培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等,有点还添加克菌素、色素、和血清。为方便长期保管,培养基的成分均制成粉末状。使用时再配制成可用的培养基,整个制备过程培养基需要严格的灭菌。目前对培养基灭菌通常使用高压蒸汽法,因为蒸汽具有很强的穿透能力,能够杀死各种微生物,微生物受热死亡的原因,主要是因高温使微生物体内的一些重要蛋白质,如酶等,发生凝固、变性,从而导致微生物无法生存而死。灭菌中加热温度和受热时间与灭菌程度和营养成分的破坏都有关系。一般液体培养基可用滤纸过滤法,滤纸应拆叠成折扇成漏斗形。琼脂灭菌 培养基制备器
平板的制备和储存:倾注融化的培养基到平皿中,使之在平皿中形成厚度至少为3mm(直径90mm的平皿,通常要加入18mL〜20mL琼脂培养基)。将平皿盖好皿盖后放到水平平面使琼脂冷却凝固。如果平板需储存,或者培养时间超过48h或培养温度高于40℃,则需要倾注更多的培养基。凝固后的培养基应立即使用或存放于暗处和(或)5±3℃冰箱的密封袋中,以防止培养基成分的改变。在平板底部或侧边做好标记,标记的内容包括名称、制备日期和(或)有效期。也可使用适宜的培养基编码系统进行标记。将倒好的平板放在密封的袋子中冷藏保存可延长储存期限。为了避免冷凝水的产生,平板应冷却后再装入袋中。储存前不要对培养基表面进行干燥处理。对于采用表面接种形式培养的固体培养基,应先对琼脂表面进行干燥:揭开平皿盖,将平板倒扣于烘箱或培养箱中(温度设为25~50℃);或放在有对流的无菌净化台中,直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。琼脂灭菌 培养基制备器培养基制备器利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。
培养基配制方法:正确制备培养基是微生物检验的较基础步骤之一,使用脱水培养基和其他成分,尤其是含有有毒物质(如胆盐或其他选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。使用商品化脱水合成培养基制备培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配制。如重量(体积)、pH、制备日期、灭菌条件和操作步骤等。实验室使用各种基础成分制备培养基时,应按照配方准确配制,并记录相关信息,如:培养基名称和类型及试剂级别、每个成分物质含量、制造商、批号、pH、培养基体积(分装体积)、无菌措施(包括实施的方式、温度及时间)、配置日期、人员等,以便溯源。
培养基的实验室制备:1.pH的测定和调整:用pH计测定pH,必要时在灭菌前调节pH,除特殊说明外,培养基灭菌后冷却至25℃时,要求pH的变化不超过0.2pH单位.通常使用浓度约为40g/L(约1mol/L)的氢氧化钠溶液或浓度约为36.5g/L(约1mol/L)的盐酸溶液调节pH。如果灭菌后调节pH,溶液需灭菌。注:商品化培养基在高压灭菌前后pH可能发生明显变化,但使用蒸馏水或去离子水时,灭菌前无需调节pH。2.分装:将配置好的培养基分装到适当的容器中,容器的体积至少为体积的1.2倍。配制培养基的原则:根据培养目的需要选择适宜的营养物质。
培养基的分装:培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时好好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基好终pH之用。选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。琼脂灭菌 培养基制备器
天然培养基是指一类利用动物、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。琼脂灭菌 培养基制备器
固体培养基的制作步骤:1、首先我们要准备好一个装有1000ml的烧杯,然后在准备好的杯中在放入500ml的蒸馏水,在将牛肉膏和蛋白胨、氯化钠这些都溶解在水中。2、其次我们在调节PH值,调节时需要百分之10的氢氧化钠溶液,将PH值调到7.2,在此也要定容到1000ml,较后在将这些液体都分别放入10个锥形瓶内,每一瓶都装100ml。3、然后我们再把剪碎的琼脂放进五个锥形瓶里,在给每个锥形瓶中放入2.4克,然后在把这十个锥形瓶瓶口都弄上棉花塞,瓶子也要弄上报纸。4、较后我们就可以将刚才所包扎好的一些锥形瓶放入灭菌锅里,灭菌时一定要记得灭菌十分钟,十分钟到了之后,在将锥形瓶拿出来,冷却之后就成了固体培养基了。注意事项:倒入时一定要注意容易。灭菌时间十分钟,要看好时间。注意事项:倒入时一定要注意容易。灭菌时间十分钟,要看好时间。琼脂灭菌 培养基制备器
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【详情】分装:配制好的培养基根据不同的用途分装在三角瓶、试管等容器中,分装试管,如果试管量很大,可用自动分液...
【详情】培养基配制--容器和水:配制培养基所用的容器不得影响培养基质量,一般为玻璃容器,培养基配制所用的容器...
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