将小鼠进行呼吸诱导麻醉(异氟烷)后,以仰卧位固定于操作台上,继续维持麻醉,常规消毒,备皮,取颈部正中切口,分离右侧颈部总动脉(CCA)、劲内动脉(ICA)和颈外动脉(ECA),结扎ECA远心端,在ECA起始端留置结扎线,用动脉夹将ICA远心端、CCA近心端夹闭。在ECA远心端结扎线外离断,将ECA拉至与ICA成一条直线,于结扎线近端用显微剪剪一斜口,将MACO栓线缓缓送入,栓线通过ECA近心端结扎线进入ICA后,单道结扎ECA近心端结扎线,使栓线与血管相对固定,随即松开ICA上的动脉夹,缓慢上提ECA近心端结扎线,将栓线缓慢送入,进线至线栓刻度位置。 缺血后再灌注:栓线插入40 min后拔出,随后将ECA近心端结扎线结扎,松开CCA近心端动脉夹,碘伏消毒后逐层缝合切口。当阻断血管达到120 min或更长时间时,会影响下丘脑的供血,导致自发性高热,影响实验结果。上海大小鼠脑梗MCAO模型价目表
检测方法 造模完成后等待大鼠苏醒,依据Zea longa 5分制标准筛选出2分或3分的脑缺血模型进入后续实验。0分:无神经功能缺损症状,活动正常;1分:不能伸展对侧前爪;2分:爬行时出现向左转圈;3分:行走时身体向偏瘫侧倾倒;4分:不能自发行走,意识丧失。行为学指标目前常采用跳台法、避暗法、穿梭箱法来测定动物一次性被动回避反射能力 ; Y 形水迷宫实验、Morris水迷宫实验等测定动物空间分辨学习记忆能力。研究血管性痴呆、脑卒中抑郁症等可以选择旷场试验作为行为学检测指标之一。病理检测常用HE染色观察组织水肿炎症反应等,尼氏染色可以反应神经元细胞情况。南京快速制作脑梗MCAO模型注意事项实验外包团队具有丰富的实验操作经验。他们经多年的实践积累,对实验操作过程中的环节有着深入的了解掌握。
迄今为止,缺血性脑卒中模型覆盖各种小型动物(小鼠,大鼠等)和较大型动物(兔、犬、猪、猴等),并应用于卒中治*药物的临床前药理药效研究。然而,自1970年代以来,大量在动物模型上得到验证的受试药物均未能在人体临床试验中获得理想的治*效果,可能原因包括:1)以往相对简单的动物模型不能准确模拟人类卒中的病理生理过程;2)临床前动物实验的药效评价方法尚难以成功转化到复杂的人体临床试验标准。2009年国际公认的“脑卒中治*学术工业圆桌会议”(Stroke Therapy Academic industry Roundtable,STAIR)发布了临床前缺血性脑卒中药物研发准则,提出提高临床前药理药效研究质量的具体要求。近年来随着更深入的基础研究发现,更多符合人类发病机理和病理生理过程的缺血性脑卒中动物模型已被开发。
缺血性卒中的病理生理及药物治*缺血性卒中主要诱发神经血管单元(NVU)一系列的缺血级联反应(包括兴奋性氨基酸毒性,氧(氮)化应激和缺血后炎症等),从而造成神经细胞受损甚至部分死亡细胞凋亡,*终诱发大脑功能的异常。NVU是由神经元,神经胶质细胞,血管细胞(内皮细胞、周细胞、平滑肌细胞)以及基底膜共同构成,这些细胞相互作用,共同调节营养物质在细胞间质间的流动和脑血流,维持和修复髓鞘,清*代谢产物,从而实现和维持大脑的正常功能。在缺血发生时,NVU的各部分细胞发生不同程度的损伤,诱发神经元细胞的生理生化异常。部分凋亡细胞会进展为梗死灶,而梗死灶周围受损的神经细胞虽然出现了生理生化异常和功能障碍,但尚未死亡,及时低灌注可能可以改善其损伤状况使之恢复正常。这部分及时抢救仍然可以改善其功能的神经细胞一般被称为“缺血半暗带”。小鼠脑梗MCAO的构建 —艾菱菲生物整体外包一站式科研需求。
此外,实验外包团队还具备专业的技术知识和技能。他们能够根据科研人员的具体需求,提供针对性的技术支持和解决方案。在实验过程中,他们能够及时发现并解决问题,确保实验的顺利进行。 除了技术方面的支持,实验外包团队还能够为科研人员提供其他方面的帮助。例如,他们可以帮助科研人员制定实验方案、优化实验流程、提高实验效率等。同时,他们还能够协助科研人员撰写实验报告、整理实验数据、进行数据分析等。 总之,实验外包团队在科研领域中扮演着重要的角色。他们具备较高的学历和丰富的实验操作经验,能够为科研人员提供专业的技术支持,确保实验的准确性和可靠性。在科研过程中,与实验外包团队的合作能够帮助科研人员更好地完成实验任务,提高科研成果的质量和水平。外包公司通常拥有先进的实验设备和技术,能够确保实验的顺利进行和实验结果的准确性。上海大小鼠脑梗MCAO模型价目表
中风的高发病率、残疾率和死亡率给家庭和社会带来了沉重的负担。上海大小鼠脑梗MCAO模型价目表
实验研究的前提是选择合适的实验动物模型:大脑缺血再灌注MCAO疾病模型,创造了一个高度复制人类临床脑血管疾病的动物模型,包括了临床病人的疾病特征,这对于临床研究脑缺血的发病机制和药物筛选非常重要。狒狒和食蟹猕猴的颅神经中枢与人类非常相似,但它们价格昂贵且难以饲养。犬大脑的血管床与人类的明显不同,它有一个广*的颈内动脉和颈外动脉的吻合网络。在兔子中,大脑皮层发育不全,无法提供稳定的病理模型。目前,大鼠是*常用的实验研究动物,因为其饲养成本低,繁殖快。因此,大鼠是目前研究心血管疾病*常用的实验动物之一。在大鼠中建立的大脑缺血再灌注实验动物模型是比较好再现的,因为大鼠的繁殖特点与人类相似,CT中脑组织的病理变化与医院中观察到的临床病人非常相似。上海大小鼠脑梗MCAO模型价目表