在成功建立小鼠脑梗模型后,认知功能的检测可以通过以下方法进行: 1. 迷宫测试:这是一个常用的方法,通过让小鼠在迷宫中寻找食物,观察其寻找食物的速度和正确性,来评估其认知功能。 2. 物体识别测试:给小鼠展示两个相似的物体,观察其是否能够正确识别并记住这两个物体。 3. 社交互动测试:观察小鼠与其他小鼠的互动情况,包括是否能够正确识别其他小鼠,以及是否能够进行正常的社交行为。 这些测试可以帮助评估小鼠的认知功能,从而了解脑梗对其认知功能的影响。这种实验方法在神经科学和医学研究中被广泛应用,用于研究和理解脑梗(中风)对动物平衡和协调性的影响。上海国内脑梗MCAO模型研究方案
造模方法 颈部备皮常规消毒,取颈正中切口剪开皮肤,分离皮肤下软组织并暴露颈动脉鞘; 游离出颈总动脉1.5cm,穿线备用; 向远心端找到颈外侧动脉,游离涌现结扎,提起颈总备用线,在近心端,远心端用动脉夹夹住; 在近心端动脉夹处,用5mL注射器针头刺破血管,稍微提起动脉夹,用镊子夹住线栓,从小口插入动脉后,去掉远心端动脉夹,然后用镊子夹住线栓,线栓插入到颈内距分叉处1.8-2.0cm; 用备用线将颈总和线栓一起结扎住,*好是结扎双道,记录线栓插入时间,在将动脉夹另一边近心端颈总结扎住,去掉动脉夹; 注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。 线栓法是国内外*常用的制作脑局部缺血再灌注损伤的方法。Koizumi 于 1986 年首先报道了用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,此后 Longa等对该方法进行了改良。线栓法脑缺血模型的研究已经取得很多突破和进展,但模型制备的稳定性受很多因素的影响,如小鼠体质量、线栓的选择等。小鼠缺血再灌注损伤后脑梗死体积百分比的变化可以为研究治*脑卒中药物时间窗提供基础依据,对进一步深入研究大鼠缺血再灌注损伤模型有重要的意义。北京大小鼠脑梗MCAO模型水迷宫将动物放在一个旋转的木棒上,观察动物是否能保持平衡,以评估动物的平衡能力和协调性。
局灶性缺血模型/线栓法引起的大脑中动脉栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)由于大(小)鼠脑血管解剖结构与人类相似,大脑中动脉也是临床缺血性卒中的高发部位,同时,采用线栓法也便于观察缺血和再灌注、永jiu(持续)和短暂性损伤等多种状态,在评价药物量效关系和确认治*时间窗等方面有一定优势,因此,MCAO是目前*广为接受一种药效模型。神经元尼氏体与细胞核呈蓝紫色,背景呈浅蓝色。结果显示:假手术组海马 CA1 区神经元排列规整,神经元胞体及树突内尼氏体丰富;实验组神经元排列紊乱,并伴有细胞水肿和坏死发生,尼氏体染色较浅,模糊不清;阳性*组神经元尼氏体排列较为规整,偶见神经细胞水肿,和溶解。
实验研究的前提是选择合适的实验动物模型:大脑缺血再灌注MCAO疾病模型,创造了一个高度复制人类临床脑血管疾病的动物模型,包括了临床病人的疾病特征,这对于临床研究脑缺血的发病机制和药物筛选非常重要。狒狒和食蟹猕猴的颅神经中枢与人类非常相似,但它们价格昂贵且难以饲养。犬大脑的血管床与人类的明显不同,它有一个广*的颈内动脉和颈外动脉的吻合网络。在兔子中,大脑皮层发育不全,无法提供稳定的病理模型。目前,大鼠是*常用的实验研究动物,因为其饲养成本低,繁殖快。因此,大鼠是目前研究心血管疾病*常用的实验动物之一。在大鼠中建立的大脑缺血再灌注实验动物模型是比较好再现的,因为大鼠的繁殖特点与人类相似,CT中脑组织的病理变化与医院中观察到的临床病人非常相似。外包公司通常拥有专业的实验团队,他们具备丰富的经验和专业知识,能够确保实验的准确性和可靠性。
采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价,0分:无神经功能缺损症状;1分:出现左侧 Honer征,轻度神经功能缺损;2分:提尾对侧前肢内旋,肩内收,中度神经功能缺损;3分:向对侧转圈、向对侧倾倒,重度神经功能缺损;4分:不能自发行走,部分意识丧失。鼠侧倾倒,评分为3分。 沿脑桥上界面切断,去除嗅球,称全脑重,立即放入-20℃冰箱, 20 min 后取出,由前向后做连续冠状切片(切片厚度2 mm)。将脑切片置入0.1% TTC溶液中,后放入恒温振荡器中,37℃避光染色30 min,将脑切片取出后放入固定液中固定 24 h,取出脑片,相机拍照,用 Motic Images Plus 显微图像分析系统计算脑梗死面积和梗死体积。进栓长度过长,易造成蛛网膜下腔出血,死亡率较高、模型制备失败。北京线栓法脑梗MCAO模型水迷宫
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脑梗MCAO模型成功后,水迷宫在Morris水迷宫获得性训练、探查训练和对位训练中,各组间大鼠游泳潜伏期、游泳距离和游泳速度指标均无显*差异。对位探查训练中,与假手术组相比,模型组大鼠平台所在象限时间百分比、平台所在象限时间和进入平台所在象限次数均显*减小(P<0.05,P<0.01); 旷场试验旷场实验结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠穿越格子数显*增加(P<0.05);与模型组相比,阳性*组大鼠穿越格子数显*减少(P<0.01)。各组大鼠后肢站立次数和中*格停留时间均无显*差异。上海国内脑梗MCAO模型研究方案