2体系进行缓冲,因此,气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或培养箱空气中CO2浓度设定在5%,培养液中NaHCO3的加入量为;如果CO2浓度维持在10%,培养液中NaHCO3的加入量为。细胞培养瓶盖不应拧得太紧,以保证气体交换。HEPES是一种非离子缓冲液,在pH-范围内具有较好的缓冲能力,但是非常昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠()共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色。贵州医疗细胞培养基批发厂
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