详细步骤如下:1.75%酒精浸泡大鼠尾巴30min;2.将尾巴剪开、去掉皮毛,并剪成小段(3cm左右),抽出银色的尾键;3.把剪碎的尾键置于150ml,0.1%消过毒的醋酸中,4℃放置,并不时振荡;4.48h后取上清,4000转离心30min后,取上清;5.分装上清(鼠尾胶)4度(或-20度)保存。有时可继续向4。中沉淀中加入10-20ml醋酸,重复以上步骤,以制备更多的鼠尾胶。在使用时,先将冰存的胶原液在室温下解冻,再按以下步骤包被培养器皿:1)用吸管吸取胶原液,在无菌的培养器皿的生长面内壁上均匀地涂上薄薄的一层胶原溶液。2)若包被的是培养瓶,可向培养瓶通入氨气或用浸有氨水的棉球封口片刻。让氨气充入瓶内后,即可旋紧瓶盖或塞紧瓶塞。若为培养皿或板的话,可将培养皿或板放在已消毒的饭盒内,将浸有氨水的棉球放入饭盒内,盖紧饭盒盖,四周用封口胶封死。鼠尾胶原蛋白是从老鼠尾巴提取出来的物质。徐州鼠尾胶原厂家推荐
鼠尾胶原,10mg包装,配制方法如下:1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超纯水至100ml,容量瓶配制比较准确。2.用吸管吸取10ml刚配好的0.1M乙酸溶液(不要用*加,吸十次不如加一次z准确),加入盛胶原的瓶中,轻轻颠倒,不要震荡,蛋白容易起泡。几分钟即可,蛋白质非常好溶解。3.将胶原溶液移入事先压好的玻璃瓶中,比青霉素瓶大点的就行。用*在瓶底加1ml氯仿,打到一档就行,避免加入气泡。然后4度过夜除菌。4.第二天将上层胶原溶液分装进EP管中。用封口膜封口,4度保存,勿冷冻。徐州鼠尾胶原厂家推荐鼠尾胶原蛋白的用途很普遍,可用于化妆品,工业和食品生产等领域。
鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿,培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶,模拟真实的生长环境,使细胞在三维环境中生长。1,在使用鼠胶原蛋白型包被的细胞培养皿中检查到PC-12细胞的贴壁和生长。1mg/ml浓度以上,pH左右时可形成具有一定强度的三维胶,检查到NIH-3T3细胞在三维胶内正常生长、PC-12细胞在三维胶表面正常生长。使用方法:1、细胞培养器皿的表面包被推荐浓度:1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格体积加到相应的培养器皿中。
鼠尾胶原蛋白I型,用那一种胶原酶可以溶解:1.将胶原加入到0.1M的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。5.从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。如果胶原溶液不是无菌的,这时候可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。在接种细胞前用无菌的水漂洗。结论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁。
实验应用:探讨应用鼠尾胶原在豚鼠前庭毛细胞膜片钳实验中的促进毛细胞贴壁效果。方法制作鼠尾胶原,观察全细胞膜片钳实验中,自制的鼠尾胶原对前庭毛细胞的贴壁黏附作用。结果无鼠尾胶原时,前庭毛细胞悬浮于外液,不宜封接;有鼠尾胶原时,前庭毛细胞贴附于培养皿底壁,易于封接和长时间(约8h)的观察和记录。鼠尾胶原对前庭毛细胞具有良好的贴壁黏附促进作用。结论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。成功建立了利用自制鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法,并且制作简便,成本低廉。徐州正规鼠尾胶原厂家
氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。徐州鼠尾胶原厂家推荐
胶原蛋白的功效与作用:可以预防心血管病。研究表明,胶原蛋白可以降低血甘油三酯和胆固醇,并可增高体内某些缺乏的必需微量元素,从而使其维持在一个相对正常的范围之内,是一种理想的降血脂食品。此外,胶原蛋白在协助机体排出铝质,减少铝质在体内聚集方面也有独特之处。铝对人体有害,研究表明,日前逐渐增多的老年痴呆症与铝的摄入量有关,同时胶原蛋白有加速血红蛋白和红细胞生成的功效,它具有改善循环、对、缺血性脑病有利。徐州鼠尾胶原厂家推荐
鼠尾胶原醋酸溶解:1.将鼠尾胶原加入到0.1M的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。吸去生理盐水,将尾腱称重(0.5-1克)。石家庄鼠尾胶原单价鼠尾胶原实验应用:探讨应用鼠尾胶原在豚鼠前庭毛细胞膜片钳实验中的促进毛细胞贴壁效...