免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是一种基于抗原与抗体特异性结合用于研究蛋白质与蛋白质相互作用的方法。常用于候选目标蛋白质之间是否有相互作用，也用于确定与已知蛋白质互作的其它未知蛋白质相互作用。基本原理：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。用蛋白质A的抗体免疫沉淀A，那么与A互作的蛋白质也能沉淀下来，此时获得与A互作的蛋白复合物。若已知AB互作，则用蛋白复合物进行WB实验检测B；若鉴定蛋白复合物中有哪些蛋白，则对复合物进行质谱检测。免疫共沉淀实验流程：蛋白质样本收集-A抗体沉淀目的蛋白A-SDS-PAGE分离-WB检测B蛋白或者质谱鉴定互作蛋白。Co-IP外源检测引入外源蛋白验证互作，敏感度高但需严控条件，结合内源检测更准确！陕西CoIP联合质谱
免疫共沉淀实验的注意事项主要包括以下几点：样品的准备：样品的准备是非常关键的步骤。要保证细胞处于适当的生长状态下，避免细胞过度生长或死亡。同时，要确保细胞表达所需的蛋白质，可以通过转染等方法引入外源基因。抗体的选择：抗体的选择对于免疫共沉淀实验至关重要。要确保使用的抗体特异性高，能够识别目标蛋白质，并且与其它蛋白质的交叉反应小。此外，抗体的来源和亲和性也需要考虑，以确保实验结果的可靠性和重复性。细胞裂解条件：细胞裂解采用温和的裂解条件，不能破坏细胞内存在的所有蛋白质-蛋白质相互作用。同时，裂解液中要加入各种酶抑制剂，以防止蛋白质降解。共沉淀的验证：在免疫共沉淀实验中，需要确保共沉淀的蛋白是由所加入的抗体沉淀得到的，而并非外源非特异蛋白。此外，要验证抗体的特异性，即在不表达抗原的细胞溶解物中添加抗体后不会引起共沉淀。另外，需要确定蛋白间的相互作用是发生在细胞中，而不是由于细胞的溶解才发生的，这需要进行蛋白质的定位来确定。实验的重复性：由于免疫共沉淀实验的灵敏度和特异性可能受到多种因素的影响，因此建议进行多次重复实验，以验证结果的可靠性。蛋白蛋白互作检测CoIP联合质谱检测CoIP实验需多次重复，科学设对照组，确保结果准确可靠！
免疫共沉淀实验步骤主要包括以下五个部分：样品处理：将细胞或组织样品进行裂解，得到待检测的蛋白质混合物，并加入蛋白酶抑制剂以避免目标蛋白被降解。抗体处理：将专一的抗体连接到亲和树脂上，如蛋白A的亲和树脂或蛋白G的亲和树脂，或将蛋白与其特异性抗体结合，新形成的复合物与封闭剂缓慢摇摆在二氧化硅珠上，使碘酸钙交联后节制反应。免疫共沉淀：将有抗体树脂的样品与吸附抗体树脂形成免疫复合物。洗涤：采用洗涤缓冲液对样品进行洗涤，以去除非特异性的蛋白质和杂质，同时尽量避免对复合物的影响。洗涤缓冲液选择对样品不会引起较大影响的缓冲液和洗涤剂。蛋白鉴定：将沉淀的复合物通过SDS-PAGE分离出来，并进行Western blotting检测目标蛋白及其配偶蛋白。另一方面，也可以直接使用质谱分析检测。
IP-WB（免疫沉淀-Western Blot）是一种常用的实验方法，用于验证蛋白质之间的相互作用。在IP-WB实验中，首先使用特异性抗体将目标蛋白从细胞或组织裂解液中免疫沉淀下来。这一步骤确保了只有与目标蛋白特异性结合的蛋白质被富集。随后，将免疫沉淀得到的蛋白质复合物进行SDS-PAGE凝胶电泳，使蛋白质按照分子量大小分离。接着，通过Western Blot技术，利用特异性抗体检测目标蛋白或其相互作用伙伴的存在。Western Blot利用抗体与蛋白质的特异性结合，通过显色反应可视化目标蛋白，从而实现对蛋白质相互作用的验证。IP-WB技术结合了免疫沉淀的高特异性与Western Blot的高灵敏度，能够有效地验证蛋白质之间的相互作用，并为进一步的功能研究和药物开发提供有力支持。Co-IP技术助力蛋白互作与泛素化研究，揭示生命过程奥秘！
免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，Co-IP）是一种经典的用于研究蛋白质相互作用的方法，它基于抗体和抗原之间的专一性作用。该技术主要用于确定两种蛋白质在完整细胞内的生理性相互作用。基本原理：当细胞在非变性条件下被裂解时，细胞内蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留下来。通过利用预先固化在agarose beads上的蛋白质A的抗体来免疫沉淀A蛋白，与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。随后，通过蛋白变性分离，可以对B蛋白进行检测，从而证明两者之间的相互作用。如何快速开展Co-IP实验。广东相互作用蛋白检测CoIP-mass spectrometry
免疫共沉淀法可信度高，可发现新蛋白搭档，但存局限，需结合其他方法验证。陕西CoIP联合质谱
想要快速入门Co-IP实验技术，可以遵循几个关键步骤。首先，深入理解Co-IP实验的基本原理，这是掌握技术的基石。其次，选择合适的抗体，这是实验成功的关键。同时，注意实验样本的处理，包括细胞的收集、裂解和提取，确保获得高质量的蛋白样品。在操作过程中，严格按照实验步骤进行，特别是免疫共沉淀环节，要控制好反应时间和温度，避免非特异性结合。此外，洗涤步骤也至关重要，它能有效去除杂质，提高结果的准确性。另外，对实验结果进行认真分析，结合Western Blot等技术手段，验证蛋白质间的相互作用。当然，快速入门并不意味着可以忽视细节和实验安全。在操作过程中，务必遵守实验室规章制度，确保自身和他人的安全。同时，保持耐心和细心，不断积累经验，才能更好地掌握Co-IP实验技术。陕西CoIP联合质谱
广州基云生物科技有限公司是一家有着先进的发展理念，先进的管理经验，在发展过程中不断完善自己，要求自己，不断创新，时刻准备着迎接更多挑战的活力公司，在广东省等地区的医药健康中汇聚了大量的人脉以及**，在业界也收获了很多良好的评价，这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果，这些评价对我们而言是比较好的前进动力，也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神，努力把公司发展战略推向一个新高度，在全体员工共同努力之下，全力拼搏将共同广州基云生物科技供应和您一起携手走向更好的未来，创造更有价值的产品，我们将以更好的状态，更认真的态度，更饱满的精力去创造，去拼搏，去努力，让我们一起更好更快的成长！
