流式细胞仪的维护保养:选择正确的荧光染料,一般原则是:低表达抗原标记高S/N(信噪比)荧光素,高表达抗原标记低S/N(信噪比)荧光素。当样品用2种以上荧光染料时,为消除干扰,需要做荧光补偿。在应用流式细胞仪软件作荧光补偿时,补偿只应用在同一个激光激发的不同荧光素之间,应避免补偿不足和过度补偿。溶液使用前,所用溶液都要进行过滤处理,以免出现沉淀物而堵塞喷嘴。流式细胞仪状态稳定后,要先排除进样针内的气泡以保证喷嘴畅通,之后再对样本进行检测。细胞分析仪可以进行单个细胞的分析,支持对个体差异的分析。无锡Seahorse细胞能量代谢分析仪销售
染色待测细胞,之后将单细胞悬液制作成功。用一定压力往流动室内压入待测样品,在高压下从鞘液管喷出不含细胞的磷酸缓冲液,待测样品流与鞘液管入口方向成一定角度,如此,鞘液就可以包绕着样品高速流动,使一个圆形的流束组成,在鞘液的包被下待测细胞单行排列,依次从检测区域通过。流式细胞仪的发光源一般是激光。在样品流上垂直照射着经过聚焦整形后的光束,在激光束的照射下的被荧光染色的细胞,会有激发荧光和散射光产生。90度方向的光电倍增管和前向光电二极管同时接收这两种信号。在前向小角度进行光散射信号的检测,细胞体积的大小基本上由这种信号来反映。无锡BioTek酶标仪采购细胞分析仪的快速可视化荧光探测系统和自动计数系统可以解决大量实验样本的数据统计问题。
死细胞利用PI、7-AAD或EMA进行染色,这些染料不能够对活细胞进行染色。能够同时进行细胞表面标志和活性分析为这个方法的优势。尤其适用于高度坏死的样本。Z常用的是7-AAD,由于在488nm激发下,670nm左右为其Z大发射光,与FITC或PE进行多色标记非常适合。但是随着时间延长,在固定的细胞群体,会重新分配7-AAD,很难区分死活细胞。因此,EMA,对于染色并在固定后12小时以上分析的标本是Z好的选择。EMA与死细胞DNA稳定的共价结合使长时间固定后仍能很好地区分固定前的死活状态得以保证。
流式细胞仪的光学检测系统:流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染料染色的细胞在激光束的照射下产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测,这种信号基本上反映了细胞体积的大小;荧光信号的接收方向与激光束垂直,经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离,形成多个不同波长的荧光信号。光电倍增管接收的信号被积分放大反转换为电子信号输入电子信息接收器,传输给与流式细胞仪相连的计算机。细胞分析仪通常能够对细胞的荧光显微痕迹、单细胞形态、细胞质染色体等进行分析。
染色体分析,流式细胞仪要求:360nm或488nm光源,450nm、580nm滤光片。BrdUrd标记追踪细胞分化,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片。淋巴细胞亚群分析,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片,液量计数系统。白血病免疫分型,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。Z少三色荧光,参数越多检测越为灵敏。血小板分析,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片,液量计数系统。白血病、淋巴瘤微小残留病灶检测:①T系白血病微小残留病灶检测,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片,液量计数系统。②B系白血病微小残留病灶检测,液量计数系统,流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。Z少三色荧光,参数越多检测越为灵敏。③髓系白血病微小残留病灶检测,液量计数系统细胞分析仪主要使用光学和电学等技术,实现对单个细胞进行详细的生理和形态特性分析。细胞外囊泡分离分析系统多少钱
细胞分析仪还可以进行大规模细胞分离、定量分析等。无锡Seahorse细胞能量代谢分析仪销售
流式细胞仪是常用的细胞分析、分选的仪器,可以对处于液流中的各种荧光标记的微粒进行多参数、快速、准确的定性、定量测定。流式细胞仪选购方法是什么?明确目的:在购买流式细胞仪之前要考虑清楚自己的实验目的,流式细胞仪并不是wan能的,比如说如果想要检测亚微分辨率的微粒,一般的流式细胞仪就都不合适。就荧光检测而言,经济实惠的新型流式细胞仪在分辨模糊昏暗的细胞群体方面,不如那些贵一点的流式细胞仪,假如需要研究分析磷酸化受体和未磷酸化受体的话,可能就要重新考虑流式细胞仪的选择了。无锡Seahorse细胞能量代谢分析仪销售