血清培养基主要问题:血清含一些对细胞产生毒性的物质,如多胺氧化酶,能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如精胺、亚精胺)形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、细菌有毒的等都会影响细胞生长,甚至造成细胞死亡。动物个体不同,血清产地、批号不同,每批质量差异甚大,其成分不能保持一致。取材中可能带入支原体、病毒,对细胞产生潜在影响,可能导致实验失败或实验结果不可靠性。大规模生产中,血清来源越来越困难,价格昂贵,是构成动物细胞培养对生产成本的主要部分之一。全自动培养基制备分装系统:铝制表面光滑平坦;易于清洁,无孔隙和裂缝,以防培养基流进去。中国香港不锈钢内桶培养基制备器
培养基的配制:1、配料:在容器中加入少量水,按照配方称取各种药品,加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。2、溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状,加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。3、调PH:用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。4、过滤:滤纸或棉花进行过滤。5、分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。(1)三角瓶:若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角瓶,较多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。(2)试管分装:液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度。固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。6、包扎:分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。7、灭菌:按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。宁夏培养基制备器售后服务培养基制备器培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,较好一次完成,不要中断。
培养基配制方法:正确制备培养基是微生物检验的较基础步骤之一,使用脱水培养基和其他成分,尤其是含有有毒物质(如胆盐或其他选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。使用商品化脱水合成培养基制备培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配制。如重量(体积)、pH、制备日期、灭菌条件和操作步骤等。实验室使用各种基础成分制备培养基时,应按照配方准确配制,并记录相关信息,如:培养基名称和类型及试剂级别、每个成分物质含量、制造商、批号、pH、培养基体积(分装体积)、无菌措施(包括实施的方式、温度及时间)、配置日期、人员等,以便溯源。
培养基配置原则:在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时,常需在培养基中加入少量螯合剂,避免培养基中产生沉淀,常用的螯合剂为乙二胺四乙酸。还可以将含钙、镁、铁等离子的成分与磷酸盐、碳酸盐分别进行灭菌,然后再混合,避免形成沉淀;高压蒸汽灭菌后,培养基pH会发生改变(一般使pH降低),可根据所培养微生物的要求,在培养基灭菌前后加以调整。在配制培养基过程中,泡沫的存在对灭菌处理极不利,因为泡沫中的空气形成隔热层,使泡沫中微生物难以被杀死。因而有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生,或适当提高灭菌温度。培养基的分装:培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。
培养基:是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基的种类:培养基种类很多,根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基;根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基;根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等;根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、菌培养基等。使用商品化脱水合成培养基制备培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配置。中国香港不锈钢内桶培养基制备器
培养基一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。中国香港不锈钢内桶培养基制备器
培养基的实验室制备:1.过滤灭菌:过滤灭菌可以在真空负压或正压条件下进行。使用无菌设备和0.2um孔径的滤膜。将过滤装置的各个部分消毒灭菌,或使用预消毒设备。一些滤膜上附着蛋白质或其他物质()。为达到有效过滤,应事先将滤膜用无菌水润湿。2.监测:应对经湿热或过滤灭菌的培养基进行监测,尤其要对pH、色泽、灭菌效果和均匀度等指标进行监测。添加剂的制备:制备含有有毒物质(生素)时应小心操作,避免因粉末的扩散造成实验人员过敏或发生其他不良反应。采用适当的预防措施并小心按照产品使用说明操作。中国香港不锈钢内桶培养基制备器
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【详情】培养基配制--容器和水:配制培养基所用的容器不得影响培养基质量,一般为玻璃容器,培养基配制所用的容器...
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