异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC):FITC是应用*为***的一种荧光素,经激光激发后发出明亮的黄绿色荧光,*大发射波长为525nm。FITC的荧光强度受PH影响较大,常随着PH的降低而减弱,因此,在使用FITC时需格外注意溶液的酸碱度。a)电泳分离后的蛋白质检测(b)蛋白质和肽的微测序分析(c)使用毛细管区带电泳进行分子分析(d)生物相互作用中的分子跟踪和检测(e)细胞和组织切片中的抗原检测(f)通过标记DNA片段进行细胞凋亡检测除了因其在水中的溶解性而易于用于偶联物制备外,异硫氰酸荧光素还具有明亮的荧光(由于偶联后的大消光系数和高量子产率),使其成为许多工艺的优先染料。在流式细胞术和免疫荧光显微术中,染料与各种抗体(一抗或二抗)结合,以检查和研究IL-17免疫缺陷和CD63在肾功能中的作用等状态。作为荧光素的衍生物,异硫氰酸荧光素含有一个异硫氰酸酯反应基团,这有助于其对通常存在于生物分子中的动漫和巯基基团具有反应性。D-荧光素钾盐是荧光素酶的水溶性底物,存在于多种发光生物体中。江苏脂溶荧光染料
小动物***荧光成像技术是现***物医学研究领域的一项重要技术,因其具有操作简单、实时直观、灵敏度高、实验成本低等特点,已广泛应用于生命科学、医学研究及药物开发等方面。纳米材料在生物医学领域得到广泛应用,旨在解决传统医学面临的各种医学挑战,包括生物利用度差,靶向特异性受损,全身和***毒性等。纳米材料具有很多与众不同的优点,比如多功能性、大的负载量、靶向性、血液循环时间长等。纳米材料在生物医学中起着关键作用,可以有效携带成像探针、***剂或生物材料并传递至靶点,如特定的***、组织甚至细胞。光学成像主要包括生物发光(bioluminescenceimaging,BLI)和焚光成像(fluorescenceimaging,F1)两种技术。前者利用焚光素酶基因(如FLUC,RLUC,GLUC)标记细胞或DNA,其表达产物与莖火虫素类底物反应产生荧光。后者包括多种荧光蛋白基因(如GFP,RFP,YFP等)、有机荧光染料、荧光上转换纳米粒子、量子点等的应用。 北京荧光染料绿色异硫氰酸荧光素(FITC) 是一种有机荧光染料,目前,这种荧光染料仍用于免疫荧光和流式细胞术中。
CY7是一种CY染料。CY为花菁(Cyanine)的缩写,是由奇数个甲基单元连接的两个氮原子组成的化合物。菁类化合物具有波长长、吸收和发射可调、消光系数高的特点CY系染料常被用于蛋白、抗体以及小分子化合物的标记,对于蛋白抗体的标记,可以通过简单的混合反应来完成结合,下面我们介绍了蛋白抗体标记的标记方法,具有一定的参考意义。一、比较好蛋白制备1)为获得标记效果,请制备蛋白(抗体)浓度为2mg/mL。2)蛋白溶液的pH值为8.5±0.5。如果pH值低于8.0,应使用1M3)如果蛋白浓度低于2mg/mL,标记效率会**降低。为获得比较好标记效率,建议**终蛋白浓度范围为2-10mg/mL。4)蛋白必须在不含伯胺(如Tris或甘氨酸)的缓冲液中,和铵离子,否则会影响标记效率。2.染色制备(以CY3-NHS酯为例)将无水DMSO加入CY3-NHS酯小瓶中,制备成10mM储备液。通过移液器或涡旋混合均匀计算。使用前需先使用缩合液(500μg/mL)(HY-D0178)活化另一个可进行后续标记实验。
FITC荧光标记蛋白的应用及特点:活性荧光染料,如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、罗丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料,可用于标记抗体或蛋白质功能基团,生成分子探针,并通过荧光成像进行检测。当用荧光染料化学标记特异性抗体或其他纯化生物分子时,它们成为用于检测靶抗原或相互作用配偶体的荧光探针,用于细胞成像、流式细胞手术、蛋白质痕迹和酶联免疫吸附实验(ELISA)。由于荧光标记物具有无放射物污染、操作简单等优点,在蛋白质功能研究、药物筛选等许多研究领域得到了越来越广泛的应用。
南京星叶生物科技有限公司Super Fluor 系列(效果同Alexa Fluor系列)
且Super Fluor活化酯(与Invitrogen的Alexa Fluor活化酯完全相同) 吲哚菁绿的主要作用之一是在医学影像学中作为造影剂。
所需的CY3-NHS酯的量取决于待标记蛋白的量,以及CY3-NHS的比较好摩尔比为10。示例:假设所需的标记蛋白为500μL2mg/mLIgG(MW=150,000),用100μLDMSO溶解1mgCY3-NHS酯,得到所需的CY3-NHS酯体积为5.05μL,详细计算过程如下:1)mmol(IgG)=mg/mL(IgG)×mL(IgG)/MW(IgG)=2mg/mL×0.5mL/150,000mg/mmol=6.7×10-6mmol2)mmol(CY3-NHS酯)=mmol(IgG)×10=6.7×10-6mmol×10=6.7×10-5mmol3)uL(CY3-NHS酯)=mmol(CY3-NHS酯)×MW(CY3-NHS酯)/mg/μL(CY3-NHS酯)=6.7×10-5mmol×753.88mg/mmol/0.01mg/μL=5.05μL(CY3-NHS酯)4.运行偶联反应1)将室温新鲜制备的10mg/mLCY3-NHS酯缓慢加入到0.5mL蛋白质样品中于溶液中,轻轻摇动混匀,然后短暂离心,将样品收集于反应管底部。请勿混匀,否则2)将反应管安置避光处,在接下来的间隔轻轻蛋白水解60分钟。10-15分钟,轻轻翻转几次以充分混合5.偶联偶联物以下方案是使用SepHadexG-25柱封闭染料-偶联偶联物的范例。1)根据制造说明准备SepHadexG-25柱。2)将反应混合物(来自“Runconjugationreaction”)加载到SepHadexG-25柱的顶部。3)一旦样品在顶部树脂表面下方运行,立即添加PBS(pH7.2-7.4)。4)向所需样品添加更多PBS(pH7.2-7.4)即可完成柱密封。罗丹明123一种可对活细胞线粒体染色的细胞染色试剂。细胞荧光染料荧光素钾盐
CY5荧光染料是一种被广泛应用于生物分子检测和荧光成像等领域的高效、稳定的荧光标记试剂。江苏脂溶荧光染料
绿色荧光染料ICG的主要作用吲哚菁绿(IndocyanineGreen,简称ICG)是一种广泛应用于医学和生物领域的荧光染料。它具有独特的化学结构和性质,因此被***用于荧光显像、光热***、生物识别和药物输送等领域。吲哚菁绿的绿色溶解度是其在水中的溶解度,它是衡量该染料在溶液中的溶解能力的重要指标。吲哚菁绿具有较好的水溶性,可以在水中迅速溶解,形成稳定的溶液。这一特性使得吲哚菁绿在医学诊断和***中得到广泛应用。吲哚菁绿的主要作用之一是在医学影像学中作为造影剂。由于其具有强烈的荧光特性,能够在近红外光谱范围内吸收和发射光线,因此被***用于近红外荧光显像技术中。在临床中,医生可以通过注射吲哚菁绿溶液,利用近红外光源对患者进行显像,以观察和评估病变部位的血液灌注情况、淋巴引流途径等。这为医生提供了非侵入性、实时性的影像信息,有助于准确诊断和指导***。此外,吲哚菁绿还在光热***中发挥着重要作用。光热***是一种利用光热效应杀灭肿瘤细胞的方法。吲哚菁绿可以吸收近红外光并将其转化为热能,从而使附近的肿瘤细胞受热破坏。这项技术在*****中具有巨大潜力,因为它可以实现高度精细的***,同时比较大限度地减少对周围正常组织的损伤。江苏脂溶荧光染料